Description générale
Les protéines STAT ("Signal Transducers and Activators of Transcription", transducteurs de signaux et activateurs de transcription) sont utilisées par les récepteurs d'un large éventail de ligands (cytokines, hormones, facteurs de croissance, neurotransmetteurs, etc.). La phosphorylation des protéines STAT, au niveau de résidus tyrosine conservés, active leur dimérisation via le domaine SH2, rapidement suivie de leur translocation dans le noyau. Les dimères STAT se lient à des motifs de l'ADN de l'élément de réponse à l'interféron (IRE pour "Interferon Response Element") et de la séquence activée par l'interféron gamma (GAS pour "Gamma interferon-Activated Sequence"), entraînant la régulation de la transcription des gènes en aval. Les voies STAT jouent un rôle important dans l'oncogenèse, la progression tumorale, l'angiogenèse, la motilité cellulaire, les réponses immunitaires et la différenciation des cellules souches.La phosphorylation des protéines est le principal mécanisme de régulation des fonctions cellulaires dans toutes les cellules eucaryotes. Des phosphorylations anormales sont impliquées dans la survenue et le développement de nombreuses maladies telles que les troubles métaboliques, les maladies inflammatoires, le cancer, etc. Les modifications de phosphorylation des protéines sont attribuables à des modifications des évènements de phosphorylation ainsi qu'à des changements liés à la concentration en protéines totales. Afin de distinguer les modifications de phosphorylation des changements d'expression des protéines, il est important de normaliser le signal de phosphorylation par rapport au signal des protéines totales. Pour répondre à ce besoin, le kit MILLIPLEX® MAP de double détection des STAT3 phospho/totales (réf. 48-623MAG) est conçu pour la détection simultanée des STAT3 phosphorylées (Tyr705) et des STAT3 totales, dans un seul et même puits, avec le système Luminex.
Spécificité
La réactivité croisée entre les anticorps et tous les autres analytes du kit est non détectable ou négligeable.
Application
Les dosages intracellulaires multiplex à base de billes utilisant la technologie Luminex permettent de quantifier de façon relative et simultanée les protéines de plusieurs voies de phosphorylation ou les protéines totales présentes dans des échantillons de lysats cellulaires et tissulaires. Les analytes disponibles pour ce kit multiplex sont les suivants : STAT3 (totales), STAT3 (Tyr705). Il s'agit d'un dosage réalisé par une incubation d'une nuit (4 °C). Le kit doit être utilisé avec le tampon de dosage fourni. Ce dosage nécessite 25 μl de lysat cellulaire filtré et dilué par puits. La plage de travail de la concentration en protéines va de 1 à 25 μg de protéines totales/puits (25 μl/puits à une concentration de 40 à 1 000 μg/ml). Analytes disponibles :STAT3 (totales)STAT3 (Tyr705)
Conditionnement
Plaque de 96 puits
Informations légales
Luminex is a registered trademark of Luminex Corp
MILLIPLEX is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
xMAP is a registered trademark of Luminex Corp
Clause de non-responsabilité
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