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Merck

PRON-RO

Roche

Pronasa

from Streptomyces griseus

Sinónimos:

proteasa inespecífica

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About This Item

Comisión internacional de enzimas:
Código UNSPSC:
12352204

origen biológico

Streptomyces griseus

Nivel de calidad

esterilidad

non-sterile

formulario

lyophilized powder

envase

pkg of 1 g (10165921001)
pkg of 5 g (11459643001)

fabricante / nombre comercial

Roche

concentración

0.5-2 mg/mL

Parámetros

35-40 °C optimum reaction temp.

técnicas

DNA extraction: suitable

color

white

pH óptimo

7.0-8.0

intervalo de pH

6.0-9.0

solubilidad

water: soluble 10-20 g/L

idoneidad

suitable for molecular biology

Nº de acceso NCBI

Nº de acceso UniProt

aplicaciones

life science and biopharma

actividad extraña

Deoxyribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.)
Ribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.)

temp. de almacenamiento

2-8°C

Información sobre el gen

Streptomyces griseus ... SGR_RS27460(6214424)

Descripción general

a 40°C con caseína como sustrato, pH 7,5, equivalente a aproximadamente 1270 PU/mg o aproximadamente 25 PUK/mg

Especificidad

La pronasa tiene una amplia especificidad al descomponer prácticamente todas las proteínas en sus aminoácidos constituyentes; resuelve ácidos carboxílicos y alcoholes.

Aplicación

Uso de pronasa para hidrolizar por completo las proteínas en aplicaciones experimentales. La pronasa se utiliza para la degradación de proteínas durante el aislamiento del ADN y el ARN, como en la extracción del ADN de los fagos o el aislamiento del ADN plasmídico. No es necesario permitir que la pronasa se autodigiera antes de su uso. También se utiliza en histoquímica y en cultivos celulares para disociación de los tejidos junto con la colagenasa y la tripsina, y para la producción de glucopéptidos a partir de glucoproteínas purificadas. Se ha utilizado para la descorionación de los embriones del pez cebra.

Acciones bioquímicas o fisiológicas

La pronasa tiene una amplia especificidad. No obstante, suele utilizarse cuando se requiere una degradación extensa o completa de las proteínas. Entre sus aplicaciones destacan el análisis de proteínas en los orgánulos celulares, la eliminación de las proteínas durante el aislamiento del ADN y el ARN, y la producción de hidrolizados de proteínas para el análisis de aminoácidos. Además, la pronasa supera a la tripsina en su capacidad para dispersar las líneas celulares de fibroblastos, destacando tanto en el desprendimiento de monocapas como en la creación de suspensiones unicelulares.

Definición de unidad

Una unidad de actividad proteasa inespecífica aumenta la velocidad de liberación de aminoácidos y péptidos folin-positivos de la caseína a +40 °C y pH 7,5. Para una unidad (U) se libera 1 μmol/min de tirosina y para la unidad «PU», el valor es de 1 μg/minuto (1 U = 181 PU); para la unidad «PUK», es de 0,1/minuto (se mide el cambio en la absorbancia de azul de molibdeno, formado por reacción con el reactivo de folin en condiciones tales que 1 PUK = 50 PU).

Nota de preparación

Estabilizadores: protección efectiva de los iones calcio

La preparación contiene acetato de calcio al 20% para estabilidad. Carece de almidón, como se indica en los procedimientos de control de calidad vigentes. La actividad de una disolución diluida que contenía calcio 0,01-0,1 M fue estable durante 24 horas a pH neutro entre 4 y 8 °C. La pronasa está también protegida de la inactivación por calor por bajos niveles de calcio.
Concentración de trabajo: de 0,5 a 2 mg/ml
Disolución de trabajo: Se recomienda agua destilada como disolvente.
La disolución de reserva se prepara añadiendo pronasa en polvo a agua destilada (de 10 a 20 mg/ml).
Condiciones de almacenamiento (disolución de trabajo): entre -15 y -25 °C

Reconstitución

El liofilizado es soluble en agua (de 10 a 20 mg/ml).

Almacenamiento y estabilidad

Conservar en seco

Otras notas

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Pictogramas

Exclamation markHealth hazard

Palabra de señalización

Danger

Frases de peligro

Clasificaciones de peligro

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Órganos de actuación

Respiratory system

Código de clase de almacenamiento

11 - Combustible Solids

Clase de riesgo para el agua (WGK)

WGK 1

Punto de inflamabilidad (°F)

does not flash

Punto de inflamabilidad (°C)

does not flash


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