FPCRN-RO

ADN polimerasa Taq FastStart^™, dNTPack

• Código UNSPSC: 41106300

Propiedades

• grado: Molecular Biology
• Nivel de calidad: 100
• formulario: liquid
• uso: sufficient for ≤1,250 reactions (04738403001); sufficient for ≤2,500 reactions (04738420001); sufficient for ≤250 reactions (04738357001); sufficient for ≤50 reactions (04738314001); sufficient for ≤500 reactions (04738381001)
• actividad específica: 5 U/μL
• envase: pkg of 1,000 U (04738381001 [4x250 U]); pkg of 2,500 U (04738403001 [10x250 U]); pkg of 5,000 U (04738420001 [20x250 U]); pkg of 100 U (04738314001); pkg of 500 U (04738357001 [2x250 U])
• fabricante / nombre comercial: Roche
• concentración: 40 U/mL; 55 U/mL
• Parámetros: 72 °C optimum reaction temp.
• técnicas: DNA amplification: suitable; PCR: suitable
• color: colorless
• pH: 8.0-9.0
• solubilidad: water: miscible
• idoneidad: suitable for molecular biology
• aplicaciones: life science and biopharma
• actividad extraña: nicking activity, none detected (up to 10U w.pBR 322-DNA); ribonuclease, none detected; unspecified endonuclease, none detected
• temp. de almacenamiento: −20°C

Descripción

Descripción general

El dNTPack consta de la ADN polimerasa Taq FastSatrt y una disolución lista para usar de nucleótidos de calidad para PCR. La ADN polimerasa Taq FastStart es una enzima versátil que puede utilizarse en una amplia variedad de aplicaciones y en múltiples plataformas de equipo. Esta ADN polimerasa Taq recombinante termoestable modificada es inactiva a temperaturas inferiores a +75 ºC, pero se activa tras una etapa de activación de 2 a 4 minutos con calor a +95 ºC. Dado que es inactiva a bajas temperaturas, la ADN polimerasa Taq FastStart no puede alargar los híbridos cebador-molde inespecíficos que cabe esperar que se formen a esas temperaturas. También se suministran un sistema amortiguador optimizado para PCR y una disolución rica en GC (CG-RICH) para permitir que la enzima maneje una amplia variedad de muestras.

Aplicación

La ADN polimerasa Taq FastStart^™ es una forma termoestable químicamente modificada de la ADN polimerasa Taq recombinante. La enzima está inactiva a temperaturas comprendidas entre +15 y +25°C durante la configuración de la PCR y luego se activa a +95°C durante la desnaturalización inicial. Esta enzima proporciona resultados superiores debido a su diseño enzimático exclusivo y al sistema tampón optimizado. La ADN polimerasa Taq FastStart es una herramienta ideal para la PCR de inicio en caliente, porque la enzima permanece inactiva durante la configuración de la PCR y antes de la etapa de desnaturalización inicial. Puede aplicarse para PCR:

• PCR de inicio en caliente hasta 3 kb
• RT-PCR de inicio en caliente hasta 3 kb
• PCR múltiple
• Muestras difíciles por ejemplo, estructuras secundarias o secuencias ricas en GC
• PCR automatizada por ejemplo, manipulación a temperaturas ambiente
• PCR cuantitativa (qPCR)

Para una máxima comodidad, seleccione la mezcla maestra para PCR FastStart concentrada x2 2x lista para usar.

Características y beneficios

Volumen de actividad: 5 U/μl
Cada dNTPack contiene sal de sodio de los nucleótidos sin aditivos 10 mM como una mezcla lista para usar.

• Mayor especificidad, sensibilidad y producción:

La PCR de inicio en caliente facilita la configuración de la PCR.

• Utilización de configuración robótica.

Utilice esta mezcla enzimática estable durante 24 horas entre +15 y +25°C.

• Evita la contaminación por arrastre de la PCR.

Incorporación de dUTP y utilización de la uracil-ADN glucosilasa para el pretratamiento de las mezclas maestras de la PCR.

• Rentable.

Utilice la cómoda disolución premezclada de nucleótidos de calidad para PCR.

Envase

1 kit que contiene 6 componentes

Calidad

Se ensaya la función de cada lote utilizando ADN genómico humano y cebadores específicos para el fragmento de 365 pb del gen tPA humano y un fragmento de 284 pb del gen de la Apo E con un contenido de CG del 74 %. También se analiza la ausencia de exonucleasas y endonucleasas y de actividad melladora.
Para más detalles, consúltense las Instrucciones de uso correspondientes.

Definición de unidad

Una unidad de ADN polimerasa FastStart se define como la cantidad de enzima que incorpora 10 nmol de trifosfatos de desoxirribonucleósidos totales en ADN precipitable en ácido en 30 minutos a +75 °C en las condiciones de ensayo indicadas en el análisis unidad.

Valoración unitaria: Se incuban 1 μg de ADN-M13mp9ss, 0,3 μg de cebador de secuenciación M13 y 0,1 μCi[α-³²P] dCTP con cantidades variables de unidades de ADN polimerasa Taq FastStart en 50 μl de tampón de incubación a 65 °C durante 60 minutos. Se determina la cantidad de dNTP incorporados.

Volumen de actividad: 5 U/μl

Almacenamiento y estabilidad

Mantenga el recipiente herméticamente cerrado y en un lugar bien ventilado.

Otras notas

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Los protocolos de inicio en caliente mejoran la especificidad, la sensibilidad y el rendimiento de la PCR. Los grupos de bloqueo termolábiles inactivan la enzima modificada entre +15 y +25°C. No se produce elongación cuando los cebadores se unen de manera inespecífica. La enzima se activa mediante eliminación de los grupos bloqueadores a +95°C durante 2 a 6 minutos. Se obtienen productos de la PCR con protuberancias 3′-A única, ideales para la clonación T/A. Para prevenir el arrastre de la PCR, utilice la Mezcla^PLUS de nucleótidos para PCR y la uracil-ADN glucosidasa termolábil.

Información legal

ADVERTENCIA PARA EL COMPRADOR: LICENCIA LIMITADA<br />El uso de este producto está cubierto por la patente estadounidense 6,127,155 y las reivindicaciones de patente correspondientes fuera de los EE.UU.  La adquisición de este producto incluye una inmunidad limitada intransferible contra pleitos según las reivindicaciones de patentes anteriores para utilizar sólo esta cantidad de producto para la propia investigación interna del comprador.  No se transfiere expresamente, por implicación ni por estoppel derecho alguno sobre ninguna otra reivindicación de patente ni derecho alguno de realizar servicios comerciales de ningún tipo, entre otros, informar de los resultados de las actividades del comprador por un precio u otra consideración comercial.  Este producto está indicado solo para investigación. El uso para diagnóstico humano y veterinario bajo patente de Roche requiere una autorización aparte de Roche.  Todos los demás usos distintos de la investigación interna y los usos para diagnóstico humano y veterinario bajo las reivindicaciones de la patente de Roche requieren una autorización aparte de Thermo Fisher Scientific. Puede obtenerse más información sobre las autorizaciones de compra de Roche poniéndose en contacto con el Licensing Department of Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, EE.UU. o Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Alemania.  Puede obtenerse más información sobre las autorizaciones de compra de Thermo Fisher Scientific poniéndose en contacto con Licensing Department of  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, EE.UU.</ br>ADVERTENCIA AL COMPRADOR: LICENCIA LIMITADA<br />El uso de este producto está cubierto por las patentes estadounidenses números 5,677,152 y 5,773,258 y las reivindicaciones de patente correspondientes fuera de los EE.UU.  La adquisición de este producto incluye una inmunidad limitada intransferible contra pleitos según las reivindicaciones de patentes anteriores para utilizar sólo esta cantidad de producto para la propia investigación interna del comprador.  No se transfiere expresamente, por implicación ni por estoppel derecho alguno sobre ninguna otra reivindicación de patente ni derecho alguno de realizar servicios comerciales de ningún tipo, entre otros, informar de los resultados de las actividades del comprador por un precio u otra consideración comercial.  Este producto está indicado solo para investigación.  El uso para diagnóstico humano y veterinario bajo patente de Roche requiere una autorización aparte de Roche.  Todos los demás usos distintos de la investigación interna y los usos para diagnóstico humano y veterinario bajo las reivindicaciones de la patente de Roche requieren una autorización aparte de Thermo Fisher Scientific. Puede obtenerse más información sobre las autorizaciones de compra de Roche poniéndose en contacto con el Licensing Department of Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, EE.UU. o Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Alemania.  Puede obtenerse más información sobre las autorizaciones de compra de Thermo Fisher Scientific poniéndose en contacto con Licensing Department of  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, EE.UU.

FastStart is a trademark of Roche

Solo componentes del kit

• FastStart Taq DNA Polymerase, in storage and dilution buffer 5 U/μl
• PCR Reaction Buffer, with 20 mM MgCl₂ 10x concentrated
• PCR Reaction Buffer, without MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution 25 mM
• GC-RICH Solution 5x concentrated
• PCR Nucleotide Mix

Información de seguridad

• Código de clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): does not flash
• Punto de inflamabilidad (°C): does not flash