TAQ-RO

ADN polimerasa Taq, 5 U/μl

optimum pH ~9.0 (20 °C), optimum reaction temp. 72 °C

• Sinónimos: Amplificación del adn, extensión del cebador, pcr, polimerasa, pcr, extensión del cebador, amplificación de adn
• Comisión internacional de enzimas: 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• Código UNSPSC: 41106300

Propiedades

• origen biológico: bacterial (Thermus aquaticus)
• Nivel de calidad: 100
• recombinante: expressed in E. coli
• grado: Molecular Biology
• formulario: liquid
• uso: sufficient for ≤1,000 reactions (11146173001); sufficient for ≤10,000 reactions (11435094001); sufficient for ≤2,000 reactions (11418432001); sufficient for ≤5,000 reactions (11596594001); sufficient for ≤200 reactions (11146165001)
• actividad específica: 5 U/μL
• mol peso: 95 kDa
• envase: pkg of 1,000 U (11418432001 [4 x 250 U]); pkg of 2,500 U (11596594001 [10 x 250 U]); pkg of 5,000 U (11435094001 [20 x 250 U]); pkg of 100 U (11146165001); pkg of 500 U (11146173001 [1 x 500 U])
• fabricante / nombre comercial: Roche
• Parámetros: 72 °C optimum reaction temp.
• técnicas: DNA sequencing: suitable; PCR: suitable
• color: colorless
• pH óptimo: ~9.0 (20 °C)
• solubilidad: water: miscible
• idoneidad: suitable for molecular biology
• Nº de acceso NCBI: AAA27507
• Nº de acceso UniProt: P19821
• aplicaciones: genomic analysis; life science and biopharma
• actividad extraña: Nicking activity 30 units, none detected; Ribonuclease 30 units, none detected; Unspecific endonucleases 30 units, none detected
• temp. de almacenamiento: −20°C

Descripción

Descripción general

La ADN polimerasa Taq es una ADN polimerasa 5′→3′ que carece de actividad exonucleasa 3′→5′. Es un polipéptido monocatenario con un peso molecular de aproximadamente 95 kDa.
La ADN polimerasa Taq se aisló originalmente de la eubacteria termófilaThermus aquaticus BM, una cepa que carece de la endonucleasa de restricción Taq I. La enzima se clonó en E. coli.

Aplicación

La ADN polimerasa Taq puede utilizarse en una PCR convencional simple. La ADN polimerasa Taq Roche Applied Tinciones está sujeta a rigurosos criterios de pureza y calidad. Esta preparación de ADN polimerasa Taq recombinante puede aplicarse para:

• PCR
• RT-PCR
• qPCR
• Otras reacciones de ampliación de cebador, como la secuenciación y el marcaje

Características y beneficios

Resultados reproducibles fiables:
Gran uniformidad entre lotes.
Sin necesidad de analizar cada lote:
La ADN polimerasa Taq es sometida a pruebas rigurosas.
Evita el arrastre en la PCR:
La combinación de la incorporación de dUTP con uracil-ADM glucosilasa evita la contaminación cruzada en la PCR.

Envase

1 kit que contiene 2 componentes

Calidad

Los análisis sistemáticos tienen amplicones de tamaño medio y un contenido de GC del 50 %. La ADN polimerasa Taq no tiene funciones de verificación y corrección de la transcripción ni de inicio en caliente (hot start) Presenta su actividad óptima a +75°C y a pH 9.
Carece de endonucleasa de restricción:
La enzima originariamente aislada de T. aquaticus BM carece de actividad endonucleasa de restricción Taq I. Cada lote se prueba para PCR utilizando λADN. En cada lote se prueba también la ausencia de actividad exonucleasa y endonucleasa, y de actividad melladora de acuerdo con los procedimientos de control de calidad vigentes.

Definición de unidad

Una unidad de ADN polimerasa Taq se define como la cantidad de enzima que incorpora 10 nmol de trifosfatos de desoxirribonucleósidos totales en ADN precipitable en ácido en 60 min a + 65 °C bajo las condiciones de ensayo indicadas antes.

Valoración unitaria: Disolución tampón de incubación:
67 mM Tris/HCl; pH 8,3/25 °C, 5 mM de MgCl₂, 10 mM mercaptoetanol, polidocanol al 0,2 %, 0,2 mg/ml de gelatina, 0,2 mM de dATP, dGTP y dTTP, y 0,1 mM de dCTP.

Procedimiento de incubación:
Se incuban M13mp9ss, cebador M13 (17mer) y 1 μCi (α^-32P) de dCTP con diluciones adecuadas de ADN polimerasa Taq en 50 μl de tampón de incubación a +65 °C durante 60 minutos. La cantidad de dNTP incorporados se determina mediante precipitación con ácido tricloroacético.

Volumen de actividad: 5 U/μl

Otras notas

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Información legal

El uso de este producto está cubierto por reivindicaciones de patentes en Estados Unidos y las correspondientes reivindicaciones fuera de los Estados Unidos. La adquisición de este producto incluye una inmunidad limitada intransferible contra pleitos según las reivindicaciones de patentes anteriores para utilizar sólo esta cantidad de producto para la propia investigación interna del comprador. No se transfiere expresamente, por implicación ni por estoppel derecho alguno sobre otra reivindicación de patente, ni derecho de ejecución de ningún método patentado ni derecho de realización de servicios comerciales de ningún tipo, entre otros, informar de los resultados de las actividades del comprador por un precio u otra consideración comercial. Este producto está indicado solo para investigación. Los usos diagnósticos bajo patente de Roche requiere una licencia aparte de Roche. Para más información sobre las licencias de compra, contacte con el Director de Licencias, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, EE.UU.

Solo componentes del kit

• Taq DNA Polymerase 5 U/μl
• PCR Buffer with MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution
• PCR Buffer without MgCl₂

Información de seguridad

• Frases de peligro: H412
• Consejos de prudencia: P273 - P501
• Clasificaciones de peligro: Aquatic Chronic 3
• Código de clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 2
• Punto de inflamabilidad (°F): does not flash
• Punto de inflamabilidad (°C): does not flash