MABS1254

Anticuerpo anti-O- GlcNAc, clon CTD110.6

clone CTD110.6, from mouse

• Sinónimos: O-GlcNAc, beta-O-GlcNAc, O-Linked N-Acetylglucosamine, beta-O-linked N-acetylglucosamine
• Código UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Propiedades

• origen biológico: mouse
• Nivel de calidad: 100
• forma del anticuerpo: purified immunoglobulin
• tipo de anticuerpo: primary antibodies
• clon: CTD110.6, monoclonal
• reactividad de especies (predicha por homología): all
• técnicas: ELISA: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• isotipo: IgMκ
• modificación del objetivo postraduccional: glycosylation
• Información sobre el gen: human ... OGT(8473)

Descripción

Descripción general

La modificación postraduccional de las proteínas por la βN-acetilglucosamina (βGlcNAc) a través de los restos hidroxilo de los residuos de serina o treonina se denomina O-ligada β-GlcNAc o simplemente O-GlcNAc. La O-GlcNAc es una de las modificaciones postraduccionales más abundantes dentro de los compartimientos nucleocitoplásmicos de todos los animales y plantas. A diferencia de otros tipos de glucosilaciones proteicas, la O-GlcNAc se produce exclusivamente dentro de los compartimientos nuclear y citoplásmico, y en general no se modifica más para formar estructuras más alargadas. Además, la O-GlcNAsilación es un proceso muy dinámico y reversible. La O-GlcNAc transferasa (OGT) une una O-GlcNAc a las proteínas en restos específicos de serina o treonina, mientras que la O-GlcNAcasa cataliza la eliminación/hidrólisis de la O-GlcNAc de las proteínas. De hecho, una interacción dinámica entre la O-GlcNAcilación y la fosforilación de serina/treonina desempeña un papel importante en la regulación de la señalización celular. La Tau y la ARN polimerasa II (Pol II) son dos proteínas bien conocidas que experimentan modificación por O-GlcNAcilación. En los cerebros humanos enfermos de Alzheimer, la tau se observa muy fosforilada y menos O-GlcNAcilada. De igual manera, la O-GlcNAc se elimina y se sustituye por O-fosfato en la secuencia CTD de la Poli-II cuando se inicia la fase de elongación de la transcripción.

Especificidad

El clon CTD110.6 detectó específicamente residuos de serina y de treonina con beta-O-GlcNAc , pero no con alfa-O-GlcNAc. La presencia de GlcNAc, pero no de GalNAc, abolió la detección de la modificación buscada. El clon CTD110.6 no reconoció péptidos con restos de serina y treonina no modificados (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).

La modificación de la diana no es específica de especie.

Inmunógeno

Epítopo: beta-O-GlcNAc.

Péptido conjugado con KLH con un resto de serina modificado con O-GlcNAc.

Aplicación

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (WB): 1,0 µg/ml de un lote representativo detectó proteínas O-GlcNAciladas en 7.5-15 µg de lisado de fibroblastos embrionarios de ratón natural (MEF), pero no en lisado de MEF con deficiencia de O-GlcNAc transferasa/OGT (cortesía de la Dra. Natasha Zachara y Gokben Yildirir, M.S.).
Análisis mediante ELISA: un lote representativo detectó el péptido (YSPTSPS) del dominio C-terminal (CTD) de la ARN polimerasa II con una sola serina o treonina O-GlcNAciladas, pero no el péptido no modificado correspondiente (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Análisis mediante inmunoprecipitación: un lote representativo causó inmunoprecipitación de proteínas O-GlcNAciladas procedentes de células madre pluripotentes humanas (hPSC) (Maury, J.J., et al. (2013). Stem Cell Res. 11(2):926-937).
Análisis mediante inmunoprecipitación: un lote representativo causó inmunoprecipitación de proteínas O-GlcNAciladas procedentes de extractos de células HeLa (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: un lote representativo detectó niveles similares de O-GlcNAcilación celular en células madre pluripotentes humanas (hPSC) no diferenciadas, en diferenciación y terminalmente diferenciadas (Maury, J.J., et al. (2013). Stem Cell Res. 11(2):926-937).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: un lote representativo detectó el péptido (YSPTSPS) del dominio C-terminal (CTD) de la ARN polimerasa II conjugada con BSA con beta-O-GlcNAc, pero no con alfa-O-GlcNAc, ni el péptido no modificado correspondiente. La presencia de GlcNAc, pero no de GalNAc, abolió la detección de las bandas buscadas (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: un lote representativo detectó proteínas O-GlcNAciladas en extracto nuclear HeLa, así como proteínas O-GlcNAciladas purificadas a partir del extracto citosólico y nuclear HeLa mediante columna de aglutinina de germen de trigo (WGA). El bloqueo de los anticuerpos por péptido inmunógeno antes de la inmunotransferencia abolió la detección de bandas buscadas (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia: un lote representativo detectó un aumento de proteínas O-GlcNAciladas en células Jurkat tratadas con el inhibidor de la glucosaminidasa PUGNAc y la glucosamina intermediaria de la vía de la hexosamina (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).

Categoría investigación
Comunicación molecular

El anticuerpo anti-O-GlcNAc, clon CTD110.6, es un anticuerpo contra la O-GlcNAc para utilizar en Western Blotting, ELISA e inmunoprecipitación.

Subcategoría de investigación
Modificación postraduccional general

Calidad

Evaluada mediante inmunotransferencia Western en lisado de células HeLa.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (western blot): 4,0 µg/ml de este anticuerpo detectaron proteínas O-GlcNAciladas en 10 µg de lisado de células HeLa.

Descripción de destino

Variable, dependiendo de los tamaños de las proteínas O-GlcNAciladas.

Forma física

Anticuerpo IgMκ monoclonal de ratón purificado en PBS con azida sódica al 0,05 %.

Presentación: Purificada

Almacenamiento y estabilidad

Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción.

Otras notas

Concentración: Consulte la ficha técnica específica del lote.

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Información de seguridad

• Código de clase de almacenamiento: 10 - Combustible liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 2
• Punto de inflamabilidad (°F): Not applicable
• Punto de inflamabilidad (°C): Not applicable