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ADN polimerasa de inicio en caliente KOD Xtreme

Ultra high fidelity dnapolymerase designed for the most challenging PCR applications including: crude sample PCR, amplification of long strand and highly GC-rich DNA templates.

• Sinónimos: High fidelity master mix, Hot start PCR, Hot start master mix
• Código UNSPSC: 41105500
• NACRES: NA.85

Propiedades

• Nivel de calidad: 100
• formulario: liquid
• uso: sufficient for 200 reactions
• Características: Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR; High Fidelity PCR; dNTPs included; hotstart
• fabricante / nombre comercial: Novagen^®
• condiciones de almacenamiento: OK to freeze
• técnicas: PCR: suitable
• entrada: crude DNA
• idoneidad: suitable for PCR
• temp. de almacenamiento: −20°C

Descripción

Descripción general

*Fabricado por Toyobo y distribuido por EMD Millipore. No disponible en Merck KGaA, Darmstadt, Alemania, de Japón.

Nota: La adquisición de este producto incluye una inmunidad contra demandas de patentes especificada en el prospecto del producto para utilizar sólo la cantidad adquirida y sólo para la investigación propia del comprador. No se asigna expresamente ningún otro derecho de patente (tales como los derechos de patente del proceso de 5' nucleasa), por implicación o por estoppel. Para mayor información sobre licencias de compra, contactar con el Director de Licencias de Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, EEUU.

La PCR consiste en la replicación de una muestra de ADN mediante una ADN polimerasa termoestable. La procesividad, la especificidad y la fidelidad de la enzima polimerasa utilizada puede influir en la eficacia, la reproducibilidad y el rendimiento de la reacción PCR. En la PCR de alta fidelidad se utiliza una ADN polimerasa con una baja tasa de error, que tiene como resultado un elevado grado de exactitud en la replicación del ADN de interés. La fidelidad es crucial cuando se requiere una amplificación precisa de la secuencia del gen deseado, por ejemplo, cuando se realiza una secuenciación o clonado directos para la expresión proteica consecutiva. Una mutación indebida podría afectar gravemente a sus estudios. Nuestros análisis han demostrado que las enzimas KOD son una elección fácil para una PCR rápida, precisa y de gran rendimiento. Nuestros biólogos moleculares trabajan para desarrollar y formular polimerasas que ofrezcan la especificidad, fidelidad y rendimiento más elevados durante la amplificación mediante PCR. Además, composiciones optimizadas de las disoluciones tampón, y mezclas maestras y parámetros de ciclado adecuados añaden facilidad de uso y reproducibilidad de los datos.
El kit de ADN polimerasa de inicio en caliente* KOD Xtreme<TMSYMBOL></TMSYMBOL> es una enzima de PCR optimizada para la amplificación de plantillas de ADN largas o ricas en GC, como puntas de colas de ratón, tejidos vegetales y aplicaciones en biología sintética. La exclusiva formulación le permite amplificar directamente de muestras mínimamente procesadas con lo que se consigue una amplificación muy eficiente de la diana de la PCR de una muestra sin procesar. El sistema consta de una ADN polimerasa KOD de ultra alta fidelidad que forma un complejo con dos anticuerpos monoclonales para permitir el termociclado de inicio en caliente junto con una disolución tampón 2X especialmente formulada. La polimerasa de ADN de inicio en caliente KOD Xtreme amplifica con rapidez y precisión fragmentos específicos de ADN genómico de hasta 24 kpb y fágico o plasmídico de hasta 40 kpb. La polimerasa de ADN de inicio en caliente KOD Xtreme amplifica satisfactoriamente muestras complejas de ADN que contienen hasta un 90 % de GC En cada kit se suministran 200 U de ADN polimerasa de inicio en caliente KOD Xtreme, una disolución tampón optimizada y dNTP suficientes para 200 reacciones de amplificación. La polimerasa produce ADN de extremos romos adecuados para la clonación con los kits Perfectly Blunt<TMSYMBOL></TMSYMBOL> y el vector LIC de Novagen.

Características y beneficios

• Optimizada para la mayor tasa de éxito de la PCR, incluso con las muestras más difíciles.
• Fidelidad 10 veces superior que las mezclas de Taq
• Amplifica de manera eficaz plantillas de ADN que contienen hasta un 90% de GC
• Amplifica dianas genómica de hasta 24 kbp
• Amplifica dianas de fagos/Lambda de hasta 40 kbp
• Elimina el cebado defectuoso y la formación de dímeros del cebador
• Cómoda configuración a temperatura ambiente compatible con la automatización

Componentes

• 1 x 200 U de ADN polimerasa de inicio en caliente KOD Xtreme<TMSYMBOL></TMSYMBOL>
• 3 x 1,7 ml de tampón Xtreme 2X
• 2 x 1 ml de dNTP (2 mM cada uno)

Advertencia

Toxicidad: Irritante (B)

Definición de unidad

Una unidad se define como la cantidad de enzima que catalizará la incorporación de 10 nmol de dNTP en forma insolube en ácido en 30 minutos a 75°C, en una reacción que contenga Tris-HCl 20 mM (pH 7,5 a 25°C), MgCl₂ 8 mM, DTT 7,5 mM, BSA 50 µg/l, 150 µM de dATP, dCTP, dGTP, dTTP (una mezcla de dTTP no marcado y de [³H]dTTP) y 150 µg/ml de ADN de timo de ternera activado.

Información legal

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Información de seguridad

• Código de clase de almacenamiento: 10 - Combustible liquids