T9003

Trypsin inhibitor

lyophilized powder

• Synonym(e): Hageman Faktor-Inhibitor, Popkorn-Inhibitor, SBTI
• CAS-Nummer: 9035-81-8
• EG-Nummer: 232-906-9
• MDL-Nummer: MFCD00082103
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• product name: Trypsin-Inhibitor aus Glycine max (soybean), lyophilized powder
• Biologische Quelle: Glycine max (soybean)
• Qualitätsniveau: 300
• Form: lyophilized powder
• Mol-Gew.: 20.1 kDa
• Löslichkeit: H₂O: >10 mg/mL; phosphate buffer: >10 mg/mL (hazy above 10 mg/ml); soluble
• Anwendung(en): diagnostic assay manufacturing
• Lagertemp.: 2-8°C

Beschreibung

Anwendung

Trypsin wurde in einer Studie zur Bewertung der potenziellen Applikation in der Tierzellkultur einer alkalischen Protease von einem nicht toxischen Mangrovenisolat von Vibri sp. V26 verwendet. Trypsin wurde außerdem in einer Studie zur Verbesserung des Nachweises von Pilzen in eosinophilem Mucin eingesetzt.

Biochem./physiol. Wirkung

Dieser Inhibitor wirkt gegen Trypsin und in geringerem Maß auch gegen Chymotrypsin und Plasmin. Er hemmt auch Proteasen mit ähnlichen Mechanismen wie Trypsin, Plasmakallikrein und Gerinnungsfaktor X. Der Trypsininhibitor wirkt nicht gegen Metallproteasen, gewebebasiertes Kallikrein, Säureproteasen oder Thioproteasen. Dieser Inhibitor wirkt, indem er einen 1:1-stöchiometrischen Komplex mit der proteaseaktiven Stelle bildet und anschließend eine einzelne Arginin-Isoleucin-Bindung an dem Inhibitor spaltet. Die Hemmung ist sowohl reversibel als auch pH-Wert-abhängig.

Komponenten

Der Sojabohnen-Trypsininhibitor ist ein monomeres Protein, das 181 Aminosäure-Rückstände in einer einzelnen Polypeptidkette enthält, die durch zwei Disulfidbrücken vernetzt ist.

Einheitendefinition

Eine Trypsin-Einheit erzeugt ein ΔA₂₅₃ von 0,001 pro Minute mit BAEE als Substrat bei pH 7,6 bei 25 °C; Reaktionsvolumen 3,2 mL, 1 cm Lichtweg.

Eine Trypsineinheit = A₂₅₃ von 0,001 je Minute mit N-Alpha-benzoyl-L-argininethylester (BAEE) als Substrat bei einem pH-Wert von 7,6 und 25 °C.

Angaben zur Herstellung

Der Trypsininhibitor ist zu 10 mg/ml in Wasser und Phosphatpuffern löslich. Er ist in Balanced Salt Solutions zu 1 mg/ml und in serumfreien Medien löslich. Konzentrierte Lösungen von mehr als 10 mg/ml können trüb und gelblich bis bernsteinfarben sein. Nach der Trypsinisierung von Zellen in 1 ml Trypsininhibitorlösung zu 1 mg/ml für jeden ml Trypsinlösung für die Dissoziation erneut suspendieren. Die Zellsuspension sollte anschließend bei 1.000 U/min zentrifugiert werden, um ein Zellpellet zu bilden.

Lösungen können eine Aktivität behalten, wenn sie kurzzeitig bei 2–8 °C gelagert werden. Lösungen sind in gefrorenen Aliquoten bei -20 °C stabil.

Hinweis zur Analyse

Ein mg Trypsininhibitor hemmt 1,0–3,0 mg Trypsin mit einer Aktivität von ca. 10.000 BAEE-Einheiten je mg Protein.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H317,H334
• P-Sätze: P261 - P272 - P280 - P284 - P302 + P352 - P333 + P313
• Gefahreneinstufungen: Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1
• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)