H4502

Hexokinase aus Saccharomyces cerevisiae

Type F-300, lyophilized powder, ≥130 units/mg protein (biuret)

• Synonym(e): Hexokinase D, Hexokinase Typ IV, ATP:D-Hexose-6-phosphotransferase, Hexokinase aus Hefe
• CAS-Nummer: 9001-51-8
• EC-Nummer: 2.7.1.1 (BRENDA, IUBMB)
• EG-Nummer: 232-611-5
• MDL-Nummer: MFCD00131321
• UNSPSC-Code: 12352204
• eCl@ss: 32160410
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Saccharomyces cerevisiae
• Qualitätsniveau: 200
• Typ: Type F-300
• Form: lyophilized powder
• Spezifische Aktivität: ≥130 units/mg protein (biuret)
• Mol-Gew.: 110 kDa
• Aufgereinigt durch: crystallization
• Lagerbedingungen: (Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place)
• Farbe: white
• Anionenspuren: sulfate (SO₄^2-): free
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P04806; P04807
• Fremdaktivität: ATPase, myokinase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, 6-phosphogluconic dehydrogenase and phosphoglucose isomerase ≤0.01%
• Lagertemp.: −20°C
• Angaben zum Gen: bakers yeast ... HXK1(850614) , HXK2(852639)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Forschungsbereich: Zellsignalisierung

Das Hexokinase 1(HXK1)-Gen ist auf dem Saccharomyces cerevisiae-Chromosom VI lokalisiert. HXK1 wird in Säugetiergewebe universell exprimiert und kommt in Hirn, Erythrozyten, Lymphozyten und Fibroblasten reichlich vor.

Anwendung

Hexokinase wird wie folgt verwendet:

• für den Glucoseverdau zur Messung des Glucosegehalts in den Wurzel- und Stammproben von Quercus velutina
• zur Behandlung einer ADP (Adenosindiphosphat)-Lösung zusammen mit D-Glucose zur Entfernung des kontaminierenden ATP (Adenosintriphosphat)
• im aus 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinethansulfonsäure bestehenden Puffer (pH 7,5) für die ADP-[13CU]Glucosesynthese

Biochem./physiol. Wirkung

Hexokinase katalysiert den geschwindigkeitsbestimmenden ersten Schritt der Glykolyse, der die Phosphorylierung von Glucose umfasst.

Katalysiert die Phosphorylierung von D-Hexose-Zuckern an der C6-Position unter Verwendung von ATP als Phosphatquelle.

Die Phosphorylierungsrate unterscheidet sich je nach den Hexosen (pH 7,5, 30 °C).
D-Fructose K_M: 0,33 mM
D-Glucose K_M: 0,12 mM
D-Mannose K_M: 0,05 mM

Hefe-Hexokinase existiert als zwei ähnliche Isoformen, PI und PII (A und B), mit einem isoelektrischen Punkt von 5,25 bzw. 4.

Molekülmasse: ~ 54 kDa (Monomer)
~ 110 kDa (Dimer)
Optimaler pH-Wert: 7,5 bis 9,0
Extinktionskoeffizient: E^1 % = 8,85 (PI) und 9,47 (PII) bei 280 nm

Aktivatoren: Hexokinase erfordert Mg²⁺-Ionen (K_M = 2,6 mM) für die Aktivität. Hexokinase wird von Katecholaminen und damit verbundenen Verbindungen aktiviert.

Inhibitoren: Sorbose-1-Phosphat, Polyphosphate, 6-Deoxy-6-fluorglucose, 2-C-Hydroxymethylglucose, Xylose, Lyxose und thiolreaktive Verbindungen (Hg²⁺ und 4-Chlormercuribenzoat)

Qualität

Gemisch von Isoenzymen.

Einheitendefinition

Eine Einheit phosphoryliert 1,0 μMol D-Glucose pro Minute bei einem pH-Wert von 7,6 und 25 °C.

Physikalische Form

Lyophilisiertes Pulver, das ca. 15 % Natriumcitrat enthält

Rekonstituierung

Mit Wasser oder Citratpuffer, pH 7,0, rekonstituieren. Studien haben eine ausgezeichnete Stabilität während des wiederholten Gefrierens und Auftauens über einen Mindestzeitraum von 30 Tagen nachgewiesen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)