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Merck

ESPCAS9PRO

Sigma-Aldrich

eSpCas9-Protein

from Streptococcus pyogenes with mutations conferring enhanced specificity, recombinant, expressed in E. coli, 1X NLS

Synonym(e):

Cas9 mit verbesserter Spezifizität, eCas9, eSpCas9, eSpCas9 1.1, eSpyCas9

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352202
NACRES:
NA.51

Rekombinant

expressed in E. coli

Qualitätsniveau

Assay

≥95% (SDS-PAGE)

Form

lyophilized powder

Verpackung

pkg of 1 kit (3 components)

Anwendung(en)

CRISPR

Versandbedingung

ambient

Lagertemp.

−20°C

Allgemeine Beschreibung

Rekombinantes eSpCas9-GFP-Protein aus Streptococcus pyogenes (~160 kD) ist ein gebrauchsfertiges Reagens für Genome-Engineering-Experimente. In Kombination mit zielspezifischer Guide-RNA agiert eSpCas9-Protein als eine gerichtete Nuklease, die sich für die Transfektion von Zellkulturen und die beschleunigte Entwicklung von genetisch modifizierten Tieren mittels Injektion eines einzelligen Embryos eignet.

Anwendung

Funktionelle Genomik/Targetvalidierung/Genome Editing

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Verbesserte Spezifizität im Vergleich zu Wildtyp-Cas9
  • Hochaktiv
  • Bereit zur Injektion/Transfektion

Verpackung

Pkg. mit 50 μg
Pkg. mit 250 μg

Komponenten

Jedes Kit umfasst:
  • ein Fläschchen mit rekombinantem eSpCas9-Protein
  • ein Fläschchen mit 1 ml 1× Verdünnungspuffer
  • ein Fläschchen mit 1 ml nukleasefreiem Wasser mit Glycerin

Prinzip

Neu entwickeltes eSpCas9 ermöglicht die effiziente Manipulation des Zielgens mit etablierten CRISPR-Systemen und weist den Vorteil verringerter Off-Target-Effekte auf. Punktmutationen im chromosombindenden Motiv von SpCas9, wie von Slaymaker, et al. beschrieben, bieten eine höhere On-Target-Genauigkeit ohne Verlust der Spaltungswirkung.

Rekonstituierung

Lyophilisiertes S. pyogenes eSpCas9-Protein sollte erneut in der Rekonstitutionslösung suspendiert werden, um die gewünschte Konzentration zur Lagerung bereitzustellen. Tippen Sie sanft gegen das Röhrchen, um das lyophilisierte Pulver vollständig zu lösen, anschließend 10 Minuten auf Eis inkubieren und das Röhrchen schleudern, um das Material an den Boden des Röhrchens zu bringen.

Sonstige Hinweise

Verwenden Sie unser CRISPR Selection Tool, um gRNA zu bestellen

Sehen Sie sich unsere anderen MISSION® Cas9-Proteine an: SigmaAldrich.com/CRISPRproteins

Rechtliche Hinweise

MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Nur Kit-Komponenten

Produkt-Nr.
Beschreibung

  • Enhanced specificity Cas9-NLS from Streptococcus pyogenes, expressed in Escherichia coli

  • Dilution buffer for Cas9 proteins

  • Reconstitution solution for Cas9 proteins

Lagerklassenschlüssel

10 - Combustible liquids

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable


Analysenzertifikate (COA)

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CRISPR off-target analysis in genetically engineered rats and mice
Keith R. Anderson, et al
Nature Methods (2018)
Evan R Stark-Dykema et al.
Scientific reports, 12(1), 8554-8554 (2022-05-21)
Mammalian sex chromosomes are enriched for large, nearly-identical, palindromic sequences harboring genes expressed predominately in testicular germ cells. Discerning if individual palindrome-associated gene families are essential for male reproduction is difficult due to challenges in disrupting all copies of a
Rationally engineered Cas9 nucleases with improved specificity.
Slaymaker, I.M., et al.
Science, 351, 84-88 (2015)

Protokolle

Sigma-Aldrich® sgRNA, crRNA and tracrRNA come HPLC purified as standard with our performance guarantee—even for custom designs.

The CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) system was discovered in bacteria, where it functions as an adaptive immune system against invading viral and plasmid DNA.

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