TAQL-RO

Taq-DNA-Polymerase, 1 U/μl

suitable for PCR, hotstart: no, dNTPs included: no

• Synonym(e): DNA-Amplifikation, PCR, Polymerase, Primer-Extension
• EC-Nummer: 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSC-Code: 41106300

Eigenschaften

• Biologische Quelle: bacterial (Thermus aquaticus BM)
• Qualitätsniveau: 100
• Rekombinant: expressed in E. coli
• Form: liquid
• Verwendung: sufficient for ≤2,000 reactions (11647687001); sufficient for ≤500 reactions (11647679001)
• Spezifische Aktivität: 1 U/μL
• Mol-Gew.: ~95 kDa
• Leistungsmerkmale: dNTPs included: no; hotstart: no
• Verpackung: pkg of 1,000 U (11647687001 [4 x 250 U]); pkg of 250 U (11647679001)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Konzentration: 25 U/mL; 30 U/mL
• Parameter: 72 °C optimum reaction temp.
• Methode(n): PCR: suitable
• Farbe: colorless
• Aufnahme: purified DNA
• Optimaler pH-Wert: ~9.0 (20 °C)
• Löslichkeit: water: miscible
• Eignung: suitable for PCR; suitable for molecular biology
• NCBI-Hinterlegungsnummer: AAA27507; ; ; AAA27507
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P19821
• Anwendung(en): genomic analysis; life science and biopharma
• Fremdaktivität: Endonucleases 20 units, none detected; Nicking activity 20 units, none detected
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Dieses Enzym wurde in E.coli kloniert und nach Maßgabe der aktuellen Qualitätskontrollverfahren frei von unspezifischen Endo- oder Exonukleasen isoliert. Taq-DNA-Polymerase ist eine hochprozessive 5′–3′-DNA-Polymerase ohne 3′–5′-Exonuklease-Aktivität. Sie besteht aus einer einzelnen Polypeptidkette mit einem Molekulargewicht von etwa 95 kDa. Das Enzym hat bei einem pH-Wert von etwa 9 (eingestellt bei 20 °C) und Temperaturen von etwa +75 °C seine höchste Aktivität. Taq-DNA-Polymerase nutzt auch modifizierte Desoxyribonukleosidtriphosphate als Substrat und kann zur Markierung von DNA-Fragmenten mit Radionukleotiden, Digoxigenin, Fluorescein oder Biotin verwendet werden.
Aufgrund der hohen Prozessivität, der fehlenden Exonuklease-Aktivität und der Temperaturoptima der Taq-DNA-Polymerase kann dieses Enzym zur DNA-Sequenzierung eingesetzt werden, insbesondere in Fällen, in denen die Auflösung von Sekundärstrukturen eine wichtige Rolle spielt.

Anwendung

Mit dieser geringeren Konzentration unserer rekombinanten Taq-DNA-Polymerase können kleine Mengen an Polymerase genauer und einfacher pipettiert werden. In jeder anderen Hinsicht ist dieses Präparat identisch mit unserem höher konzentrierten (5 U/μl) Präparat und kann für folgende Anwendungen eingesetzt werden:

• PCR
• RT-PCR
• Andere Primer-Extensionsreaktionen wie Sequenzierung und Markierung

Verpackung

1 Kit mit 4 Komponenten

Einheitendefinition

Eine Einheit Taq-DNA-Polymerase ist definiert als die Enzymmenge, die innerhalb von 60 min bei +65 °C unter den oben angegebenen Assay-Bedingungen 10 nmol der gesamten Desoxyribonukleosidtriphosphate in Säure-fällbare DNA einbaut.

Assay: Inkubationspuffer:
67 mM Tris/HCl; pH 8,3/25 °C, 5 mM MgCl₂, 10 mM Mercaptoethanol, 0,2 % Polydocanol, 0,2 mg/ml Gelatine, je 0,2 mM dATP, dGTP, dTTP und 0,1 mM dCTP.

Inkubationsverfahren:
M13mp9ss, M13-Primer (17mer) und 1 μCi (α^-32P) dCTP werden mit geeigneten Verdünnungen von Taq-DNA-Polymerase in 50 μl Inkubationspuffer bei +65 °C für 60 Minuten inkubiert. Die Menge der eingebauten dNTPs wird durch Trichloressigsäureausfällung bestimmt.

Volumenaktivität: 1 U/μl

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Rechtliche Hinweise

Die Verwendung dieses Produkts unterliegt US-Patentansprüchen und entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produktes für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Es wird weder ausdrücklich noch implizit oder durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen, ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf, das Berichten der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Diagnostische Verwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Weitere Informationen über den Erwerb von Lizenzen erhalten Sie vom Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.

Nur Kit-Komponenten

• Taq DNA Polymerase 1 U/μl
• PCR Buffer with MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution
• PCR Buffer without MgCl₂

Sicherheitshinweise

• H-Sätze: H412
• P-Sätze: P273 - P501
• Gefahreneinstufungen: Aquatic Chronic 3
• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 2
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash