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Merck

04942078001

Roche

Dispase® II (neutrale Protease, Klasse II)

lyophilized, from bacterial, Roche, pkg of 5 × 1 g

Synonym(e):

Dissoziationsenzym, Gewebedissoziation, neutrale Protease

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

EC-Nummer:
UNSPSC-Code:
12352200

Biologische Quelle

bacterial

Qualitätsniveau

Sterilität

non-sterile

Form

lyophilized

Spezifische Aktivität

≥0.8 units/mg protein (37 °C, casein as substrate, pH 7.5)

Verpackung

pkg of 5 × 1 g

Hersteller/Markenname

Roche

Optimaler pH-Wert

6.0-8.5

Anwendung(en)

sample preparation

Allgemeine Beschreibung

Dispase ist eine neutrale, schnell wirkende, sanfte Protease, die die intakte Epidermis von der Dermis trennt. Außerdem trennt sie intakte kultivierte Epithelzellen von der Trägerschicht (Substratum). Sie spaltet die Basalmembranzone und die Epithelzellen bleiben intakt.

Spezifität

Dispase ist eine unspezifische Metallprotease.

Anwendung

Dispase® wird zur Präparation von Zellen aus vielen verschiedenen Geweben und Organen verwendet. Das Enzym ist nachweislich ein schneller, effektiver und dennoch sanfter Wirkstoff für den Aufschluss der extrazellulären Matrix von Gewebe zur Freisetzung von einzelnen Zellen für die Zellkultur (primäre Zellkultur) oder für die Zellernte von bereits in einer Kultur befindlichen Zellen, um diese in ein neues Substrat (sekundäre Kultur) zu übertragen. Des Weiteren wird es zur Vermeidung von unerwünschten Zellverklumpungen in Suspensionskulturen eingesetzt.

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Schneller, effektiver und dennoch sanfter Wirkstoff zur Freisetzung von Zellen mit minimalen Zellschäden
  • Wahrt die Integrität der Zellmembran
  • Stammt nicht von Säugetieren – frei von Kontaminationen durch Mykoplasmen und tierische Viren
  • Äußerst stabil gegenüber Temperatur- und pH-Werteinflüssen sowie gegenüber Interferenzen durch Serumkomponenten
  • Einfache Inaktivierung durch Chelatbildner oder durch Auflösen
  • Stärkere Aktivität und höhere Anwenderfreundlichkeit

Einheitendefinition

Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die unter Assaybedingungen (pH 7,5, +37 °C) innerhalb von 1 Minute Folin-positive Aminosäuren und Peptide freisetzt und entspricht 1 μmol (181 μg) Tyrosin.
Ein praktischer Vergleich zwischen den Einheiten von Roche für Dispase® II und den in der japanischen Literatur zitierten Einheiten (wo Dispase®-Konzentrationen von 1.000 bis 2.000 Einheiten/ml nicht ungewöhnlich sind) deutet darauf hin, dass eine Roche-Einheit ca. 600 japanischen Dispase-Einheiten entspricht.
Eine Einheit von Roche Applied Science® Dispase entspricht 181 Protease-Einheiten (PE), die bei der Freisetzung von Aminosäuren gemessen werden und die pro Min. und ml bei einem pH-Wert von 7,5 und +37 °C 1 μg Tyrosin entsprechen.

Angaben zur Herstellung

Aktivator: Die optimale Ca2+-Konzentration beträgt 2 mM. Die Enzympräparationen enthalten ausreichend Ca2+ für eine optimale Aktivität.
Inhibitoren: EDTA, EGTA, Hg2+ und andere Schwermetalle. Dispase wird durch Serum nicht gehemmt.
Arbeitskonzentration: 0,6 bis 2,4 U/ml
Arbeitslösung: Herstellung von Stamm- und Arbeitslösungen:

Zum Herstellen einer Stammlösung von 10 mg/ml das lyophilisierte Dispase®-II-Enzym in HEPES-gepufferter Kochsalzlösung (50 mM HEPES/KOH, pH 7,4, 150 mM NaCl) auflösen. Zum Herstellen der Arbeitslösung die oben genannte Stammlösung mit dem Kulturmedium für die isolierten Zellen auf eine Endkonzentration von 0,6 bis 2,4 U/ml auflösen. Bitte beachten, dass Konzentrationen von über 2,4 U/ml nicht empfohlen werden. Die Arbeitslösung durch eine 0,22-μm-Filtermembran filtern, um optimale Ergebnisse zu erhalten.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Die rekonstituierte Stammlösung ist bei 2 bis 8 °C 2 Wochen haltbar. Für eine Lagerung von bis zu 2 Monaten sollte die Stammlösung in Aliquoten eingefroren werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden. Die mit PBS verdünnte Arbeitslösung ist bei 2 bis 8 °C 3 Tage haltbar.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 2 bis 8 °C aufbewahren (Trocken lagern!)

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.

Rechtliche Hinweise

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.

Piktogramme

Exclamation markHealth hazard

Signalwort

Danger

Gefahreneinstufungen

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Zielorgane

Respiratory system

Lagerklassenschlüssel

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

Flammpunkt (°F)

does not flash

Flammpunkt (°C)

does not flash


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