MABS157

Anti-O-verknüpfter-N-Acetylglucosamin-Antikörper, Klon RL2

clone RL2, from mouse

• Synonym(e): O-Linked N-Acetylglucosamine
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: RL2, monoclonal
• Speziesreaktivität (Voraussage durch Homologie): all
• Methode(n): affinity binding assay: suitable; electron microscopy: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG1κ
• Versandbedingung: wet ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... OGT(8473)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Die posttranslationale Proteinmodifikation mittels β-verknüpftem N-Acetylglucosamin (β-GlcNAc) durch die Hydroxylgruppen an Serin- oder Threoninresten wird als O-verknüpfte β-GlcNAc oder einfach O-GlcNAc bezeichnet. O-GlcNAc ist eine der am häufigsten vorkommenden posttranslationalen Modifikationen in den nukleozytoplasmatischen Kompartimenten aller Tiere und Pflanzen. Anders als andere Arten der Proteinglykosylierung erfolgt O-GlcNAc ausschließlich in den nukleären und zytoplasmatischen Kompartimenten und sie wird in der Regel nicht weiter modifiziert, um längere Strukturen zu bilden. Darüber hinaus ist die O-GlcNAcylierung ein äußerst dynamischer und reversibler Prozess. Die O-GlcNAc-Transferase (OGT) bindet O-GlcNAc an Proteine an spezifischen Serin- und Threoninresten, während O-GlcNAcase die Entfernung/Hydrolyse von O-GlcNAc aus Proteinen katalysiert. Ein dynamisches Zusammenspiel zwischen O-GlcNAcylierung und Serin/Threonin-Phosphorylierung spielt in der Tat eine wichtige Rolle bei der Regulierung der zellulären Signalübertragung. Tau und RNA-Polymerase II (Pol II) sind zwei bekannte Proteine, die durch O-GlcNAcylierung modifiziert werden. Im Gehirn von Alzheimer-Patienten wird Tau umfangreich phosphoryliert und weniger stark O-GlcNAcyliert. Ebenso wird O-GlcNAc entfernt und durch O-Phosphat an der Poly-II-CTD ergänzt, wenn die Elongationsphase der Transkription eingeleitet wird.

Spezifität

Die Zielstruktur ist nicht speziesspezifisch.

Zur spezifischen Erkennung von O-verknüpften-N-Acetylglucosamin(O-GlcNAc)-Gruppen an O-GlcNAcylierten Proteinen und Peptiden. Weist eine geringe Reaktivität gegenüber freiem GIcNAc und keine Reaktivität gegenüber GalNac auf. Die Behandlung von O-GlcNAcylierten Proteinen mit Galactosyltransferase führt zur Galactosylierung von O-GlcNAc über eine β1–4-Verbindung und zum vollständigen Bindungsverlust durch Klon RL2 (Holt, G.D., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1157–1164).

Immunogen

Aus Kernhüllen der Rattenleber, die dem O-verknüpften N-Acetylglucosamin der Ratte entsprechen, aufgereinigte Porenkomplex-Lamina-Fraktion.

Anwendung

Der Anti-O-verknüpfte-N-Acetylglucosamin-Antikörper, Klon RL2, ist ein Antikörper gegen O-verknüpftes Acetylglucosamin zur Verwendung in Western Blots, Immunzytochemie, Affinitätsbindungsassays, Elektronenmikroskopie und Immunpräzipitation.

Immunzytochemische Analyse: Mit 4,0 µg/ml aus einer repräsentativen Charge wurde O-verknüpftes N-Acetylglucosamin in HeLa-Zellen nachgewiesen.
Immunzytochemische Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden die Kernhüllen aber nicht das Kerninnere von mit Digitonin permeabilisierten HeLa-Zellen immungefärbt. Klon RL2 färbte das Kerninnere nur bei mit Triton X-100 permeabilisierten HeLa-Zellen ohne intakte Kernhüllen (Adam, S.A., et al. (1990). J. Cell Biol. 111(3):807–816).
Affinitätsbindungsassay: Eine repräsentative Charge wurde mit 125I radioaktiv markiert und ihre Bindungseigenschaften gegenüber isolierten Kernhüllen aus der Rattenleber wurden untersucht (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143–1156).
Elektronenmikroskopie: Mit einer repräsentativen Charge wurde die Immunreaktivität von O-GlcNAc in isolierten Kernhüllen aus der Rattenleber lokalisiert (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143–1156).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden O-GlcNAcylierte Proteine in Kernhüllenpräparaten aus der Rattenleber nachgewiesen (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143–1156; Holt, G.D., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1157–1164).
Analyse mittels Immunpräzipitation: Mit einer repräsentativen Charge wurden O-GlcNAcylierte Proteine aus solubilisierten Kernhüllenpräparaten aus der Rattenleber mittels Immunpräzipitation ausgefällt. Die Vorbehandlung der Kernhüllenpräparate mit Galactosyltransferase verhinderte die Immunpräzipitation von Glykoproteinen durch Klon RL2 (Snow, C.M., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1143–1156; Holt, G.D., et al. (1987). J. Cell Biol. 104(5):1157–1164).

Qualität

Beurteilt mittels Western Blot in HeLa-Zelllysat.

Western-Blot-Analyse: Mit 1,0 µg/ml dieses Antikörpers wurde O-verknüpftes N-Acetylglucosamin in 10 µg HeLa-Zelllysat nachgewiesen.

Zielbeschreibung

Ja nach Größe des/der O-GlcNacylierten Proteins/e variabel.

Physikalische Form

Format: Aufgereinigt

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable