MABF39-I

Anti-DC-STAMP-Antikörper, Klon 1A2

clone 1A2, from mouse

• Synonym(e): Dendritic cell-specific transmembrane protein, DC-STAMP, Dendrocyte-expressed seven transmembrane protein, FIND, hDC-STAMP, IL-four-induced protein, Transmembrane 7 superfamily member 4
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.45

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: 1A2, monoclonal
• Speziesreaktivität: mouse, human
• Methode(n): flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG2aκ
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NP_110415.1
• UniProt-Hinterlegungsnummer: Q9H295
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... DCSTAMP (81501)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Das dendritische zellspezifische Transmembranprotein (UniProt Q9H295; auch bekannt als DC-STAMP, dendrozytenexprimiertes 7-Transmembranprotein, FIND, hDC-STAMP, IL4-induziertes Protein, Mitglied 4 der Transmembran-7-Superfamilie) wird vom Gen DCSTAMP (auch TM7SF4 genannt) (Gen-ID 81501) in Menschen kodiert. DC-STAMP ist ein 6-Transmembranprotein, das für die Zell-Zell-Fusion zur Bildung mehrkerniger Osteoklasten (OCs) während der Osteoklastogenese unerlässlich ist. Die DC-STAMP-Expression wird unter den Osteoklasten-Vorläuferzellen (OCP) hochreguliert, wenn sie OC-fördernden Zytokinen wie dem Rezeptor-Aktivator des Nuklearfaktor-κB(NF-κB)-Liganden (RANKL) exponiert sind, und Dcstamp-Knockout(KO)-Mäuse haben wenige mehrkernige TRAP+ OCs und eine erhöhte Knochenmasse. Andererseits führt die Überexpression von DC-STAMP in transgenen (Tg) Mäusen zu einer beschleunigten Zell-Zell-Fusion während der OCP-Differenzierung und zu einer verstärkten Knochenresorption. DC-STAMP ist ein 6-Trasmembranprotein (AS 35–55, 58–78. 98–118, 210–230, 293–313, 377–397), bei dem sowohl das N- als auch das C-terminale Ende des Proteins intrazellulär exponiert ist (AS 1–34, 398–470). Das C-terminale zytoplasmatische Ende von DC-STAMP enthält ein Immunrezeptor-Tyrosin-basiertes inhibitorisches Motiv oder eine ITIM-Sequenz (407-SFYPSV-412), das bzw. die, wenn es bzw. sie am Tyrosin-Rest phosphoryliert wird, SHP-1 rekrutiert. Ein DC-STAMP-neutralisierender Antikörper blockiert die OC-Bildung in vitro und hebt die zelluläre DC-STAMP- und SHP-1-Tyrosinphosphorylierung auf.

Spezifität

Klon 1A2 erkennt ein Epitop, das zwischen DC-STAMP des Menschen und der Maus in der dritten extrazellulären Domäne konserviert ist.

Immunogen

Epitop: Der dritte extrazelluläre Domäne.

KLH-konjugiertes lineares Peptid, das einer Sequenz aus der dritten extrazellulären Domäne von humanem DC-STAMP entspricht.

Anwendung

Der Anti-DC-STAMP-Antikörper, Klon 1A2, ist ein Antikörper gegen DC-STAMP zur Verwendung in Western Blot, der Durchflusszytometrie, Immunzytochemie und Immunpräzipitation.

Forschungskategorie
Entzündung und Immunologie

Forschungsunterkategorie
Osteobiologie

Western-Blot-Analyse: 4,0 µg/ml aus einer repräsentativen Charge wies DC-STAMP in 10 µg Thymuslysaten von Wildtyp-Mäusen nach, jedoch nicht von Dcstamp-Knockout-Mäusen nach.
Western-Blot-Analyse: 1,0 µg/ml aus einer repräsentativen Charge wies DC-STAMP in Thymus- und Milzlysaten von Wildtyp-Mäusen nach, während DC-STAMP in Thymus- und Milzlysaten von Dcstamp-Knockout-Mäusen stark reduziert war (mit freundlicher Genehmigung von Grace Chiu, Ph.D., University of Rochester Medical Center, NY, USA).
Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies ~106 kDa dimere und ~53 kDa monomere DC-STAMP-Bande durch Western Blot im nicht denaturierten bzw. denaturierten Zustand nach DC-STAMP-Immunpräzipitation unter Verwendung von RAW 264.7-Makrophagenlysat von Mäusen nach (Mensah, K.A., et al. (2010). J. Cell. Physiol. 223(1):76-83).
Durchflusszytometrie-Analyse: In einer repräsentativen Charge wurden DC-STAMP-positive Lymphozyten und Monozyten in aufgereinigten humanen PBMCs nachgewiesen (Chiu, Y.H., et al. (2012). J. Bone Miner. Res. 27(1):79-92).
Durchflusszytometrie-Analyse: In einer repräsentativen Charge wurde die Oberflächenexpression von DC-STAMP auf RAW 264.7-Makrophagen und CD11b+-Monozyten aus dem Knochenmark der Maus nachgewiesen. DC-STAMP wird auf Osteoklasten-Vorläuferzellen (OCP) als Dimer exprimiert, das mit dem Klon 1A2 effizient durchflusszytometrisch nachgewiesen werden kann (Mensah, K.A., et al. (2010). J. Cell. Physiol. 223(1):76-83).
Funktionsanalysis: Eine repräsentative Charge hemmte die durch RANKL- und M-CSF-Behandlung induzierte Bildung von Osteoklasten (OC) in humanen PBMCs und Monozytenkulturen (Chiu, Y.H., et al. (2012)). J. Bone Miner. Res. 27(1):79-92).
Funktionsanalysis: Eine repräsentative Charge hemmte die durch RANKL-Behandlung induzierte Bildung von Osteoklasten (OC) in RAW 264,7 und Makrophagenkulturen aus Knochenmark von Mäusen (Mensah, K.A., et al. (2010). J. Cell. Physiol. 223(1):76-83).
Immunhistochemische Analyse: In einer repräsentativen Charge wurde die DC-STAMP-Expression in mehrkernigen ‘osteoklastenähnlichen’ Riesenzellen in einem humanen Riesenzelltumor des Knochens nachgewiesen (Chiu, Y.H., et al. (2012). J. Bone Miner. Res. 27(1):79-92).
Immunzytochemische Analyse: In einer repräsentativen Charge wurden DC-STAMP-positive humane PBMCs unter Verwendung eines 10%igen, in NBF fixierten, in Paraffin eingebetteten Zellpräparats nachgewiesen (Chiu, Y.H., et al. (2012). J. Bone Miner. Res. 27(1):79-92).
Immunzytochemische Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden unterschiedliche intrazelluläre DC-STAMP-Lokalisierungen mittels fluoreszierender immunzytochemischer Färbung von 4 % paraformaldehydfixierten, 0,1 % Saponin-permeabilisierten Knochenmarkmakrophagen von Mäusen zu verschiedenen Zeitpunkten während der Osteoklastogenese nach RANKL-Behandlung nachgewiesen (Mensah, K.A., et al. (2010). J. Cell. Physiol. 223(1):76-83).
Analyse mittels Immunpräzipitation: Mit einer repräsentativen Charge wurde DC-STAMP aus den Lysaten humaner Monozyten immunpräzipitiert (Chiu, Y.H., et al. (2012). J. Bone Miner. Res. 27(1):79-92).
Analyse mittels Immunpräzipitation: Mit einer repräsentativen Charge wurde DC-STAMP aus den Membranextrakten von RAW 264,7-Makrophagen von Mäusen immunpräzipitiert (Mensah, K.A., et al. (2010). J. Cell. Physiol. 223(1):76-83).

Qualität

Beurteilt mittels Western Blot in Thymuslysat von Mäusen.

Western-Blot-Analyse: 4,0 µg/ml dieses Antikörpers wiesen DC-STAMP in 10 µg Thymuslysat von Mäusen nach.

Zielbeschreibung

~58 kDa beobachtet. Das Zielband scheint aufgrund der Glykosylierung größer als die berechneten Molekulargewichte von 53,39 kDa (human) und 53,88 kDa (Maus) zu sein. In manchen Lysaten können uncharakterisierte Banden auftreten.

Physikalische Form

Aufgereinigter monoklonaler Maus-IgG2aκ-Antikörper in PBS ohne Konservierungsmittel.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.
Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Haftungsausschluss

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