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Merck

539125

Sigma-Aldrich

Protease-Assay-Kit

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
41116133
NACRES:
NA.84

Verwendung

sufficient for 200 tests

Qualitätsniveau

Hersteller/Markenname

Calbiochem®

Lagerbedingungen

OK to freeze
protect from light

assay range

sensitivity: 10 ng/mL

Aufnahme

sample type biological sample(s)

Nachweisverfahren

colorimetric

Versandbedingung

wet ice

Lagertemp.

−20°C

Allgemeine Beschreibung

Dieses Protease-Assay-Kit eignet sich für die quantitative Bestimmung der Proteaseaktivität in biologischen Proben. Dieses Kit wurde auf seine Eignung für die Detektion einer breiten Vielfalt von Proteasen getestet, einschließlich Serinproteasen (Trypsin, Chymotrypsin, Thrombin, Plasmin, Elastase, Subtilisin), Cysteinproteasen (Papain, Cathepsin B) und Säureproteasen (Thermolysin, Pepsin). Jedes Kit bietet eine ausreichende Anzahl von Reagenzien für 200 Assays. Bei empfehlungsgemäßer Verwendung ist dieses Kit ~100-fach empfindlicher als der Casein-Gel-Assay oder Casein A280-Assay. Bei einer Inkubationszeit von 24 h kann das Protease-Assay-Kit ~10 ng/ml Protease detektieren. Die Sensitivität kann bis um ein 3-Faches verstärkt werden, wenn für die Detektion der proteolytischen Endprodukte ein Fluorimeter (Exzitation 490 nm und Emission 525 nm) anstatt ein Spektrofotometer verwendet wird.
Ein Kit für quantitative Array-Assays eines breiten Spektrums an Proteasen in biologischen Proben unter Verwendung von FTC-Casein als Substrat. Mit diesem Assay-Kit detektierte Enzymaktivitäten sind u. a.: Chymotrypsin, Elastase, Plasminogen, PRONASE®-Protease, Subtilisin, Thermolysin und Trypsin.

Komponenten

Ein Fluoreszenz-Caseinsubstrat, Inkubationspuffer, Assaypuffer Trypsinstandard und ein Benutzerprotokoll.

Warnhinweis

Toxizität: Mehrere Toxizitätswerte, siehe MSDS (O)

Spezifikationen

Testzeit: 3 Std.

Lagerung und Haltbarkeit

•; Bei -20 °;C gelagertes FTC-Casein für ein Jahr ab dem Kaufdatum haltbar. Bei 4 °;C gelagertes FTC-Casein ist 2 - 3 Tage haltbar. Bei wiederholten Einfrier-/Auftauzyklen wird die Hintergrundfluoreszenz leicht erhöht. Deshalb empfehlen wir, dieses Reagenz nach dem ersten Auftauen in 5 Aliquote aufzuteilen. FTC-Casein ist lichtempfindlich. und sollte vor Licht geschützt aufbewahrt werden.

•; Die Protease-positive Kontrolle sollte bei -20 °;C gelagert werden. Wie bei vielen Proteasen ist Trypsin anfällig für Autolyse, weshalb im Laufe der Zeit trotz korrekter Lagerung bei -20°;C eine Reduzierung der Trypsinaktivität bemerkbar werden kann.

•; Inkubationspuffer und Assaypuffer können bei 4 °;C oder -20 °;C gelagert werden.

Sonstige Hinweise

Twining, S.S. 1984. Anal. Biochem.143, 30.
Wiesner, R., et al. 1982. Anal. Biochem.121, 290.

Rechtliche Hinweise

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PRONASE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Lagerklassenschlüssel

10 - Combustible liquids


Analysenzertifikate (COA)

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S S Twining
Analytical biochemistry, 143(1), 30-34 (1984-11-15)
A simple inexpensive sensitive protease assay was developed using soluble fluorescein isothiocyanate (FITC)-labeled casein. Casein was reacted with FITC to form the fluorescein thiocarbamoyl derivative. This substrate is cleaved by trypsin, chymotrypsin, elastase, subtilisin, and thermolysin in a linear time-dependent
A new assay for proteases using fluorescent labeling of proteins.
R Wiesner et al.
Analytical biochemistry, 121(2), 290-294 (1982-04-01)

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