Genexpression & Genstummschaltung
Die Modulation der Genexpression ist eine der wirkungsvollsten Methoden, die von Forschern eingesetzt wird, um die komplexen genetischen Netzwerke, die biologische Prozesse steuern, zu untersuchen. Insbesondere Experimente zur Genmodulation werden in großem Umfang eingesetzt, um Therapeutika zur Bekämpfung von Krankheiten wie Krebs, Entwicklungsstörungen und neurodegenerativen Erkrankungen zu identifizieren.
Es gibt zahlreiche Technologien zur wirksamen Regulierung der Genexpression in Zellen und Geweben. RNAi (RNA-Interferenz) ist ein natürlicher biologischer Mechanismus, bei dem siRNA-Duplexe (kurze interferierende RNA) eine starke, gezielte Hemmung der Genexpression bewirken. Sigma-Aldrich® Advanced Genomics ist führend in der Entwicklung kommerzieller RNAi-Produkte für Forscher.
Vor Kurzem wurde Forschern durch die Entwicklung der CRISPR-Inhibition (CRISPRi) und der CRISPR-Aktivierung (CRISPRa) ein leistungsstarkes neues Instrument an die Hand gegeben, das nahezu unbegrenzte Möglichkeiten der Genregulation bietet. Mit dem unvergleichlichen Portfolio an CRISPR-Produkten von Sigma-Aldrich® Advanced Genomics sind Forscher in der Lage, nahezu jedes Gen präzise und effizient einem Knockdown oder Knockout zu unterziehen, es zu aktivieren oder zu überexprimieren.
Zugehörige technische Artikel
- We offer advanced design and quality synthesis for predesigned siRNA and siRNA libraries using the Rosetta siRNA Design Algorithm to reduce off-target effects and increase RNAi performance. The algorithm utilizes Position-Specific Scoring Matrices (PSSM) and knowledge of the siRNA seed region to predict the most effective and specific siRNA sequences for a target gene of interest.
- One approach to the analysis of gene expression is to measure the concentration of mRNA of a gene. There are several challenges to such analyses, such as the differences in half life between different transcripts, the temporal patterns of transcription and the lack of correlation between mRNA and protein.
- A series of vectors to enable a successful implementation of your RNAi experiments.
- Enzyme Explorer Product Application Index for Superoxide Dismutase offered by us online. Superoxide Dismutase (SOD) catalyzes the reduction of superoxide anions to hydrogen peroxide.
- Huntington's disease (HD) is an autosomal dominant, late-onset neurodegenerative disorder characterized by a selective neuronal cell death in the cortex and striatum leading to cognitive dysfunction, motor impairment and behavioral changes.
- Alle anzeigen (78)
Zugehörige Protokolle
- Complete protocol for Lentiviral transduction of suspension cells. This protocol describes the use of MISSION TRC shRNA Lentiviral Particles for long term silencing and phenotypic observation of suspension cells.
- FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorting) provides a method for sorting a mixed population of cells into two or more groups, one cell at a time, based on the specific light scattering and fluorescence of each cell. This method provides fast, objective, and quantitative recording of fluorescent signals from individual cells.
- Method for purification, reverse transcription and quantitative PCR for MicroRNAs using Mysticq reagents
- Experimentally determine the appropriate antibiotic concentration for selecting stable cell lines. This titration protocol can determine the lowest concentration of puromycin needed to efficiently select transduced cells.
- Preparation of the Lentiviral Transduction Particles Using Packaging Plasmid Mix
- Alle anzeigen (27)
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Schema des mechanistischen Ablaufs von shRNA- und siRNA-vermittelter Genstummschaltung in Zellen.
RNAi - Genmodulation zur Erforschung genetischer Signalwege
Screens zur funktionellen Genomik sind ein wesentlicher Bestandteil der Frühforschung. Sie ermöglichen die Entschlüsselung der Mechanismen, die biologischen Systemen, Synthesewegen und Krankheiten zugrunde liegen. Eine effektive Untersuchung dieser komplexen molekularen Interaktionsnetzwerke kann mit Hilfe von shRNA-Bibliotheken erreicht werden, die einen zuverlässigen, effizienten und langfristigen Knockdown ermöglichen.
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics ist exklusiver Anbieter der TRC1.5- und TRC2-Kollektionen des RNAi-Konsortiums (TRC). Diese Lentivirus-basierten shRNA-Bibliotheken bieten eine unvergleichliche Abdeckung und sind in verschiedenen Formaten erhältlich, darunter das Gesamtgenom, einzelne RNAi-Klone/Vektoren und Genfamilien-Sets.
CRISPRi und CRISPRa - Leistungsstarke Genhemmung und -aktivierung
CRISPRi (CRISPR-Interferenz) und CRISPRa (CRISPR-Aktivierung) sorgen für eine hocheffiziente Stummschaltung bzw. Aktivierung von Genen, ohne die zugrundeliegende DNA-Sequenz zu verändern. Beim Einsatz in groß angelegten LOF- (Funktionsverlust) und GOF- (Funktionszugewinn) Screens können Forscher einzigartige, aber funktionell verwandte Gen-Synthesewege identifizieren, die bei anderen Methoden oft übersehen werden.
Schematische Darstellungen von CRISPRa mit dem Synergystic Activation Mediator-Complex (SAM) und CRISPRi unter Einsatz der KRAB-Domäne.
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics bietet eine vollständige Reihe optimierter CRISPRi und CRISPRa Bibliotheken für Gen-Knockdown und Überexpressionsversuche. CRISPRi-Pool-Bibliotheken und lentivirale SAM-CRISPRa-Bibliotheken sind standardisiert oder maßgeschneidert auf Ihre speziellen Anforderungen erhältlich.
Sie fragen sich, ob CRISPR das Richtige für Ihr Projekt ist? Setzen Sie sich mit einem Experten für Sigma-Aldrich® Advanced Genomics in Verbindung.
Weitere Informationsquellen
Cas9-GFP-Fusionsproteine
RNAi-Broschüre
TRC-Vektorkarten
FAQs zu shRNA
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