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MAB1501R

Sigma-Aldrich

Anticorpo anti-actina, clone C4

clone C4, Chemicon®, from mouse

Sinonimo/i:

actin, alpha 1, skeletal muscle, alpha skeletal muscle actin, MAB1501, MAB1501X, smooth muscle actin, SMA

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About This Item

Codice UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

Origine biologica

mouse

Livello qualitativo

Forma dell’anticorpo

purified antibody

Tipo di anticorpo

primary antibodies

Clone

C4, monoclonal

Purificato mediante

using protein G

Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia)

all

Produttore/marchio commerciale

Chemicon®

tecniche

ELISA: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable
western blot: suitable

Isotipo

IgG2bκ

N° accesso NCBI

N° accesso UniProt

Condizioni di spedizione

wet ice

modifica post-traduzionali bersaglio

unmodified

Informazioni sul gene

human ... ACTA1(58)

Descrizione generale

Le actine sono proteine eucariotiche ubiquitarie che rappresentano un elemento costitutivo di base e multifunzionale dei microfilamenti del citoscheletro. Svolgono un ruolo fondamentale in un′ampia gamma di processi cellulari, inclusa la divisione cellulare, la migrazione cellulare, il rimodellamento della cromatina, la regolazione della trascrizione e il traffico vescicolare. Queste funzioni sono legate alla loro capacità di formare filamenti in grado di assemblarsi e disassemblarsi rapidamente in base alle necessità della cellula. Nei mammiferi sono stati descritti almeno sei tipi differenti di actina. Le actine mostrano un′omologia complessiva della sequenza del 90% circa ma le isoforme non mostrano modelli di espressione spaziali, temporali e tessuto-specifici e l′omologia riscontrata nei loro residui 18 N-terminali è pari solo al 50-60%. Le actine beta e gamma, note anche come actine citoplasmatiche, sono molto conservate negli animali superiori ed espresse prevalentemente nelle cellule non muscolari nelle quali controllano la struttura cellulare. Esocitosi e mobilità, Sono proteine quasi identiche e differiscono solo per quattro aminoacidi nella regione N-terminale. Le altre quattro isoforme dell′actina di solito si trovano in tipi specifici di tessuto muscolare adulto. Le actine alfa-cardiaca e alfa-scheletrica sono espresse nei muscoli striati rispettivamente cardiaco e scheletrico. Le actine alfa e gamma si trovano rispettivamente soprattutto nel muscolo liscio vascolare e nei muscoli lisci enterici È stato dimostrato che se legata al calcio, la beta-actina manifesta un comportamento più dinamico della gamma-actina, con tassi più elevati di polimerizzazione e depolimerizzazione. Inoltre, le actine beta e gamma possono copolimerizzare prontamente e i filamenti che ne derivano mostrano tassi di polimerizzazione e depolimerizzazione variabili in base al rapporto tra beta- e gamma-actina (Lessard, JL., et al. (1988). Cell Motility Cytoskeleton 10(3); 349-362.

Specificità

Ad oggi, tutte le specie animali e i tipi cellulari contenenti una forma di actina, inclusa l′actina vegetale, sono risultate reattive in immunofluorescenza indiretta o immunoblot.
MAB1501R è un anticorpo pan-actinico in quanto lega un epitopo posto in una regione fortemente conservata dell′actina ed è dunque in grado di riconosce tutte e sei le isoforme dell′actina dei vertebrati (Lessard, 1988). Reagisce sia con la forma globulare (G) che con quella filamentosa (F) dell′actina e non interferisce con la polimerizzazione dell′actina a formare filamenti se si ricorre a un rapporto anticorpo : monomero di actina di 1:2. Tuttavia, l′anticorpo incrementa l′entità della polimerizzazione se usato con un rapporto anticorpo:actina inferiore. Oltre a marcare i miotubi, l′anti-actina colora i mioblasti e i fibroblasti. Anche se viene preparato come anticorpo anti-actina di muscolo di ventriglio di pollo, il clone C4 reagisce con le actine di tutti i vertebrati, oltre che con le actine di Dictyostelium discoideum e Physarum polycephalum (Lessard, 1988).

Applicazioni

Immunocitochimica:
È stata utilizzata una diluizione di 10 μg/mL da un lotto usato in precedenza (cellule 3T3 di topo fissate con metanolo).

Immunoistochimica:
Una diluizione 10μg/mL da un lotto usato in precedenza è stata utilizzata su sezioni incluse in paraffina trattate con cacodilato di sodio, formaldeide al 4%, glutaraldeide al 3%{vedi Luciano, L et al. 2003}.

ELISA:
Un lotto usato in precedenza ha reagito fortemente con l′actina citoplasmatica e ha legato significativamente l′actina di ventriglio, scheletrica, arteriosa e cardiaca. Mostra inoltre un legame significativo in Dictyostelium discoidum e Physarum polycephalum.

Western blot:
1-20 µg/mL. Su omogenati di muscolo sottoposti a SDS-PAGE, reagisce in modo relativamente uniforme con una proteina da 43 kDa presente nel tessuto scheletrico, cardiaco, di ventriglio e aortico. Reagisce con tutte le isoforme di actina individuate in tali preparati e mostra una forte reazione con l′alfa-actina presente nel muscolo scheletrico, cardiaco e arterioso (Otey, 1987).

Immunoistochimica:
10µg/mL per sezioni incluse in paraffina trattate con cacodilato di sodio, formaldeide al 4%, glutaraldeide al 3% {Luciano, L et al. 2003}.

Le diluizioni di lavoro ottimali devono essere determinate dall′utente finale.
Questo anticorpo anti-actina, clone C4, è validato per l'uso in ELISA, IC, IH, IH(P) e WB per il rilevamento dell'actina ed è stato citato oltre 70 volte nelle pubblicazioni.

Qualità

Testato regolarmente in analisi di Western blot su lisati di cellule HeLa.

Analisi mediante Western blot:
la diluizione 1:1000 di questo lotto ha rilevato l′actina in 10 μg di lisato di cellule HeLa.

Descrizione del bersaglio

43 kDa

Stato fisico

Proteina G purificata in tris-glicina 0,1 M (pH 7,4) NaCl 150 mM con NaN3 0,05%.

Note legali

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Raccomandato

N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo

Codice della classe di stoccaggio

12 - Non Combustible Liquids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 1

Punto d’infiammabilità (°F)

Not applicable

Punto d’infiammabilità (°C)

Not applicable


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