06-863

Anticorpo anti-CREB

Upstate^®, from rabbit

• Sinonimo/i: Cyclic AMP-responsive element-binding protein 1, cAMP-responsive element-binding protein 1, CREB-1
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: rabbit
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: purified immunoglobulin
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: polyclonal
• Purificato mediante: using Protein A
• Reattività contro le specie: mouse, human, rat
• Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia): porcine (based on 100% sequence homology), horse (based on 100% sequence homology), canine (based on 100% sequence homology)
• Produttore/marchio commerciale: Upstate^®
• tecniche: ChIP: suitable (ChIP-seq); electrophoretic mobility shift assay: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG
• N° accesso NCBI: NP_604391
• N° accesso UniProt: P16220
• Condizioni di spedizione: dry ice
• modifica post-traduzionali bersaglio: unmodified
• Informazioni sul gene: human ... CREB1(1385)

Descrizione

Descrizione generale

La proteina 1 legante l′elemento di risposta all′AMP ciclico (UniProt P16220; detta anche proteina 1 legante l′elemento di risposta al cAMP, CREB-1) nell′uomo è codificata dal gene CREB1 (Gene ID 1385). CREB è un fattore di trascrizione che si lega all′elemento di risposta al cAMP (CRE) e regola la trascrizione dei geni a valle. CREB esplica la sua azione regolando tramite fosforilazione varie chinasi, quali la PKA e le protein-chinasi Ca2+/calmodulina-dipendenti. I geni noti per essere regolati da CREB sono c-fos, BDNF, tirosina idrossilasi, neuropeptidi (come somatostatina, encefalina, VGF e ormone di rilascio della corticotropina) e i geni dell′orologio circadiano PER1 e PER2. CREB è cruciale per la formazione della memoria in molte specie diverse.

Specificità

Questo anticorpo riconosce la proteina CREB.

Immunogeno

Epitopo: amminoacidi 5-24.

Peptide sintetico coniugato con KLH (CSGAENQ QSGDAAVTEAENQQ) corrispondente agli a.a. 5-24 della proteina CREB umana. La sequenza immunizzante è identica a quella suina, condivide 19 dei 20 residui con quella murina e bovina e 18 dei 20 residui con quella di ratto.

Applicazioni

Analisi di immunoprecipitazione: 10 µg di un lotto rappresentativo hanno indotto l′immunoprecipitazione di CREB in 500 µg di estratto nucleare di cellule HeLa.
Analisi di immunoprecipitazione della cromatina (ChIP): un lotto rappresentativo ha permesso di rilevare una maggiore occupazione del promotore di LYPD3 da parte di CREB in cellule TE-4 di cancro dell′esofago umano con deficit di LKB1 (Gu, Y., et al. (2012). Oncogene. 31(4):469–479).
Analisi di immunoprecipitazione della cromatina (ChIP): con un lotto rappresentativo è stata rilevata l′associazione di CREB ai siti del gene RNASET2, che sono il bersaglio della proteina Tax codificata dal virus linfotropico di tipo 1 dei linfociti T (HTLV-1), utilizzando le linee di linfociti T infettati da HTLV-1 MT-2, C8166/45 e SLB-1 (Polakowski, N., et al. (2011). Viruses. 3(8):1485-500).
Analisi di immunoprecipitazione della cromatina (ChIP): un lotto rappresentativo ha permesso di rilevare l′occupazione del promotore IV del gene hBDNF da parte di CREB in preparazioni cromatiniche ottenute da tessuto corticale parietale umano post mortem (Gu, Y., et al. (2011). J. Neurosci. 31(9):3295-3308).
Analisi di immunoprecipitazione della cromatina (ChIP): un lotto rappresentativo ha permesso di rilevare l′occupazione del promotore di miR-9-2 da parte di CREB in cellule di neuroblastoma umano SK-N-BE (Laneve, P., et al. (2010). Nucl. Acids Res. 38(20):6895-6905).
Analisi di ChIP-seq: mediante analisi di ChIP-seq, un lotto rappresentativo ha permesso di identificare i geni target di CREB in cellule GC1-spg derivate da spermatogoni murini (Martianov, I., et al. (2010). BMC Genomics. 11:530).
Saggio di Western blotting: lotti rappresentativi hanno permesso di rilevare CREB in lisati di neuroni striatali in coltura derivati da embrioni di ratto e in cellule di feocromococitoma PC-12 (Hutchinson, A.N., et al. (2012). Neuropsychopharmacology. 37(2):321-337; Maharjan, S., et al. (2010). J. Neurochem. 112(1):42-55).
Saggio di Western blotting: lotti rappresentativi hanno permesso di rilevare CREB in un lisato di cellule PC-1 (dal caput prossimale dell′epididimo) e in omogenati di tessuto ippocampale (Hamzeh, M., and Robaire, B. (2011). J. Endocrinol. 209(1):55-64; Zhou, Z., et al. (2009). Neuropharmacology. 56(1):81-89).
Saggio di Western blotting: un lotto rappresentativo ha permesso di rilevare la presenza di CREB nel lisato di cellule di neuroblastoma umano SK-N-BE (Laneve, P., et al. (2010). Nucl. Acids Res. 38(20):6895-6905).
Saggio di rallentamento della mobilità elettroforetica (EMSA): l′aggiunta di un lotto rappresentativo ha causato un netto rallentamento del complesso DNA-CREB nel saggio EMSA utilizzando la sequenza legante CREB nel promotore I del gene hBDNF, contenente oligonucleotidi radiomarcati, e lisati ottenuti da neuroni primari di ratto trattati con KCl (Pruunsild, P., et al. (2011). J. Neurosci. 31(9):3295-3308).

Categoria di ricerca
Epigenetica & funzione nucleare

L′anti-CREB, N° Cat. 06-863, è un anticorpo policlonale di coniglio altamente specifico mirato contro CREB che è stato testato nei saggi di immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) e ChIP-seq, di rallentamento della mobilità elettroforetica (EMSA), di immunoprecipitazione e di Western Blotting.

Sottocategoria di ricerca
Fattori di trascrizione

Qualità

Valutata mediante Western blotting su estratto nucleare di cellule HeLa.

Saggio di Western blotting: questo anticorpo alla concentrazione di 0,5 µg/mL ha permesso di rivelare CREB in 10 µg di estratto nucleare di cellule HeLa.

Descrizione del bersaglio

Visualizzato a ~43 kDa.

Linkage

Sostituisce: 04-218

Stato fisico

Anticorpo policlonale di coniglio purificato, in tampone contenente Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con azoturo di sodio 0,05% e glicerolo 30%.

Purificato con proteina A

Stoccaggio e stabilità

Stabile per 1 anno dalla data di ricezione a -20 °C.
Raccomandazioni per la manipolazione: una volta ricevuto il prodotto, prima di rimuovere il tappo, centrifugare il contenitore e mescolare delicatamente la soluzione. Suddividere in aliquote in provette per microcentrifuga e conservare a -20°C. Evitare ripetuti cicli di congelamento e scongelamento che potrebbero danneggiare le IgG e compromettere le prestazioni del prodotto.
Nota: se la temperatura del congelatore scende al di sotto di -20°C, le soluzioni contenenti glicerolo possono congelare durante il periodo di conservazione.

Risultati analitici

Controllo
controllo antigenico positivo: N.Cat. 12-309, estratto nucleare di cellule HeLa. A 510 μL di lisato aggiungere un egual volume di tampone riducente Laemmli e fare bollire per 5 minuti per ottenere un campione ridotto. Caricare 20 μg di lisato ridotto/pozzetto in un minigel.

Altre note

Concentrazione: per la concentrazione specifica del lotto, fare riferimento al Certificato di Analisi.

Note legali

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1