C5896

Choline oxydase from Alcaligenes sp.

lyophilized powder, ≥10 units/mg solid

• Synonyme(s) : Choline:oxygène 1-oxydoréductase
• Numéro CAS: 9028-67-5
• Numéro de classification (Commission des enzymes): 1.1.3.17 (BRENDA, IUBMB)
• Numéro CE : 232-840-0
• Numéro MDL: MFCD00130787
• Code UNSPSC : 12352204
• Nomenclature NACRES : NA.54

Propriétés

• Forme: lyophilized powder
• Activité spécifique: ≥10 units/mg solid
• Poids mol.: ~95 kDa
• Technique(s): cell based assay: suitable
• Adéquation: suitable for assay of choline; suitable for molecular biology
• Température de stockage: −20°C

Description

Application

La choline oxydase issue de Alcaligenes sp. a été utilisée :

• dans une étude évaluant un biocapteur de choline formé avec des membranes chitineuses, ainsi que ses applications pour mesurer les activités inhibitrices de cholinestérase.
• dans des études spectroscopiques portant sur la photoréaction de la choline oxydase avec la flavine liée de façon covalente.
• dans une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) pour mesurer l'activité choline acétyltransférase (ChAT) d'homogénats de tissu cérébral.
• pour mesurer la choline produite par l'autotaxine (ATX) à l'aide d'un test d'activité de l'ATX et par la phospholipase-D (PLD) à l'aide d'un test d'activité de la PLD.

Actions biochimiques/physiologiques

La choline oxydase catalyse l′oxydation à quatre électrons de la choline en glycine-bétaïne, en utilisant la bétaïne aldéhyde comme intermédiaire et l′oxygène moléculaire comme accepteur d′électron primaire. Cette enzyme est également capable d′utiliser la bétaïne aldéhyde comme substrat. Ceci permet d′étudier la conversion de choline en son intermédiaire aldéhyde, et de la bétaïne aldéhyde en glycine-bétaïne. Cette enzyme est une flavoprotéine de poids moléculaire d′environ 72 kDa (chromatographie d′exclusion stérique) ou 66 kDa (électrophorèse sur gel en présence de SDS).

Propriétés physiques

Point isoélectrique :4,1 ± 0,1
Constante de Michaelis :2,84 x 10¯³M (choline), 5,33 x 10¯³M (bétaïne aldéhyde)
Structure :Une mole de FAD est liée de façon covalente à une mole d′enzyme
Inhibiteurs :p-Chloromercuribenzoate, Cu⁺⁺, Co⁺⁺, Hg⁺⁺, Ag⁺
pH optimal :8,0 – 8,5
Temp. optimale :40 – 45 °C
Stabilité au pH :pH 7,0 – 9,0 (30 °C, 2 h)
Stabilité thermique :En dessous de 37 °C (pH 7,5, 10 min)

Définition de l'unité

Une unité forme 1 μmole de H₂O₂ et oxyde 1 μmole de choline par minute à pH 8,0 et 37 °C pour donner de la bétaïne aldéhyde. Remarque : Lors de la conversion de choline en bétaïne par la choline oxydase, 2 μmoles de H₂O₂ sont produites pour chaque μmole de choline.

Informations sur la sécurité

• Pictogrammes: GHS08
• Mention d'avertissement: Danger
• Mentions de danger: H334
• Conseils de prudence: P261 - P284 - P501
• Classification des risques: Resp. Sens. 1
• Code de la classe de stockage: 11 - Combustible Solids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 3
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable
• Équipement de protection individuelle: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)