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CELLDETH-RO

Roche

Test ELISAPLUS de détection de mort cellulaire

sufficient for 96 multiwell tests (11774425001), sufficient for 10 x 96 multiwell tests (11920685001)

Synonyme(s) :

ELISA

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About This Item

Code UNSPSC :
41116158

Utilisation

sufficient for 10 x 96 multiwell tests (11920685001)
 sufficient for 96 multiwell tests (11774425001)

Niveau de qualité

100

Fabricant/nom de marque

Roche

Technique(s)

ELISA: suitable

Méthode de détection

photometric

Température de stockage

2-8°C

Description générale

Utilisez ce kit pour la quantification relative des fragments d′ADN complexés à des histones (mono et oligonucléosomes) en-dehors du cytoplasme des cellules après induction d′une apoptose ou lors de la libération par les cellules nécrotiques. Comme l′essai ne nécessite pas de prémarquage cellulaire, il permet de détecter la dégradation internucléosomale de l′ADN génomique durant l′apoptose, même dans les cellules qui ne prolifèrent pas in vitro, par exemple les cellules tumorales fraîchement isolées. Les anticorps de cet essai ne sont pas spécifiques à une espèce particulière, le kit peut donc être utilisé pour analyser les cellules d′un large éventail d′espèces.

Spécificité

L′anticorps anti-histone réagit avec les histones H1, H2A, H2B, H3 et H4 de diverses espèces (par exemple d′homme, de souris, de rat, de hamster, de vache, d′opossum ou de Xenopus). L′anticorps anti-ADN se fixe à l′ADN simple brin et double brin. Le test ELISA permet donc de détecter les mono et les oligonucléosomes de diverses espèces, et peut servir à mesurer la mort cellulaire apoptotique dans de nombreux systèmes cellulaires différents.

Application

Produit réservé aux activités de recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Le test immuno‑enzymatique photométrique ELISAPLUS de détection de mort cellulaire est utilisé pour la détermination quantitative in vitro des fragments d′ADN associés à des histones cytoplasmiques (mono et oligonucléosomes) après une mort cellulaire induite.
Le kit contient une solution d'arrêt qui permet aux utilisateurs d′arrêter la réaction sur le substrat et de dérouler l′essai dans des conditions définies, ce qui le rend compatible avec les applications à haut débit.

Caractéristiques et avantages

  • ELISA en une étape
  • Grande sensibilité (5 x 102 cellules/ml)
  • Rapidité (3 - 4 heures)
  • Contrôle positif inclus
  • Aucun prémarquage cellulaire requis
  • Système d′analyse non radioactif
  • Fonctionne avec toutes les espèces
  • Manipulation aisée
  • Faible bruit de fond
  • Suppression du facteur humain anti‑souris
  • A fait l′objet d′un contrôle fonctionnel

Conditionnement

1 kit constitué de 10 éléments
  • 11774425001 (1 kit constitué de 10 éléments)
  • 11920685001 (1 kit constitué de 10 éléments)

Caractéristiques

Durée de l'essai : 3 - 4 heures
Contrôle négatif : En fonction des conditions de culture cellulaire, chaque culture de cellules permanentes à croissance exponentielle contient un certain nombre de cellules mortes (généralement entre 3 et 8 %). Dans l′immuno-essai, ces cellules mortes inhérentes présentes dans l′échantillon non traité (sans agent induisant la mort cellulaire) entraînent une certaine absorbance (contrôle négatif).
Contrôle positif : Un complexe ADN-histone sert de contrôle positif.
Échantillon : Fractions cytoplasmiques (lysats) de lignées cellulaires, cellules ex vivo, surnageants de culture cellulaire, et sérum ou plasma.

Définition de l'unité

Conversion d′unité : 1 mU = 1 x 10-3 OD (1 mU = 0,001 OD).

Notes préparatoires

Solution de travail : Préparation des solutions de travail

Outre les solutions prêtes à l′emploi fournies avec le kit, vous aurez besoin de préparer les solutions de travail suivantes :
Remarque : Utilisez uniquement de l′eau doublement distillée pour la reconstitution des lyophilisats.

Anticorps anti-histone-biotine
μReconstituer le lyophilisat dans 450 μl d′eau doublement distillée pendant 10 minutes puis bien homogénéiser.
Utilisation : Constituant de l′immunoréactif.
Anticorps anti-ADN peroxydase
μReconstituer le lyophilisat dans 450 μl d′eau doublement distillée pendant 10 minutes puis bien homogénéiser.
Utilisation : Constituant de l′immunoréactif.
Contrôle positif
μReconstituer le lyophilisat dans 450 μl d′eau doublement distillée pendant 10 minutes puis bien homogénéiser.
Utilisation : ELISA, étape 1.
Pastilles d′ABTS
En fonction du nombre d'échantillons analysés, dissoudre 1, 2 ou 3 pastilles du flacon 7 dans 5, 10 ou 15 ml de tampon de substrat.
Utilisation : ELISA, étape 5.
Solution d'arrêt à l′ABTS
En cas de turbidité ou de précipité, chauffer à 37 °C sous agitation jusqu′à ce que la solution devienne limpide.
Utilisation : ELISA, étape 6.
Conditions de stockage (solution de travail) : Anticorps anti-histone-biotine : 2 à 8 °C pendant 2 mois
Pastilles d′ABTS : 1 mois à l′abri de la lumière. Laisser venir entre 15 et 25 °C avant utilisation.
Solution d'arrêt à l′ABTS : Entre 2 et 8 °C jusqu′à la date de péremption indiquée sur l′étiquette.
La limite de détection exacte des cellules mortes/mourantes dans un échantillon donné dépend fortement de la cinétique de la mort cellulaire, de l′agent cytotoxique employé et de la quantité de cellules affectées au sein de la population cellulaire totale. Du fait de l′utilisation de U937/camptothécine (CAM) comme système cellulaire modèle pour la mort cellulaire, l′immuno-essai permet de détecter spécifiquement les mono et les oligonucléosomes présents dans la fraction cytoplasmique de 125 équivalents cellulaires/puits.

Autres remarques

Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.

Composants de kit seuls

Réf. du produit
Description
  • Anti-histone-biotin antibody (clone H11-4)
  • Anti-DNA-POD antibody (clone MCA-33)
  • Positive Control
  • Incubation Buffer
  • Lysis Buffer
  • Substrate Buffer
  • ABTS Substrate Tablet
  • ABTS Stop Solution
  • Microplate (streptavidin-coated)
  • Adhesive Cover Foils
Afficher tout (10)

Mention d'avertissement

WarningDanger

Classification des risques

Aquatic Chronic 2 - Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Eye Irrit. 2 - Skin Sens. 1

Code de la classe de stockage

8B - Non-combustible, corrosive hazardous materials

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 3

Point d'éclair (°C)

does not flash

Certificats d'analyse (COA)

Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".

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