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AB3848-I

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-phospho-Smad1/Smad5/Smad8 (Ser463/465)

from rabbit, purified by affinity chromatography

Synonyme(s) :

Mothers against decapentaplegic homolog 1, BSP-1, hSMAD1, JV4-1, MAD homolog 1, Mothers against DPP homolog 1, Mad-related protein 1, SMAD 1, SMAD family member 1, Smad1, Transforming growth factor-beta-signaling protein 1

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702

Source biologique

rabbit

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

affinity isolated antibody

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

polyclonal

Produit purifié par

affinity chromatography

Espèces réactives

human, rat, mouse

Réactivité de l'espèce (prédite par homologie)

Xenopus (based on 100% sequence homology), mink (based on 100% sequence homology)

Technique(s)

immunohistochemistry: suitable (paraffin)
western blot: suitable

Numéro d'accès NCBI

Numéro d'accès UniProt

Conditions d'expédition

ambient

Modification post-traductionnelle de la cible

phosphorylation (pSer463/pSer465)

Informations sur le gène

human ... SMAD1(4086)

Description générale

La protéine ''mères contre l'homologue décapentaplégique 1'' (''Mothers against decapentaplegic homolog 1'', UniProt Q15797 ; aussi appelée BSP-1, hSMAD1, JV4-1, homologue MAD 1, mères contre l'homologue DPP 1, protéine liée à Mad 1, SMAD 1, membre 1 de la famille SMAD, Smad1, protéine de signalisation 1 pour la transformation du facteur de croissance bêta) est codée par le gène SMAD1 (aussi dénommé BSP1, MADH1 et MADR1 ; ID du gène : 4086) chez l'homme. Chez les mammifères, les SMAD constituent une famille de facteurs de transcription et se subdivisent en trois groupes. SMAD1, 2, 3, 5 et 9 (alias SMAD8) sont des SMAD régulées par des récepteurs ou R-SMAD. SMAD4 est le seul médiateur commun, ou Co-SMAD, connu chez les mammifères et il intervient dans les voies de signalisation à la fois du TGF et du BMP. SMAD6 et SMAD7 sont des SMAD inhibiteurs, ou I-SMAD, qui bloquent l'activation des R-SMAD par Co-SMAD en se liant de manière compétitive. Les SMAD partagent une structure similaire comprenant les domaines N-terminal Mad-homology 1 (MH1 ; a.a. 12-136 de hSMAD1, a.a. 13-137 de hSMAD2 ou a.a. 16-140 de hSMAD8) et C-terminal MH2 (a.a. 271-465 de hSMAD1 et hSMAD2 ou a.a. 273-467 de hSMAD8), reliés par une région de liaison non conservée parmi les SMAD. Le domaine MH1 des R-SMAD et Co-SMAD contient un signal de localisation nucléaire (NLS) N-terminal, tandis que SMAD4 porte des signaux d'exportation nucléaire (NES) dans ce domaine. Le domaine MH2 est responsable de la transactivation des gènes ainsi que de la médiation des interactions SMAD-récepteur, SMAD-SMAD, SMAD-coactivateurs et SMAD-corépresseurs. Un ligand TGF (TGF pour SMAD2/3 et BMP pour SMAD1/5/8) initie la signalisation en liant et en engageant les récepteurs de type I et de type II aux sérine/thréonines kinases en surface de la cellule. Cela permet la phosphorylation T RII-dépendante du domaine T RI de la kinase, qui déclenche ensuite la signalisation en phosphorylant les deux derniers résidus de sérine du motif C-terminal conservé Ser-Ser-X-Ser (SSXS) des protéines SMAD.

Spécificité

Cet anticorps polyclonal de lapin reconnaît les protéines SMAD1/5/8 phosphorylées sur les deux derniers résidus de sérine leur motif Ser-Ser-X-Ser (SSXS) à l'extrémité C-terminale. Des résidus de sérine cibles sont présents dans la SMAD1 humaine et de souris (S463/S465), la SMAD1 de rat (S466/S468), la SMAD5 humaine, de souris et de rat (S463/S465), la SMAD9 humaine (S465/S467), la SMAD9 de souris (S428/S430) et la SMAD9 de rat (S432/S434), mais ils sont absents de l'isoforme d'épissage 2 de la SMAD1 humaine. SMAD9 est aussi appelée SMAD8. La détection des bandes cibles a été bloquée par le phosphopeptide immunogène, mais pas par le peptide non-phosphorylé correspondant.

Immunogène

Peptide linéaire conjugué à la KLH et correspondant à la fin de la séquence C-terminale de la protéine SMAD1 humaine, phosphorylée sur les deux derniers résidus de sérine (S463/S465).
Épitope : extrémité C-terminale

Application

Analyse par immunohistochimie : une dilution au 1/50e d'un lot représentatif a permis de détecter la phosphorylation de Smad1/5/8 sur des coupes de tissus embryonnaires de rat et de souris.
Domaine de recherche
Épigénétique et fonction nucléaire
L'anticorps anti-phospho-Smad1/Smad5/Smad8 (Ser463/465), réf. AB3848-I, est un anticorps polyclonal de lapin hautement spécifique qui cible la forme phosphorylée de Smad1/5/8, et dont l'utilisation a été testée en immunohistochimie et en western blotting.

Qualité

Produit évalué par western blotting sur des lysats de cellules HEK293.

Analyse par western blotting : une dilution au 1/500e de cet anticorps a permis de détecter une augmentation de la phosphorylation de SMAD1/5/8 dans 10 µg de lysat de cellules HEK293 traitées au BMP2. La détection des bandes cibles a été bloquée par le phosphopeptide immunogène, mais pas par le peptide non-phosphorylé correspondant.

Description de la cible

Poids réel (observé) : env. 55 kDa. Dans certains lysats, on observe des bandes SMAD1 à 52,26, 52,16 et 52,71 kDa (homme, souris et rat, resp.), des bandes SMAD5 à 52,26, 52,17 et 52,22 kDa (homme, souris et rat, resp.) et des bandes non caractérisées à 52,49, 48,64 et 48,99 kDa.

Forme physique

Anticorps polyclonal de lapin purifié, dans un tampon contenant 0,1 M de Tris-glycine (pH 7,4), 150 mM de NaCl et 0,05 % d'azoture de sodium.
Produit purifié par affinité.

Stockage et stabilité

Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Autres remarques

Concentration : voir la fiche technique du lot concerné.

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

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