C0773
Collagenase aus Clostridium histolyticum
high purity, purified by chromatography, Type VII, ≥4 FALGPA units/mg solid, lyophilized powder, ≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
Synonym(e):
Clostridiopeptidase A
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About This Item
Empfohlene Produkte
Qualitätsniveau
Typ
Type VII
Form
lyophilized powder
Spezifische Aktivität
≥4 FALGPA units/mg solid
≥700 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
Mol-Gew.
68-130 kDa
Aufgereinigt durch
chromatography
Zusammensetzung
Protein, ≥85% biuret
Löslichkeit
TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C
Fremdaktivität
caseinase and clostripain ≤1 units/mg protein
Lagertemp.
−20°C
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Anwendung
Kollagenase wird bei der Präparation von Arteriengewebe zur Untersuchung von fortgeschrittenen Glycosylierungsendprodukten (AGE) verwendet. Das Enzym wird zusammen mit anderen Proteasen zur Disaggregation von menschlichem Tumorgewebe, Mäusenieren, menschlichem Hirngewebe, Lungenepithelgewebe und vielen anderen Geweben verwendet. Außerdem ist es in Leber- und Nierenperfusionsstudien, beim Pankreasverdau und bei der Isolierung von nicht-parenchymalen Leberzellen wirkungsvoll.
Biochem./physiol. Wirkung
Eine wirkungsvolle Abgabe von Zellen aus dem Gewebe erfordert die Wirkung sowohl von Kollagenase-Enzymen als auch der neutralen Protease. Collagenase wird durch vier Grammatom Calcium (Ca2+) pro Mol Enzym aktiviert. Es wird davon ausgegangen, dass das Kulturfiltrat mindestens 7 verschiedene Proteasen mit einem Molekulargewicht von 68 - 130 kDa enthält. Optimaler pH-Bereich 6,3 – 8,8. Das Enzym erkennt die Sequenz -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-, wobei X meistens eine neutrale Aminosäure repräsentiert.
Collagenase wird durch vier Grammatom Calcium pro Mol Enzym aktiviert. Sie wird durch Ethylenglycol-bis-(beta-aminoethylether)-N, N, N′,N′-tetraessigsäure, β-Mercaptoethanol, Glutathion, Thioglycolsäure und 8-Hydroxychinolin gehemmt.
Einheitendefinition
Eine Collagen-Aufschlusseinheit (Collagen Digestion Unit, CDU) setzt Peptide aus Rinder-Achillessehnencollagen entsprechend der Ninhydrin-Anfärbung von 1,0 μmol Leucin in 5 Stunden bei pH 7,4 und 37 °C in Gegenwart von Calciumionen frei. Eine FALGPA-Hydrolyseeinheit hydrolysiert 1,0 μmol Furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala pro Minute bei 25 °C. Eine neutrale Protease-Einheit hydrolysiert die Caseinmenge, die eine Färbung entsprechend 1,0 μmol Tyrosin pro 5 Stunden bei pH 7,5 und 37 °C produziert. Eine Clostripain-Einheit hydrolysiert 1,0 μmol BAEE pro Minute bei pH 7,6 und 25 °C in Gegenwart von DTT.
Physikalische Form
Lyophilisiertes Pulver, das Calciumchlorid enthält
Angaben zur Herstellung
Bitte beachten, dass sich das Material nicht vollständig auflöst und geringfügig Sedimente sichtbar sein können. Die Sedimente haben keinen Einfluss auf die Aktivität der Lösung.
Eine Stammlösung kann durch das Auflösen von 0,05 bis 0,1 mg/ml Kollagenase bei 37 °C in 50-mM-TES-Puffer mit 0,36 mM Calciumchlorid (TESCA) und einem pH-Wert von 7,4 hergestellt werden. Kalten Puffer verwenden.
Substrat
Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben
Signalwort
Danger
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Zielorgane
Respiratory system
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
Not applicable
Flammpunkt (°C)
Not applicable
Persönliche Schutzausrüstung
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
Analysenzertifikate (COA)
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