A7011

Alcohol-Dehydrogenase aus Saccharomyces cerevisiae

≥300 units/mg protein, lyophilized powder (contains buffer salts), M_w 141-151 kDa

• Synonym(e): ADH1, Adh1p, SCAD, YDAH-1, YIM-1, ADH, Alcohol-Dehydrogenase aus Hefe, Alkohol:NAD⁺ -Oxidoreduktase
• CAS-Nummer: 9031-72-5
• EC-Nummer: 1.1.1.1 (BRENDA, IUBMB)
• EG-Nummer: 232-870-4
• MDL-Nummer: MFCD00081305
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Saccharomyces cerevisiae
• Form: lyophilized powder (contains buffer salts)
• Spezifische Aktivität: ≥300 units/mg protein
• Mol-Gew.: M_w 141-151 kDa
• Aufgereinigt durch: crystallization
• Lagerbedingungen: (Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place.)
• Grünere Alternativprodukt-Eigenschaften: Waste Prevention; Design for Energy Efficiency; Learn more about the Principles of Green Chemistry.
• sustainability: Greener Alternative Product
• Farbe: white to light yellow-brown, Light brown
• Optimaler pH-Wert: 8.6-9.0
• Löslichkeit: H₂O: soluble 1.0 mg/mL, clear to slightly hazy, colorless to faintly yellow; soluble
• UniProt-Hinterlegungsnummer: A0A3G3NDH9; S5RCH3; S5RK20; S5S176
• Anwendung(en): diagnostic assay manufacturing
• Grünere Alternativprodukt-Kategorie: , Enabling
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Forschungsbereich: Neurowissenschaft

Hefealkoholdehydrogenase 1 (ADH1) gehört zur Familie der zinkhaltigen Alkoholdehydrogenasen. Sie ist ein Homotetramer, bei dem jede Untereinheit eine katalytische Domäne und eine coenzymbindende Domäne aufweist.

Anwendung

Alkoholdehydrogenase wurde zusammen mit der laktischen Dehydrogenase für die enzymatische Reduktion von Acetaldehyd mittels Natrium(R,S)-[2-³H]-Laktat verwendet. Sie wurde außerdem zur Untersuchung der hemmenden Wirkung von Zink-chelatisierten Silymarinflavonolignanen auf Hefealkoholdehydrogenase eingesetzt.

Die Ethanolkonzentration kann durch Überwachung der enzymatischen Reduktion von NAD mittels Alkoholdehydrogenase nach vorheriger Entfernung der Aldehydgruppe kolorimetrisch bestimmt werden.

Biochem./physiol. Wirkung

ADH (Alkoholdehydrogenase) ist eines der ersten Enzyme, die isoliert und aufgereinigt wurden. NAD⁺ ist sein Kofaktor. Es wurden drei Isozyme von Hefe-ADH, d. h. Hefe-Alkoholdehydrogenase 1, 2 und 3 (Yeast Alcohol Dehydrogenase, YADH) nachgewiesen. YADH-1 wird während anaerober Fermentation exprimiert, YADH-2 wird im Zytoplasma exprimiert und YADH-3 ist in den Mitochondrien lokalisiert. Ein 141kDa-Tetramer mit 4 gleichen Untereinheiten. Die aktive Stelle jeder Untereinheit enthält ein Zinkatom. Jede aktive Stelle enthält außerdem 2 reaktive Sulfhydrylgruppen und einen Histidinrest.

Isoelektrischer Punkt: 5,4–5,8

Optimaler pH-Wert: 8,6–9,0

Substrate: Hefe-ADH ist am aktivsten mit Ethanol. Ihre Aktivität nimmt mit wachsender oder abnehmender Größe des Alkohols ab. Verzweigtkettige Alkohole und sekundäre Alkohole weisen ebenfalls eine sehr niedrige Aktivität auf.

K_M (Ethanol) = 2,1 × 10^-2 M
K_M (Methanol = 1,3 × 10^-1 M
K_M (Isopropanol) = 1,4 × 10^-1 M

Inhibitoren: Verbindungen, die mit freien Sulfhydrylen reagieren, wie N-Alkylmaleimide und Iodacetamid.
Zink-Chelator-Inhibitoren
8-Hydroxychinolin, 2,2′-Dipyridyl und Thioharnstoff.
Substratanaloge Inhibitoren, wie β-NAD-Analoga, Purin- und Pyrimidinderivate, Chlorethanol und Fluorethanol.

Extinktionskoeffizient: E^{1 %} = 14,6 (Wasser, 280 nm)

Hefealkoholdehydrogenase 1 (YADH1) katalysiert die Umwandlung von Acetaldehyd zu Ethanol im Glucosefermentationsweg. Sie ist auch an der Produktion von Alkohol beim Aufschluss von Aminosäuren bei der Aminosäuregärung beteiligt.

Vorsicht

Enthält gebundene β-NAD und β-NADH und eignet sich nicht für das Recycling von β-NAD- und β-NADH-Mikroassays. Falls ADH für diesen Zweck benötigt wird, siehe Bestellnr. A3263.

Einheitendefinition

Eine Einheit konvertiert 1,0 μmol Ethanol pro Minute bei 25 °C und einem pH-Wert von 8,8 zu Acetaldehyd.

Physikalische Form

Feststoffe mit einem Gehalt von ≤ 2 % Natriumcitrat als Puffersalz

Angaben zur Herstellung

Löst sich in Wasser auf und bildet eine leicht trübe, farblose bis leicht gelbliche Lösung mit einer Konzentration von 1 mg/ml.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)