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Merck

LIBDL-RO

Roche

Liberase DL, Forschungsqualität

low Dispase concentration

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352200

Form

lyophilized

Verpackung

pkg of 100 mg (05466202001 [2 x 50 mg])
pkg of 10 mg (05401160001 [2 x 5 mg])

Hersteller/Markenname

Roche

Parameter

35-37 °C optimum reaction temp.

Optimaler pH-Wert

7.4

Versandbedingung

dry ice

Lagertemp.

−20°C

Allgemeine Beschreibung

Liberase DH in Forschungsqualität enthält hochreine Kollagenase I und Kollagenase II. Diese beiden Kollagenase-Isoformen werden in einem genauen Verhältnis zueinander und mit einer hohen Konzentration an Dispase®, einer nicht clostridialen, neutralen Protease, abgestimmt. Liberase DL (Dispase Low) in Forschungsqualität wird für die Auftrennung vieler Gewebetypen in Anwendungen eingesetzt, in denen die hohe Reinheit der Enzymmischung für eine hohe Ausbeute und Lebensfähigkeit der Zellen notwendig ist. Bakterielle Nebenprodukte wie Endotoxine werden um mehrere Tausendstel reduziert.

Anwendung

Liberase® DL (Dispase Low) in Forschungsqualität wurde zur Isolierung von Hautstammzellen von Mäusen verwendet. Es wird auch für die Auftrennung vieler Gewebetypen in Anwendungen eingesetzt, in denen die hohe Reinheit der Enzymmischung für eine hohe Ausbeute und Lebensfähigkeit der Zellen notwendig ist. Bakterielle Nebenprodukte wie Endotoxine werden um mehrere Tausendstel reduziert.

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Maximieren Sie die Ausbeute und Lebensfähigkeit der isolierten Zellen mit einer Enzymmischung, die weniger Clostripain- und Trypsinaktivität aufweist und weniger Endotoxine enthält.
  • Höhere spezifische Aktivität der Enzymmischung als Ergebnis der höheren Reinheit der Kollagenase I + II (durch HPLC-Analyse bestimmt).
  • Erhöhte experimentelle Reproduzierbarkeit durch größere Übereinstimmung zwischen den Chargen.

Angaben zur Herstellung

Stabilisatoren: Calcium
-Arbeitskonzentration für Liberase-Enzyme in Forschungsqualität:

Liberase-Enzyme verfügen über eine signifikant höhere spezifische Aktivität als herkömmliche Kollagenasen. Das bedeutet, dass die Arbeitskonzentration der aufgereinigten Liberase-Enzyme, in mg/mL angegeben, geringer ist als die von herkömmlicher Kollagenase.

Wenn die Anwendung auf der Liste der Anwendungen von Roche unter www.Kollagenase.com enthalten ist, verwenden Sie die für diese Anwendung empfohlene Konzentration von Liberase-Enzymen in Forschungsqualität.

Wenn die Anwendung nicht in der Liste aufgeführt ist, verwenden Sie Liberase TM in Forschungsqualität zunächst in einer Konzentration von 0,08–0,28 Wünsch-Einheiten/mL.

Ziel ist es, die beste Startkonzentration der Liberase-Enzymmischungen zu bestimmen. Dies ist der Ausgangspunkt. Die endgültige Konzentration kann in Abhängigkeit von Verfahrens- und Chargenunterschieden bei herkömmlicher Kollagenase variieren.

Kollagenase-Arbeitskonzentration

Multiplizieren Sie Ihre vorherige Kollagenase-Arbeitskonzentration (mg/mL) mit ihrer spezifischen Aktivität (Wünsch-Einheiten/mg, [wie oben bestimmt]), um Wünsch-Einheiten/mL zu erhalten. Zur Bestimmung des erforderlichen Volumens an Liberase-Enzymmischung multiplizieren Sie zuerst Ihre Kollagenase-Arbeitskonzentration (in Wünsch-Einheiten/mL) mit dem Gesamtvolumen Ihrer Enzym-Arbeitslösung, um die erforderliche Gesamtaktivität der Kollagenase zu ermitteln (Wünsch-Einheiten). Dividieren Sie dann die erforderliche Gesamtaktivität der Kollagenase durch die Konzentration der Liberase-Stammlösung („Rekonstituierung und Lagerung“). Das Ergebnis gibt an, wie viele Milliliter Stammlösung der Liberase-Enzymmischung für Ihre Enzym-Arbeitslösung verwendet werden müssen.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Bewahren Sie nicht verwendete Stammlösung in Aliquoten für den Einmalgebrauch bei -15 bis -25 °C auf. Weitere Informationen zur Produktstabilität finden Sie auf der Roche Liberase-Enzym-Website unter www.Kollagenase.com.

Hinweis: Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden!

Rekonstituierung

Rekonstituieren Sie das lyophilisierte Enzym mit sterilem Wasser für Injektionszwecke oder mit Gewebedissoziationspuffer. Geben Sie kein Serum oder andere Komponenten, die die Enzymaktivität beeinflussen könnten wie Albumin oder Proteasehemmer zum Dissoziationspuffer hinzu. Die Enzymstabilität ist bei höheren Konzentrationen und wärmeren Temperaturen (4 °C) verringert. Vermeiden Sie diese beiden Bedingungen.

Rekonstituieren Sie den gesamten Inhalt des Fläschchens. Wiegen Sie keine Einzelportionen des Lyophilisats ab. Wenn Feuchtigkeit in das Fläschchen gelangt, verringert sich die Enzymaktivität.

Bewahren Sie das Fläschchen während der Rehydrierung des lyophilisierten Enzyms auf Eis auf.

Schütteln Sie das Fläschchen vorsichtig bei 2 bis 8 °C, bis sich das Enzym vollständig aufgelöst hat (max. 30 min).

Je nach Gewebedissoziationspuffer, der zum Auflösen gereinigter Liberase-Enzymmischungen in Forschungsqualität verwendet wird, sind ggf. geringfügige Ausfällungen sichtbar, die sich in der verdünnten Arbeitslösung leicht auflösen und die Enzymaktivität nicht beeinflussen.

Entnehmen Sie ein Aliquot der Stammlösung, um die Arbeitslösung herzustellen.

Rekonstituierungsvolumen

2 mL (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg)
10 mL (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)

Kollagenase Wünsch (Einheiten/mL)

13 (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg)
26 (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)

Gesamtkonzentration Kollagenase [mg/mL]

2,5 (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg)
5,0 (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.

Rechtliche Hinweise

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.
Liberase is a trademark of Roche
Roche is a registered trademark of Roche Molecular Systems, Inc.

Piktogramme

Exclamation markHealth hazard

Signalwort

Danger

Gefahreneinstufungen

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Zielorgane

Respiratory system

Lagerklassenschlüssel

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

Flammpunkt (°C)

does not flash


Analysenzertifikate (COA)

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Maria Fernanda Forni et al.
PloS one, 10(10), e0140143-e0140143 (2015-10-16)
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