AB1930

Anti-Integrin-AlphaV-Antikörper, CT, intrazellulär

serum, Chemicon^®

• Synonym(e): CD51
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: rabbit
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: serum
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: polyclonal
• Speziesreaktivität: chicken, hamster, horse, goat, pig, equine, mouse, human, sheep
• Speziesreaktivität (Voraussage durch Homologie): rat
• Hersteller/Markenname: Chemicon^®
• Methode(n): ELISA: suitable; immunohistochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; radioimmunoassay: suitable; western blot: suitable
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NM_002210.2
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P06756
• Versandbedingung: wet ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... ITGAV(3685)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Die Integrin-Familie von Zelladhäsionsrezeptoren besteht aus mindestens 19 membranassoziierten Heterodimeren, die aus Alpha- und Beta-Untereinheiten bestehen, die auf nichtkovalente Weise assoziieren. Bisher wurden 16 verschiedene Alpha-Untereinheiten und 8 verschiedene Beta-Untereinheiten identifiziert. Die Struktur und funktionelle Vielseitigkeit der Integrin-Familie basieren auf den Paarbildungsfähigkeiten der einzelnen alpha- und beta-Untereinheiten. Der Schlüssel zu diesen molekularen Wechselwirkungen zwischen den Integrinrezeptoren und ihren jeweiligen Liganden ist die Erkennung der Arg-Gly-Asp (RGD)-Sequenz, die in den Bestandteilen der extrazellulären Matrix von Fibronektin, Vitronektin, Kollagen, Fibrinogen und Von-Willebrand-Faktor vorliegen (Cheresh, 1991). Die Beteiligung von Integrinen an der vaskulären Proliferation, Adhäsion und Wundheilung ist gut dokumentiert. Integrin-AlphaV ist ein Typ-I-Membranglykoprotein ohne insertierte Domäne (I-Domäne). Das AlphaV-Protein wird posttranslational in eine schwere und eine leichte Kette gespalten, die auf der Zelloberfläche als Disulfid-verknüpftes Polypeptid exprimiert werden.

Spezifität

Integrin-AlphaV. Spezifität ermittelt mittels Immunpräzipitation aus einem Detergensextrakt von mit 35S-Methonin markierten Endothelzellen. Es wurde keine Kreuzreaktivität mit den Integrin-Untereinheiten alpha1, alpha2, alpha3, alpha4 oder alpha6 festgestellt. Das reife AlphaV-Protein (150 kDa) besteht aus einer schweren (125 kDa) und einer leichten (25 kDa) Kette, die über eine Disulfidbindung verknüpft sind und von einem proteolytisch gespaltenen Vorläufer stammen (Suzuki, 1987). Das vom Antikörper erkannte Epitop befindet sich am COOH-terminalen Teil der leichten Kette. Im Western Blot unter reduzierenden Bedingungen weist der Antikörper zwei Hauptbanden bei etwa 25 und 27 kDa nach, die der leichten Kette entsprechen. Die geringfügigen Größenunterschiede der leichten Ketten sind vermutlich auf die proteolytische Spaltung an zwei alternativen Stellen des Vorläufers zurückzuführen. Ähnliche Stellen wurden für alpha6, alpha3 und alphalIbeta gemeldet (Hogervorst, 1991).

Immunogen

Epitop: C-Terminus, intrazellulär

Synthetisches Peptid, abgeleitet von der COOH-terminalen Sequenz (zytoplasmatische Domäne) der menschlichen AlphaV-Integrin-Untereinheit (SwissProt Accession P06756, Aminosäuren 1022–1034).

Anwendung

Der Anti-Integrin-AlphaV-Antikörper, C-Terminus, intrazellulär, weist den Integrin-AlphaV-Gehalt nach und wurde zur Verwendung in ELISA, IH, IP, RIA und WB publiziert und validiert.

ELISA/RIA:
Eine 1:1.000-Verdünnung einer früheren Charge wurde in ELISA/RIA verwendet:

Immunpräzipitation:
5 μl einer früheren Charge dieses Antikörpers reichen aus, um alphaV/beta1 aus 5 × 10⁶ Zellen zu präzipitieren.

Immunhistochemie:
Für die Immunhistochemie wurde eine 1:1.000-Verdünnung aus einer früheren Charge verwendet. (Nur empfohlen für die Verwendung an acetonfixiertem Gewebe.)

Western-Blots: 1:5000.
Der Antikörper erkennt eine einzelne Bande bei etwa 150 kDa, wenn das Protein zwar denaturiert, aber nicht reduziert ist (Hirsch, 1994). Unter reduzierenden Bedingungen erkennt dieser Antikörper zwei Hauptbanden von 25 und 27 kDa und, in geringerem Maße, die 150-kDa-Bande in voller Länge.

Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endanwender bestimmt werden.

Forschungskategorie
Zellstruktur

Forschungsunterkategorie
Integrine

Qualität

Routinemäßig mittels Western Blot an C6-Lysaten beurteilt.
Western-Blot-Analyse: Eine 1:500-Verdünnung dieser Charge wies die leichte INTEGRIN-AV-Kette in 10 μg C6-Lysaten nach.

Zielbeschreibung

130 kDa; 25 und 27 kDa (reduzierende Bedingungen)

Physikalische Form

Nicht aufgereinigt

Reines Kaninchen-Antiserum in Flüssigkeit mit 0,05 % Natriumazid.

Lagerung und Haltbarkeit

In unverdünnten Aliquoten bei -20 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.

Handhabungsempfehlungen:
Zentrifugieren Sie das Fläschchen und mischen Sie die Lösung vorsichtig nach dem Erhalt und vor dem Entfernen der Kappe. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
HT-29-Kolonkarzinomzellen

C6-Lysate.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Rechtliche Hinweise

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

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