71401-M

Rosetta 2(DE3)pLysS Singles Kompetente Zellen - Novagen

Escherichia coli, rod shaped

• Synonym(e): BL21 derivatives
• UNSPSC-Code: 41106202
• NACRES: NA.81

Eigenschaften

• product name: Rosetta 2(DE3)pLysS Singles Kompetente Zellen - Novagen, Novagen′s Rosetta 2 (pLysS) host strains are BL21 derivatives designed to enhance the expression of eukaryotic proteins that contain codons rarely used in E. coli along with T7 lysozyme activity.
• Biologische Quelle: Escherichia coli
• Qualitätsniveau: 100
• Hersteller/Markenname: Novagen^®
• Lagerbedingungen: OK to freeze
• Wachstumsmodus: adherent or suspension
• Morphologie: rod shaped
• Methode(n): microbiological culture: suitable
• Zelltransformation: transformation efficiency: >2 × 10⁶ cfu/μg
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −70°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Genotyp: F^-ompT hsdS_B(r_B^- m_B^-) gal dcm (DE3) pLysSRARE2 (Cam^R)





Dieses Produkt enthält genetisch veränderte Organismen (GVO). In der EU sind GVO durch die Richtlinien 2001/18/EG und 2009/41/EG des Europäischen Parlaments und Rates und ihre nationale Umsetzung in den Mitgliedstaaten reguliert. Wir sind aufgrund dieser Vorschriften gesetzlich verpflichtet, bestimmte Informationen zu Ihrer Person und zu der Einrichtung, in der die GVO verwendet werden, anzufordern. Das Endverbleibserklärungsformular (EVE-Formular) ist hier zu finden.

Eine häufig eingesetzte Methode für die Transformation von DNA-Plasmiden in E. coli ist die Verwendung von chemisch kompetenten Zellen. Kompetente Zellen können zwar auch im Labor hergestellt werden, doch durch die Verwendung der präparierten kompetenten Novagen Zellen kann eine höhere Effizienz, Wiederholgenauigkeit und Anwenderfreundlichkeit erzielt werden. Die kompetenten Zellen Novagen^® Singles sind auf maximalen Anwenderkomfort und Zuverlässigkeit bei der Plasmidtransformation ausgerichtet. Chemisch kompetente Zellen werden unter Anwendung einer optimierten Methode hergestellt. Die Zellen werden in Mengen von 50 µl bereitgestellt, wodurch das Aufteilen in Aliquote, Einfrieren/Auftauen oder die Verschwendung von unverbrauchten Restmengen in den Fläschchen entfällt, was zu Zeit- und Kosteneinsparungen führt und eine zuverlässige Zellleistung gewährleistet. Zur Verwendung muss das Produkt lediglich aufgetaut, DNA hinzugefügt, 5 Minuten auf Eis inkubiert, 30 Sekunden einer Hitzeschockbehandlung unterzogen, 2 Minuten auf Eis gelegt und SOC-Medium zugegeben werden.
T7-Expressionsstämme sind Lysogene des Bakteriophagen DE3, worauf durch das (DE3) hingewiesen wird. Diese Wirte enthalten eine chromosomale Kopie des T7-RNA-Polymerase-Gens, das durch den lacUV5-Promoter kontrolliert wird. Derartige Stämme eignen sich zur Herstellung von Proteinen aus Zielgenen, die unter Anwendung von IPTG als Induktor in entsprechende T7-Expressionsvektoren geklont wurden.
Rosetta 2 Wirtsstämme sind BL21-Derivate zur besseren Expression eukaryotischer Proteine, die nur selten in E. coli verwendete Codons enthalten. Diese Stämme stellen tRNAs für 7 seltene Condons (AGA, AGG, AUA, CUA, GGA, CCC und CGG) in einem kompatiblen Chloramphenicol-resistenten Plasmid bereit. Die tRNA-Gene werden von ihren nativen Promotern abgeleitet.

DE3 weist darauf hin, dass der Wirt ein Lysogen von λDE3 ist und daher eine chromosomale Kopie des T7-RNA-Polymerase-Gens enthält, das durch den lacUV5-Promoter kontrolliert wird. Derartige Stämme eignen sich zur Herstellung von Proteinen aus Zielgenen, die durch Induktion mittels IPTG in pET-Vektoren geklont wurden.

pLysS-Stämme exprimieren T7-Lysozym, wodurch die basale Expression der T7-RNA-Polymerase vor der Induktion weiter unterdrückt und Zielproteine codierende pET-Rekombinanten, die das Zellwachstum und die Lebensfähigkeit beeinflussen, stabilisiert werden.

Novagen Rosetta 2 (pLysS) Wirtsstämme sind BL21-Derivate zur besseren Expression eukaryotischer Proteine, die nur selten in E. coli verwendete Codons enthalten und T7-Lysozym-Aktivität aufweisen.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Garantierte Transformationseffizienzen:

>1,5 × 10⁸ KBE/µg (NovaBlue und NovaBlueT1R)

>2 × 10⁶ KBE/µg [BL21(DE3), BL21(DE3)pLysS, Origami(DE3), Origami 2(DE3),Rosetta(DE3), Rosetta 2(DE3)pLysS]

• Das Produkt wird in Form von gefrorenen Einmal-Aliquoten in Kits für 11 oder 22 Reaktionen bereitgestellt

• Enthält Testplasmid und SOC-Medium

• Auswahl an gängigen Wirtsstämmen: NovaBlue für hocheffizientes Klonieren und λDE3-Lysogene für die Proteinexpression mit pET-Vektoren

• Hergestellt unter Anwendung einer optimierten chemischen Methode

Komponenten

•für 11 oder 22 ReaktionenRosetta 2(DE3)pLysS kompetente Zellen

•2 × 2 ml oder 4 × 2 mlSOC-Medium

•10 µlTestplasmid

Warnhinweis

Toxizität: Mehrere Toxizitätswerte, siehe MSDS (O)

Rechtliche Hinweise

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids