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Kompetente Tuner(DE3)pLacI-Zellen – Novagen^®

Tuner host strains are lacZY deletion mutants of BL21, which enable adjustable levels of protein expression throughout all cells in a culture. Contains the pLacI plasmid producing extra Lac repressor.

• UNSPSC-Code: 41106202

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Escherichia coli
• Qualitätsniveau: 100
• Hersteller/Markenname: Novagen^®
• Lagerbedingungen: OK to freeze; avoid repeated freeze/thaw cycles
• Wachstumsmodus: adherent or suspension
• Morphologie: rod shaped
• Methode(n): microbiological culture: suitable
• Zelltransformation: transformation efficiency: >2×10⁶ cfu/μg
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −70°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Genotyp: F^–ompT hsdS_B (r_B^– m_B^–) gal dcm lacY1(DE3) pLacI (Cam^R)





Dieses Produkt enthält genetisch veränderte Organismen (GVO). In der EU sind GVO durch die Richtlinien 2001/18/EG und 2009/41/EG des Europäischen Parlaments und Rates und ihre nationale Umsetzung in den Mitgliedstaaten reguliert. Wir sind aufgrund dieser Vorschriften gesetzlich verpflichtet, bestimmte Informationen zu Ihrer Person und zu der Einrichtung, in der die GVO verwendet werden, anzufordern. Das Endverbleibserklärungsformular (EVE-Formular) ist hier here zu finden.

Expressionswirtsstämme für die Vektoren pETBlue und pTriEx sind lDE3-Lysogene, die auch das kompatible pLacI-Plasmid tragen, das für den lac-Repressor kodiert. Das pLacI-Plasmid verleiht Chloramphenicol-Resistenz und stellt genügend lac-Repressor zur Verfügung, um die Transkription aus dem T7lac-Promotor in Abwesenheit eines Induktors zu hemmen. Der NovaBlue-Wirtsstamm wird für die erste Klonierung mit pETBlue- und pTriEx-Vektoren empfohlen, da er eine überragende Transformationseffizienz aufweist und hohe Plasmid-DNA-Ausbeuten von hoher Qualität liefert.

Es ist zu beachten, dass diese Stämme nicht für die Verwendung mit den Vektoren pET, pACYCDuet, pCDF, pRSF, pCOLADuet und pETcoco empfohlen werden.

Die Tuner-Stämme sind lacZY-Deletionsmutanten von BL21 und ermöglichen ein anpassbares Niveau der Proteinexpression in allen Zellen einer Kultur. Die lac-Permease(lacY)-Mutation ermöglicht einen einheitlichen Eintritt von IPTG in alle Zellen der Population, was zu einer konzentrationsabhängigen, homogenen Induktion führt. Durch Anpassung der IPTG-Konzentration kann die Expression von sehr niedrigen Werten bis hin zu den robusten, vollständig induzierten Werten, die üblicherweise mit pET-Vektoren verbunden sind, reguliert werden. Eine geringere Expression kann die Löslichkeit und Aktivität schwieriger Zielproteine verbessern. In Tuner(DE3)pLacI befinden sich die seltenen tRNA-Gene auf demselben Plasmid, welches das lac-Repressor-Gen trägt.

DE3 weist darauf hin, dass der Wirt ein Lysogen von λDE3 ist und daher eine chromosomale Kopie des T7-RNA-Polymerase-Gens enthält, das durch den lacUV5-Promoter kontrolliert wird. Solche Stämme eignen sich zur Herstellung von Protein aus Zielgenen, die in pET-Vektoren kloniert werden, wobei IPTG als Induktor verwendet wird.

Tuner-Wirtsstämme sind lacZY-Deletionsmutanten von BL21, die ein anpassbares Niveau der Proteinexpression in allen Zellen einer Kultur ermöglichen. Enthält das pLacI-Plasmid, das einen zusätzlichen Lac-Repressor produziert.

Komponenten

0,4 ml1 mlKomponente

•2 × 0,2 ml5 × 0,2 mlKompetente Tuner(DE3)pLacI-Zellen

•2 × 2 ml4 × 2 mlSOC-Medium

•2 ng2 ngTest-Plasmid

Warnhinweis

Toxizität: Mehrere Toxizitätswerte, siehe MSDS (O)

Rechtliche Hinweise

NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 2