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FITC-Markierungskit

• Synonym(e): FITC Antibody Labeling Kit, FITC Conjugation Kit, Fluorescent Labeling Kit
• UNSPSC-Code: 41116133
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Hersteller/Markenname: Calbiochem^®
• Qualitätsniveau: 100
• Lagerbedingungen: OK to freeze; protect from light
• Lagertemp.: 2-8°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Bietet eine Methode zur schnellen und einfachen Markierung von Antikörpern oder anderen Proteinen mit Fluorescein. Durch eine direkte Markierung des primären Antikörpers entfällt der Bedarf nach einem sekundären Antikörper, was den Hintergrund vermindert und ein insgesamt besseres Signal-Rauschen-Verhältnis ermöglicht. Jedes Kit reicht für mindestens fünf Konjugationen bei Proteinen von 100 µ;g bis 2,5 mg aus.

Komponenten

Fluorescein (fünf Ampullen), Carbonat-Pufferkonzentrat, DMF-Lösungsmittel, PBS-Pufferkonzentrat und ein Benutzerprotokoll.

Warnhinweis

Toxizität: Mehrere Toxizitätswerte, siehe MSDS (O)

Prinzip

Das Calbiochem FITC-Markierungskit bietet eine Methode zur schnellen und einfachen Markierung von Antikörpern oder anderen Proteinen mit Fluorescein. FITC-Antikörper-Konjugate eignen sich für zahlreiche Anwendungen wie Durchflusszytometrie und Immunzytochemie. Andere Proteine wie z. B. Steroide können ebenfalls mit FITC markiert werden. Durch eine direkte Markierung des primären Antikörpers entfällt der Bedarf nach einem sekundären Antikörper, was den Hintergrund vermindert und ein insgesamt besseres Signal-Rauschen-Verhältnis ermöglicht.

Angaben zur Herstellung

Antikörper/Protein-Präparation: 10 ml Carbonatpuffer-Konzentrat zu 990 ml destilliertem Wasser hinzugeben und Antikörper über Nacht im Puffer dialysieren.

Hinweis zur Analyse

1. Die Absorbanz des FITC-Antikörper-Konjugats auf zwei Wellenlängen ablesen: 280 nm und 495 nm. 1X PBS/0,1%NaN3 als spektrophotometrischen Blank verwenden. Die optimalen Absorbanz-Ablesungen des konjugierten Proteins liegen im Bereich von 0,2 bis 1,2 ABS.

2. Anhand der zwei Absorbanz-Ablesungen das F/P-Molarverhältnis des FITC/Protein-Konjugats gemäß der folgenden Formel berechnen:<;div class="Bio_doc_image">;Abbildung 1: F/P-Molarverhältnis
<;/div>;

3. Zur Ermittlung der Konzentration des FITC-Antikörper-Konjugats werden zwei Formeln verwendet. Wenn für die Konjugation das Protein IgG verwendet wurde, die Konzentration des markierten Antikörpers gemäß der folgenden Formel schätzen:<;div class="Bio_doc_image">;<;p class="title">;Abbildung 2: Konzentration von FITC-IgG
<;/div>;Wenn für die Konjugation nicht das Protein IgG verwendet wurde, die Konzentration des konjugierten Proteins gemäß der folgenden Formel schätzen:<;div class="Bio_doc_image">;Abbildung 3: Konzentration von FITC-Protein
<;/div>;E^0,1 % entspricht der A₂₈₀-Ablesung einer 1 mg/ml-Lösung des unkonjugierten Proteins, gemessen in einer Küvette mit Pfadlänge 1 cm.

Sonstige Hinweise

Aufgrund der Beschaffenheit der in dieser Lieferung enthaltenen Gefahrgüter können zusätzliche Versandkosten bei Ihrer Bestellung anfallen. Bestimmte Größen sind ggf. von den Versandzuschlägen für Gefahrgüter ausgenommen. Um weitere Informationen über diese Versandzuschläge zu erhalten, kontaktieren Sie bitte Ihren lokalen Vertrieb.

Rechtliche Hinweise

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H317,H319,H334,H360D
• P-Sätze: P202 - P261 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338 - P308 + P313
• Gefahreneinstufungen: Eye Irrit. 2 - Repr. 1B - Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1
• Lagerklassenschlüssel: 6.1C - Combustible acute toxic Cat.3 / toxic compounds or compounds which causing chronic effects