Kits ELISA
Un dosage par immunosorbant lié à une enzyme (ELISA pour "Enzyme-Linked Immunosorbent Assay") est un test immunologique réalisé sur une plaque multipuits dans lequel l'un des composants du test, généralement un anticorps ou un échantillon, est adsorbé sur une surface solide, en l'occurrence une plaque. Permettant une détection quantitative, sensible et rapide des analytes, pour un coût relativement bas, les tests ELISA représentent l'un des formats de dosage les plus simples à réaliser. En outre, la facilité d'adaptation d'un test ELISA à une méthode de criblage à plus haut débit permet aux chercheurs de tester un grand nombre d'échantillons en une seule opération.
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Tests ELISA en sandwich, directs et par compétition
Nos tests ELISA sont un moyen pratique et convivial d'étudier les biomarqueurs protéiques solubles sur diverses matrices dont le sérum, le plasma, les surnageants de culture cellulaire ou les lysats. Notre offre de tests ELISA comprend plus de 1 000 tests pour la recherche (RUO pour "Research Use Only") sur une grande diversité d'espèces, notamment l'être humain, la souris, le rat et plusieurs autres modèles animaux (animaux d'élevage et de compagnie). Chaque test est accompagné d'un protocole spécifique et des réactifs nécessaires au traitement d'une plaque de 96 puits. Les tests ELISA sont principalement disponibles au format 96 puits, les réactifs nécessaires à la détection et à la quantification de la cible étant mis à disposition par le fournisseur. Il existe plusieurs méthodes de dosage ELISA, notamment la méthode "sandwich", la méthode directe et la méthode par compétition.
La méthode sandwich utilise une paire d'anticorps monoclonaux dirigés contre différents épitopes de la même cible. L'anticorps monoclonal primaire, lié à la plaque, attire la protéine présente dans la solution tandis que le second anticorps monoclonal vient compléter le "sandwich" pour produire le signal qui indiquera la présence de la cible. Le kit contient une quantité connue de la version recombinante de la protéine, ce qui permet à l'utilisateur de tracer une courbe étalon par rapport à laquelle le signal de l'un des échantillons pourra être interprété. La majorité des tests ELISA de notre gamme est dans ce format "sandwich".
Les tests ELISA directs et par compétition sont plus rares. Le test direct utilise un seul anticorps monoclonal pour détecter l'échantillon lié à la plaque. Un anticorps secondaire rapporteur vient ensuite se fixer sur l'anticorps monoclonal pour produire le signal.
Dans le test par compétition, une quantité connue du biomarqueur est préliée à la plaque. Un anticorps marqué est co-incubé avec l'échantillon, lequel "absorbe" l'anticorps en fonction de sa concentration en protéine cible. L'anticorps libre est alors en mesure de se fixer à l'antigène qui se trouve sur la plaque, produisant un signal après lavage de l'échantillon. Dans ce cas, le signal est inversement proportionnel à la concentration du biomarqueur cible.
Tests ELISA Conferma™ et logiciel d'ajustement des courbes de dosage immunologique Belysa®
La marque Conferma™ regroupe des tests ELISA en sandwich conçus pour minimiser la variabilité inter-lot au niveau des réactifs critiques, préoccupation majeure pour les utilisateurs de tests. L'évaluation de chaque lot de réactifs critiques, par une série de techniques analytiques selon un protocole de contrôle qualité détaillé, nous permet de maîtriser et de limiter la variabilité dans le temps.
Pour permettre aux scientifiques d'évaluer la reproductibilité de leur méthode, nous avons également conçu le logiciel d'ajustement de courbe pour immunoessai Belysa®. Grâce à cet outil, un utilisateur peut analyser son dosage immunologique en sandwich pour s'assurer que des paramètres tels que le coefficient de variation (CV) et le taux de récupération sont conformes à ses attentes. Il peut ensuite passer à la comparaison des courbes étalons de plusieurs plaques pour confirmer la cohérence de sa méthode.
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