P0982

Mélange réactionnel JumpStart^™ REDTaq^® ReadyMix^™

for PCR

• Synonyme(s) : Hot start PCR master mix, Hot start master mix, Hot start taq master mix
• Numéro MDL: MFCD00166026
• Code UNSPSC : 41106300
• Nomenclature NACRES : NA.55

Propriétés

• Niveau de qualité: 200
• Forme: liquid
• Utilisation: sufficient for 100 reactions; sufficient for 20 reactions; sufficient for 800 reactions
• Caractéristiques: dNTPs included; hotstart
• Concentration: 2.5 units/reaction (50 μL reaction volume)
• Technique(s): PCR: suitable
• Couleur: red
• Entrée: purified DNA
• Application(s): agriculture
• Conditions d'expédition: wet ice
• Température de stockage: −20°C

Description

Description générale

Le mélange pour PCR JumpStart^™ REDTaq^® ReadyMix^™ est une solution prête à l'emploi qui allie la performance de la PCR à démarrage à chaud et la simplicité d'utilisation des produits ReadyMix^™ et REDTaq^® de Sigma. Ce mélange maître contient la Taq ADN polymérase JumpStart^™ de Sigma, des désoxynucléotides purs à 99 %, un tampon et un colorant rouge inerte dans un milieu réactionnel optimisé concentré 2 ×. Ajouter 25 μl du mélange prêt à l'emploi aux amorces et à la matrice dans de l'eau de façon à obtenir un volume réactionnel final de 50 μl. L'anticorps anti-Taq JumpStart^™ présent dans le mélange inactive la Taq ADN polymérase à température ambiante. Pendant la première étape de dénaturation de la PCR, le complexe se dissocie et la polymérase se réactive complètement. Le colorant rouge inerte ne perturbe ni le séquençage automatique ni la digestion par l'enzyme de restriction, la ligature ou les autres manipulations en aval. Le produit de PCR peut être facilement séparé du colorant par des techniques de purification standards. Le mécanisme à démarrage à chaud permet d'effectuer la mise en place à température ambiante : la solution idéale pour les applications à haut débit.

Application

Le mélange réactionnel JumpStart^™ REDTaq^® ReadyMix^™ est utilisé dans l'extraction directe de l'ADN et son amplification par PCR. Il est également utilisé dans les applications suivantes :

• PCR multiplex qualitative
• PCR méthylation-spécifique (MS-PCR)
• amplification par PCR d'ADNc synthétisé à partir d'ARN total

Caractéristiques et avantages

• L'ADN polymérase JumpStart^™ REDTaq^® est une enzyme à démarrage à chaud ("hot start") inactivée par un anticorps qui est conçue pour limiter l'amplification non spécifique tout en augmentant la spécificité et le rendement de la cible.
• La Taq ADN polymérase JumpStart^™ assure une meilleure amplification indépendamment de la concentration de la matrice.
• Le mélange JumpStart^™ REDTaq^® ReadyMix^™ réduit les étapes de pipetage et les risques de contamination. Le mécanisme à démarrage à chaud permet d'effectuer la mise en place à température ambiante : la solution idéale pour les applications à haut débit.
• Le colorant rouge inerte permet de voir facilement si le réactif a bien été mélangé.
• Aucun autre colorant de charge n'est nécessaire. Les aliquotes peuvent être directement chargées sur un gel d'agarose après la réaction.

Conditionnement

Volume réactionnel par défaut : 50 μl

Conditionnement de la référence 20RXN : 1 × 500 μl
Conditionnement de la référence 100RXN : 1 × 2,5 ml
Conditionnement de la référence 800RXN : 1 × 20 ml

Définition de l'unité

Une unité incorpore 10 nmol de dNTP totaux dans de l'ADN précipitable à l'acide en 30 minutes, à 74 °C.

Autres remarques

Pour en savoir plus sur les produits JumpStart REDTaq et ReadyMix, rendez-vous sur www.sigma-aldrich.com/hotstart.

Pour une PCR classique, mélanger 25 μl de JumpStart^™ REDTaq^® ReadyMix^™ à 25 μl d'un mélange contenant l'ADN matrice et les amorces dans de l'eau. Le volume réactionnel peut être ajusté si nécessaire.

Informations légales

L'achat de ce produit inclut une immunité contre les poursuites dans le cadre des brevets mentionnés dans la notice du produit pour l'utilisation de la seule quantité achetée pour les propres recherches de l'acheteur. Aucun autre droit de brevet (tel que les droits de brevet concernant la nucléase 5′) n'est reconnu expressément, implicitement ou par préclusion. Pour de plus amples informations sur l'achat de licences, contacter le directeur des licences : Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, États-Unis.
L'utilisation de ces anticorps est autorisée à des fins de recherche in vitro au titre des brevets américains n° 5 338 671 et n° 5 587 287 et des brevets équivalents dans les autres pays.

L'utilisation de ce produit est protégée par un ou plusieurs des brevets américains suivants et par des revendications de brevets équivalentes en dehors des États-Unis : US 8 404 464 et US 7 972 828. L'acheteur de ce produit bénéficie d'une immunité de juridiction limitée et incessible au titre des revendications de brevets susmentionnées.

JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

REDTaq is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC