MABS1254

Anticorps anti-O-GlcNAc, clone CTD110.6

clone CTD110.6, from mouse

• Synonyme(s) : O-GlcNAc, beta-O-GlcNAc, O-Linked N-Acetylglucosamine, beta-O-linked N-acetylglucosamine
• Code UNSPSC : 12352203
• eCl@ss : 32160702
• Nomenclature NACRES : NA.41

Propriétés

• Source biologique: mouse
• Niveau de qualité: 100
• Forme d'anticorps: purified immunoglobulin
• Type de produit anticorps: primary antibodies
• Clone: CTD110.6, monoclonal
• Réactivité de l'espèce (prédite par homologie): all
• Technique(s): ELISA: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotype: IgMκ
• Modification post-traductionnelle de la cible: glycosylation
• Informations sur le gène: human ... OGT(8473)

Description

Description générale

La modification post-traductionnelle des protéines par la N-acétylglucosamine liée en β (β-GlcNAc) via les fractions hydroxyle des résidus sérine ou thréonine est appelée β-GlcNAc à liaison en O ou plus simplement O-GlcNAc. La O-GlcNAc est l'une des modifications post-traductionnelles les plus abondantes au sein des compartiments nucléocytoplasmiques de l'ensemble des animaux et des plantes. Contrairement aux autres types de glycosylation des protéines, la O-GlcNAc se produit exclusivement dans les compartiments nucléaires et cytoplasmiques et ne subit généralement pas d'autre modification pour former des structures plus longues. En outre, la O-GlcNAcylation est un processus réversible et extrêmement dynamique. La O-GlcNAc transférase (OGT) fixe la O-GlcNAc aux protéines au niveau de résidus sérine et thréonine spécifiques, tandis que la O-GlcNAcase catalyse le retrait / l'hydrolyse de la O-GlcNAc à partir des protéines. En fait, l'interaction dynamique entre la O-GlcNAcylation et la phosphorylation des résidus serine/thréonine joue un rôle important dans la régulation de la signalisation cellulaire. Tau et l'ARN polymérase II (Pol II) sont deux protéines bien connues qui sont modifiées par O-GlcNAcylation. Dans les cerveaux humains atteints de maladie d'Alzheimer, la protéine tau est fortement phosphorylée et moins O-GlcNAcylée. De manière similaire, la O-GlcNAc est retirée et remplacée par un O-phosphate dans le domaine CTD de la Pol II lorsque la phase d'élongation de la transcription est initiée.

Spécificité

La modification ciblée ne présente pas de spécificité vis-à-vis de l'espèce.

Le clone CTD110.6 a permis de détecter spécifiquement les résidus sérine et thréonine portant un groupe GlcNAc à liaison bêta en O, mais pas ceux portant un groupe O-GlcNAc à liaison alpha en O. La présence de GlcNAc a supprimé la détection de la modification cible, mais pas la présence de GalNAc. Le clone CTD110.6 n'a pas reconnu les peptides portant des résidus sérine et thréonine non modifiés (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).

Immunogène

Peptide conjugué à de la KLH portant un résidu sérine modifié par de la O-GlcNAc.

Épitope : GlcNAc à liaison bêta en O.

Application

Analyse par western blotting : Une concentration de 1,0 µg/ml d'un lot représentatif a permis de détecter des protéines O-GlcNAcylées dans 7,5-15 µg de lysat de fibroblastes embryonnaires de souris (FES ou MES) de type sauvage, mais pas dans du lysat de FES pauvres en O-GlcNAc transférase (OGT) (avec la permission des Dr Natasha Zachara et Gokben Yildirir, M.S.).
Analyse ELISA : Un lot représentatif a permis de détecter un peptide contenant le domaine C-terminal (CTD) de l'ARN polymérase II (YSPTSPS) et comportant un seul résidu sérine ou thréonine O-GlcNAcylé, mais pas le peptide non modifié correspondant (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Analyse par immunoprécipitation : Un lot représentatif a permis d'immunoprécipiter des protéines O-GlcNAcylées à partir de cellules souches pluripotentes humaines (CSPh) (Maury, J.J., et al. (2013). Stem Cell Res. 11(2):926-937).
Analyse par immunoprécipitation : Un lot représentatif a permis d'immunoprécipiter des protéines O-GlcNAcylées à partir d'extraits de cellules HeLa (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter un niveau similaire de O-GlcNAcylation dans des cellules souches pluripotentes humaines (CSPh) non différenciées, en cours de différenciation et ayant atteint le stade final de leur différenciation (Maury, J.J., et al. (2013). Stem Cell Res. 11(2):926-937).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter un peptide contenant le domaine C-terminal (CTD) de l'ARN polymérase II (YSPTSPS) conjugué à de la BSA et comportant un groupement GlcNAc à liaison bêta en O, mais pas à liaison alpha en O, ni le peptide non modifié correspondant. La présence de GlcNAc a supprimé la détection des bandes cibles, mais pas la présence de GalNAc (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter des protéines O-GlcNAcylées dans un extrait nucléaire de cellules HeLa, ainsi que des protéines O-GlcNAcylées purifiées à partir d'un extrait cytosolique et nucléaire de cellules HeLa, avec une colonne contenant de l'agglutinine de germe de blé (WGA). Le blocage de l'anticorps par un peptide immunogène avant immunoblotting a supprimé la détection des bandes cibles (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter une régulation à la hausse des protéines O-GlcNAcylées dans des cellules Jurkat traitées avec du PUGNAc, un inhibiteur de glucosaminidase, et de la glucosamine, un intermédiaire de la voie de l'hexosamine (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).

Domaine de recherche
Signalisation

L'anticorps anti-O-GlcNAc, clone CTD110.6, est un anticorps dirigé contre la protéine O-GlcNAc destiné aux analyses par western blotting, ELISA et immunoprécipitation.

Sous-domaine de recherche
Modifications post-traductionnelles générales

Qualité

Produit évalué par western blotting sur un lysat de cellules HeLa.

Analyse par western blotting : Une concentration de 4,0 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter des protéines O-GlcNAcylées dans 10 µg de lysat de cellules HeLa.

Description de la cible

Variable en fonction de la taille de la (des) protéine(s) O-GlcNAcylées.

Forme physique

Anticorps IgMκ monoclonal de souris purifié dans du PBS avec 0,05 % d'azoture de sodium.

Format : purifié

Stockage et stabilité

Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Autres remarques

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.

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Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 10 - Combustible liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 2
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable