Meios e tampões clássicos
Variações de meios de cultura celular foram aprimoradas em resposta à necessidade de ambientes fisiologicamente relevantes para diversas culturas celulares de mamíferos. Esses meios e sais, juntamente com seus componentes, foram qualificados para aplicações em cultura celular e são fabricados em nossas instalações com tecnologia de ponta. Escolha meios adequados para a sua aplicação com base em parâmetros que incluem:
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DMEM (Meio de Eagle modificado por Dulbecco)
O DMEM (meio de Eagle modificado por Dulbecco) é o meio mais amplamente adequado para muitos fenótipos de células aderentes entre os meios definidos para cultura de tecidos e células. A modificação de Dulbecco é uma formulação suplementar aprimorada que aumenta o teor de aminoácidos e vitaminas específicos do meio Eagle original em até 4 vezes. Nossa seleção inclui uma gama de concentrações de glicose, assim como de formulações com ou sem L-glutamina. Os produtos sem o indicador de pH vermelho de fenol estão disponíveis para aplicações sensíveis a estrogênio, e nossa oferta abrangente inclui formatos líquidos convenientes e prontos para uso, bem como meios em pó econômicos para um armazenamento mais fácil e vida útil mais longa.
Meio RPMI 1640
Nomeado em homenagem ao Instituto Roswell Park onde foi desenvolvido por Moore et al, o meio RPMI 1640 é otimizado para cultivo de tipos celulares não aderentes, tais como linfócitos e outras células sanguíneas. A formulação é baseada na série RPMI 1630 de meios utilizando um sistema de tamponamento de bicarbonato e alterações nas quantidades de aminoácidos e vitaminas. O meio RPMI 1640 foi usado para cultivo de leucócitos normais e neoplásicos humanos. Quando devidamente suplementada, essa formulação demonstrou ampla aplicabilidade no apoio ao cultivo de vários tipos de células cultivadas, incluindo linfócitos humanos frescos em ensaio de estimulação com fitoemaglutinina (PHA) de 72 horas.
Formulações de meios DMEM/ F12
Nos últimos anos, pesquisadores relataram o cultivo de diversas linhagens celulares em meio sem soro que continha um suplemento de nutrientes, fatores de crescimento e hormônios ao invés de soro. Mather e Sato (BBRC, 1985) relataram o cultivo bem-sucedido de células de Leydig e Sertoli em meio sem soro que continha insulina, transferrina, fator de crescimento epidérmico, hormônio luteinizante ou hormônio estimulante folicular, somatomedina e hormônio de crescimento. Embora os hormônios e suas concentrações sejam específicos para o tipo de célula sendo estudada, o meio considerado ideal para esses estudos foi uma mistura de 1:1 de Meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) e a mistura de nutrientes F-12 de Ham. O tampão de HEPES pode ser incluído na formulação em concentração final de 15 mM para compensar a perda de capacidade tamponante que ocorre com a eliminação do soro.
MEM (Meio essencial mínimo)
Desenvolvido por Harry Eagle quando trabalhava no NIH, o meio essencial mínimo (MEM) contém aminoácidos essenciais universais para as necessidades de várias espécies, e é um dos mais amplamente utilizados de todos os meios de cultura celular sintéticos. Tentativas iniciais de cultivar fibroblastos normais de mamíferos e certos subclones de células HeLa revelaram que tinham requisitos nutricionais específicos que não podiam ser atendidas pelo meio basal de Eagle (BME). Estudos subsequentes usando essas e outras células em cultura indicaram que poderiam ser feitas adições ao BME para ajudar no cultivo de um número maior de células com exigências nutricionais complexas. O MEM, que incorpora essas modificações, inclui concentrações mais altas de aminoácidos para que o meio se aproxime mais da composição proteica de células de mamíferos.
O MEM foi utilizado para cultivo de uma ampla variedade de células cultivadas em monocamadas. A suplementação opcional de aminoácidos não essenciais em formulações que incorporam os sais de Hank ou de Earle ampliaram a utilidade deste meio. A formulação foi adicionalmente modificada pela eliminação opcional de cálcio para permitir o cultivo de células em suspensão.
Formulação de meios F-10 e F-12 de Ham
As misturas de nutrientes de Ham foram originalmente desenvolvidas para auxiliar no cultivo de vários clones de células de ovários de hamster chinês (CHO), bem como de clones de células HeLA e células L de camundongos, mas são também adequadas para ensaios de cultura de hepatócitos, fusão viral e toxicidade. Essas misturas foram formuladas para uso com ou sem suplementação com soro, dependendo do tipo de célula cultivada.
- A mistura F-10 de Ham demonstrou apoiar o cultivo de células diploides humanas, leucócitos, e explantes primários de tecidos de rato, coelho e galinha.
- A mistura F-12 de Ham foi utilizada no cultivo de células epiteliais de próstata de rato e de hepatócitos primários de rato. Um ensaio de toxicidade clonal usando células CHO foi relatado usando a F-12 de Ham, também disponível com HEPES 25 mM que proporciona tamponamento mais eficaz na faixa de pH ideal de 7,2-7,4
- A modificação de Coon da F-12 de Ham foi desenvolvida para cultivar células híbridas produzidas por fusão viral. Essa modificação consiste em 2 vezes a concentração padrão de aminoácidos e piruvato, mais ácido ascórbico e concentrações de sal ajustadas. A fórmula de Coon contém 0,863 mg/l de sulfato de zinco, o que pode torná-la inadequada para o cultivo de células L de camundongo.
- A modificação de Kaighn da F-12 de Ham (também chamada de F-12K de Ham) tem concentrações maiores de piruvato e determinados aminoácidos, bem como sais modificados (fórmula de Konigsberg). Este meio foi desenvolvido para apoiar o crescimento de células de rato e galinha diferenciadas, bem como hepatócitos primários humanos.
Meio 199 (M199)
Os meios de cultura de tecidos iniciais eram formulados predominantemente a partir de produtos de origem animal e/ou extratos de tecidos. Em 1950, Morgan e seus colaboradores relataram seus esforços para produzir uma fonte nutricional rigidamente definida para culturas celulares. Seus experimentos, conduzidos com várias combinações de vitaminas, aminoácidos e outros fatores, revelaram que o crescimento de tecido explantado poderia ser mensurado no que se tornou conhecido como o Meio 199 (M199), agora amplamente utilizado em virologia, produção de vacinas, cultura de explantes de tecido primário e no cultivo in vitro de tecidos de lentes de rato e tecidos epiteliais pancreáticos de camundongo.
Pesquisadores eventualmente descobriram que o cultivo de longo prazo de células requer a adição de suplementos de soro ao líquido da cultura. Quando devidamente suplementado, o Meio 199 tem aplicação ampla em espécies, particularmente no cultivo de células não transformadas.
Sais basais para cultural celular
D-PBS, de Hank, de Earle, de Tyrode: você encontrará a formulação certa para a sua aplicação de cultura na coleção mais completa de sais balanceados disponível no mundo.
Outros meios de cultura clássicos
Encontre formulações especializadas incluindo as modificações de Ames, Iscove e Glasgow, bem como de Click, Fischer, L-15, de McCoy, NCTC e outras.
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