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ABN83

Sigma-Aldrich

Anticorpo anti-transportador de nucleotídeo vesicular (anticorpo VNUT)

serum, from guinea pig

Sinônimo(s):

Solute carrier family 17 member 9

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About This Item

Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

fonte biológica

guinea pig

Nível de qualidade

forma do anticorpo

serum

tipo de produto de anticorpo

primary antibodies

clone

polyclonal

reatividade de espécies

mouse, rat

técnica(s)

immunofluorescence: suitable
western blot: suitable

nº de adesão NCBI

nº de adesão UniProt

Condições de expedição

dry ice

modificação pós-traducional do alvo

unmodified

Informações sobre genes

Descrição geral

O membro 9 da família de transportadores de soluto 17 (UniProt; também conhecido como transportador de nucleotídeo vesicular, VNUT) é codificado pelo gene Slc17a9 (também conhecido como Vnut) (Gene ID 228993) em espécies murinas. O VNUT é um membro da família de transportadores de ânions que medeia o acúmulo ativo de nucleotídeos (ou seja, ATP, ADP e UTP) em vesículas secretoras, bem como a exocitose de ATP de vários tipos de tecidos. VNUT é expresso por células amácrinas/interplexiformes (IPCs) dopaminérgicas (DA) positivas para tirosina hidroxilase/TH na retina, bem como por neurônios DA e não DA no mesencéfalo. Além do transcrito Slc17a9 de 447 aminoácidos (NM_183161), foram previstas supostas isoformas de codificação de proteínas baseadas em análise computacional automatizada (X1, XM_006500589; X2, XM_006500590; X3, XM_006500591). Duas bandas de proteínas de tamanhos ~75 e ~50 kDa são identificadas em tecidos retinais e corticais de camundongos por imunotransferência, com a banda de 75 kDa sendo a isoforma VNUT canônica de 447-a.a. e a banda de ~50 kDa provavelmente representando a isoforma X1/X2. Além disso, também é relatada uma forma de ~60 kDa, representando outra forma processada ou menos glicosilada. VNUT murino é uma proteína vesicular de 11 transmembranas (a.a. 40-60, 74-94, 103-123, 129-149, 169-189, 192-212, 252-272, 287-307, 327-347, 380-400, 413-433), possuindo uma extremidade N-terminal extracelular/vacuolar (a.a. 1-39) e uma cauda C-terminal citoplasmática (a.a. 434-447) com 5 alças citoplasmáticas e 5 alças extracelulares/vacuolares entre elas.

Especificidade

Este anti-soro policlonal de cobaia detectou as bandas alvo VNUT de ~75 kDa, ~60 kDa e ~50 kDa (isoformas X1/X2 VNUT) em homogeneizados retinais e corticais murinos. O bloqueio do peptídeo imunogênico aboliu a detecção das bandas alvo.

Imunogênio

Epítopo: Segunda alça extracelular.
Peptídeo linear conjugado com KLH correspondente a uma sequência da segunda alça extracelular do transportador de nucleotídeos vesiculares de camundongo (VNUT).

Aplicação

Análise por imunofluorescência: Uma diluição de 1:1000 de um lote representativo de células amácrinas/interplexiformes (IPC) imunocoradas por coloração imuno-histoquímica fluorescente de criosseções verticais de retina de camundongo e rato fixadas em paraformaldeído a 4% e incorporadas em OCT, bem como de retinas planas de camundongos e ratos (Cortesia da Dra. Erica Fletcher, Universidade de Melbourne, Austrália).
Análise de Western Blot: Uma diluição de 1:500 de um lote representativo detectou VNUT recombinante purificado de comprimento total, bem como VNUT endógeno em extrato de retina de camundongo (Cortesia da Dra. Erica Fletcher, Universidade de Melbourne, Austrália).
Análise por imunofluorescência: Uma diluição de 1:1000 de um lote representativo de neurônios positivos para VNUT imunocorados na substância negra (SN) por coloração imuno-histoquímica fluorescente de criosecções cerebrais de camundongos flutuantes e fixadas em paraformaldeído a 4% (Cortesia da Dra. Erica Fletcher, Universidade de Melbourne , Austrália).
Análise por imunofluorescência: Um lote representativo imunocorado positivo para tirosina hidroxilase/TH de célula amácrina/interplexiforme (IPC) na camada nuclear interna (INL) por coloração imuno-histoquímica fluorescente de criosecções verticais de retina de camundongo e rato fixadas em paraformaldeído a 4%, incorporadas em OCT, bem como retinas planas de camundongos (Ho, T., et al. (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).
Análise por imunofluorescência: Um lote representativo de neurônios dopaminérgicos positivos para tirosina hidroxilase/TH na SN (substantia nigra, substância nigra) e VTA (ventral tegmental area, área ventral) por coloração imuno-histoquímica fluorescente de criossecções cerebrais de camundongos flutuantes e fixadas em paraformaldeído a 4% (Ho, T., e outros (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).
Análise por Western Blotting: Um lote representativo detectou as isoformas VNUT de ~75 kDa e ~50 kDa X1/X2 em homogeneizados retinais e corticais murinos, enquanto nenhuma expressão de VUNT foi detectada em homogenato de rim. O bloqueio do peptídeo imunogênico aboliu a detecção de bandas alvo (Ho, T., et al. (2015). Front. Cell. Neurosci. In Press).
Categoria de pesquisa
Neurociência
Este anticorpo anti-transportador de nucleotídeo vesicular (VNUT) é validado para uso em WB, IF para a detecção de VNUT (Vesicular Nucleotide Transporter, transportador de nucleotídeo vesicular).
Subcategoria de pesquisa
Neurociência do desenvolvimento

Qualidade

Avaliado por western blot em lisado de tecido cerebral de camundongo.

Análise de western blot: Uma diluição de 1:500 deste anticorpo detectou o transportador de nucleotídeos vesiculares (VNUT) em 10 µg de lisado de tecido cerebral de camundongo.

Descrição-alvo

~75/60/50 kDa observado. O tamanho da banda alvo parece maior do que o peso molecular calculado de 48,48 kDa devido à glicosilação. Bandas não caracterizadas podem aparecer em alguns lisados.

forma física

Não purificado
Soro policlonal de cobaia com 0,05% de azida sódica.

Armazenamento e estabilidade

Estável por 1 ano a -20 °C a partir da data de recebimento.
Recomendações de manuseio: Após o recebimento e antes de remover a tampa, centrifugue o frasco e misture delicadamente a solução. Separe as alíquotas em tubos de microcentrífuga e armazene a -20 °C. Evite ciclos repetidos de congelamento/descongelamento, pois podem danificar a IgG e afetar o desempenho do produto.

Outras notas

Concentração: consulte a ficha de informações específica do lote.

Exoneração de responsabilidade

Exceto quando indicado em contrário no nosso catálogo ou em outros documentos da empresa que acompanham o(s) produto(s), os nossos produtos destinam-se somente para uso em pesquisa e não devem ser usados para qualquer outra finalidade, o que inclui, dentre outros, usos comerciais não autorizados, usos para diagnóstico in vitro, usos terapêuticos ex vivo ou in vivo, ou qualquer tipo de consumo ou aplicação em humanos ou animais.

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Código de classe de armazenamento

10 - Combustible liquids

Classe de risco de água (WGK)

WGK 1


Certificados de análise (COA)

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