Sequenciamento

A capacidade de determinar a composição e a ordem dos ácidos nucleicos em uma fita de DNA ou RNA tem implicações fundamentais no entendimento da genética moderna e em diversas áreas que são essenciais para a pesquisa de doenças e para um maior entendimento de todos os organismos. Além da capacidade de sequenciar ácidos nucleicos ser útil para decifrar o código genético de um organismo, ela também fornece uma ferramenta poderosa aos pesquisadores que, quando combinada com outras tecnologias moleculares, permite manipular sequencias de DNA facilmente e verificar tais alterações através do sequenciamento. Como o DNA codificante funciona como a fonte de informação codificada para proteínas, agora é possível para pesquisadores criarem proteínas recombinantes feitas sob medida, que contêm uma grande variedade de elementos funcionais e que podem ser amplamente utilizadas para responder a um número igualmente amplo de questionamentos científicos importantes. Para mais reagentes e guias de sequenciamento completo do genoma, visite o recurso de Sequenciamento de próxima geração.

Sequenciamento de Sanger

No início, os métodos de química analítica eram capazes de determinar a composição de ácidos nucleicos. No entanto, Fred Sanger e colaboradores desenvolveram métodos (que inicialmente utilizavam fragmentos digeridos marcados com radioisótopos e fracionamento bidimensional) para fornecer algumas das primeiras sequências nucleares completas. Os avanços na área continuaram por várias décadas, com cada novo avanço contribuindo para uma biblioteca de proteínas e genomas sequenciados cada vez maior. Esses avanços incluem a separação de nucleotídeos por comprimento usando eletroforese em gel seguida da eletroforese capilar. Além disso, a técnica moderna de sequenciamento de Sanger é definida pela incorporação de nucleotídeos com marcação fluorescente e análise computacional automatizada de cada fragmento de ácido nucleico.