RNAINH-RO
Roche
Inhibiteur de RNases Protector
Synonyme(s) :
inhibiteur de rnases, protector
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About This Item
Code UNSPSC :
41181611
Nomenclature NACRES :
NA.21
Produits recommandés
Pureté
>95% (SDS-PAGE)
Niveau de qualité
Poids mol.
~50 kDa
Conditionnement
pkg of 10,000 U (03335402001 [5 x 2,000 U])
pkg of 2,000 U (03335399001)
Fabricant/nom de marque
Roche
Paramètres
25-55 °C optimum reaction temp.
Plage de pH
5.0-9.0
Température de stockage
−20°C
Description générale
Contenu
Inhibiteur de RNases Protector (40 U/μl) dans du tampon de conservation : HEPES-KOH 20 mM, KCl 50 mM, dithiothréitol 8 mM, glycérol 50 % (v/v), pH environ 7,6 (à +4 °C).
Inhibiteur de RNases Protector (40 U/μl) dans du tampon de conservation : HEPES-KOH 20 mM, KCl 50 mM, dithiothréitol 8 mM, glycérol 50 % (v/v), pH environ 7,6 (à +4 °C).
L'inhibiteur de RNases Protector inactive un large spectre de RNases, dont :
- la RNase A
- la RNase B
- la RNase T2
- protéger l'ARNm pendant les réactions de synthèse d'ADNc, de RT-PCR (sur systèmes de qPCR et thermocycleurs classiques) ou de transcription/traduction in vitro
- protéger l'ARN viral lors de la réplication de virus in vitro
- inhiber les RNases pendant l'isolement et la purification de l'ARN
- être utilisé dans des essais de protection à la RNase
- faciliter la préparation d'anticorps exempts de RNases
Spécificité
L'Inhibiteur de RNases Protector n'inhibe absolument pas la RNase T1 et la RNase 1.
L'Inhibiteur de RNases Protector (20 U/20 μl de réaction) inhibe la RNase A jusqu'à 1 ng, la RNase B jusqu'à 160 pg et la RNase T2 jusqu'à 0,03 U/μl de volume réactionnel.
La RNase H n'est pas inhibée par l'Inhibiteur de RNases Protector.
Inactivation par la chaleur : > 65 °C
L'Inhibiteur de RNases Protector (20 U/20 μl de réaction) inhibe la RNase A jusqu'à 1 ng, la RNase B jusqu'à 160 pg et la RNase T2 jusqu'à 0,03 U/μl de volume réactionnel.
La RNase H n'est pas inhibée par l'Inhibiteur de RNases Protector.
Inactivation par la chaleur : > 65 °C
Application
L'inhibiteur de RNase Protector peut être utilisé dans les applications suivantes :
- protection de l'ARNm dans les réactions de synthèse d'ADNc, de RT-PCR (sur systèmes de qPCR et thermocycleurs classiques), par exemple avec les appareils LightCycler®, dans les réactions de transcription/traduction in vitro, les essais de protection à la RNase, les réactions de synthèse d'ARN in vitro
- protection de l'ARN viral lors de la réplication de virus in vitro
- inhibition des RNases pendant l'isolement et la purification de l'ARN
- aide à la préparation d'anticorps exempts de RNases
- synthèse de sondes d'ARN pour hybridation in situ
Caractéristiques et avantages
- Reposez-vous sur un inhibiteur de RNases thermostable : l'Inhibiteur de RNases Protector reste stable même lors de l'utilisation de transcriptases inverses thermostables telles que la transcriptase inverse Transcriptor.
- Profitez d'une large gamme de conditions réactionnelles : l'Inhibiteur de RNases Protector est actif de pH 5,0 à pH 9,0 et aux températures comprises entre +25 °C et +55 °C(une activité partielle peut encore être mesurée à +60 °C).
- Éliminez les interférences dans différentes applications d'analyse de l'ARN : les performances sont maintenues même après ajout d'un niveau 16 fois supérieur à la concentration standard.
- Insistez sur la grande pureté de la préparation : la fonction de chaque lot est testée avec des techniques du type RT-PCR afin de confirmer l'absence d'endonucléases, de ribonucléases ou d'activité de coupure, conformément aux procédures de contrôle qualité actuellement en vigueur.
Qualité
La fonction de chaque lot d'Inhibiteur de RNases Protector est testée à l'aide du Kit Titan pour RT-PCR en un tube et du Kit DPD LightCycler. Les activités liées aux contaminations de l'Inhibiteur de RNases Protector sont également testées comme indiqué ci-dessous.
Tampon de test : Tris/HCl 50 mM, MgCl2 10 mM, EDTA 0,1 mM, β-mercaptoéthanol 7 mM, pH 7,5 (+37 °C).
Absence d'endonucléases : 1 μg de fragments Hind III/EcoR I* d'ADNλ est incubé avec l'Inhibiteur de RNases Protector dans 50 μl de tampon de test à +37 °C pendant 1 heure. La quantité d'inhibiteur ne provoquant aucune altération dans la disposition des bandes est indiquée dans la section "Endo.".
Absence d'activité de coupure : 1 μg d'ADN pBR322 superenroulé est incubé avec l'Inhibiteur de RNases Protector dans 50 μl de tampon de test à +37 °C pendant 1 heure. La quantité d'inhibiteur ne provoquant aucune altération de l'ADN superenroulé est indiquée dans la section "Act. de coupure".
Absence de ribonucléase (1) : 5 μg d'ARN MS2 sont incubés avec de l'Inhibiteur de RNases Protector pendant 1 heure à +37 °C dans un volume final de 50 μl. La quantité d'inhibiteur ne provoquant aucune dégradation de l'ARN MS2 est indiquée dans la section "RNase 1".
Absence de ribonucléase (2) : 5 μg d'ARN MS2 sont incubés avec de l'Inhibiteur de RNases Protector pendant 1 heure à +37 °C, puis pendant 10 minutes à +65 °C dans un volume final de 50 μl. La quantité d'inhibiteur ne provoquant aucune dégradation de l'ARN MS2 est indiquée dans la section "RNase 2".
Tampon de test : Tris/HCl 50 mM, MgCl2 10 mM, EDTA 0,1 mM, β-mercaptoéthanol 7 mM, pH 7,5 (+37 °C).
Absence d'endonucléases : 1 μg de fragments Hind III/EcoR I* d'ADNλ est incubé avec l'Inhibiteur de RNases Protector dans 50 μl de tampon de test à +37 °C pendant 1 heure. La quantité d'inhibiteur ne provoquant aucune altération dans la disposition des bandes est indiquée dans la section "Endo.".
Absence d'activité de coupure : 1 μg d'ADN pBR322 superenroulé est incubé avec l'Inhibiteur de RNases Protector dans 50 μl de tampon de test à +37 °C pendant 1 heure. La quantité d'inhibiteur ne provoquant aucune altération de l'ADN superenroulé est indiquée dans la section "Act. de coupure".
Absence de ribonucléase (1) : 5 μg d'ARN MS2 sont incubés avec de l'Inhibiteur de RNases Protector pendant 1 heure à +37 °C dans un volume final de 50 μl. La quantité d'inhibiteur ne provoquant aucune dégradation de l'ARN MS2 est indiquée dans la section "RNase 1".
Absence de ribonucléase (2) : 5 μg d'ARN MS2 sont incubés avec de l'Inhibiteur de RNases Protector pendant 1 heure à +37 °C, puis pendant 10 minutes à +65 °C dans un volume final de 50 μl. La quantité d'inhibiteur ne provoquant aucune dégradation de l'ARN MS2 est indiquée dans la section "RNase 2".
Définition de l'unité
Une unité d'Inhibiteur de RNases Protector est définie comme la quantité de protéine nécessaire pour inhiber 50 % de l'activité de 5 ng de RNase A.
Unité du test : L'activité est mesurée selon Blackburn comme la capacité à inhiber l'hydrolyse de la cytidine-2′ cyclique : l'acide 3′-monophosphorique. Dans les conditions d'essai, 200 U d'Inhibiteur de RNases Protector inhibent 50 % de l'activité de 1 μg de RNase A.
Activité volumique : 40 U/μl
Unité du test : L'activité est mesurée selon Blackburn comme la capacité à inhiber l'hydrolyse de la cytidine-2′ cyclique : l'acide 3′-monophosphorique. Dans les conditions d'essai, 200 U d'Inhibiteur de RNases Protector inhibent 50 % de l'activité de 1 μg de RNase A.
Activité volumique : 40 U/μl
Notes préparatoires
Concentration de travail :
- 5 à 10 U pour la RT-PCR en une étape
- 25 à 50 U pour la RT-PCR en deux étapes
- 20 U pour la transcription in vitro
Autres remarques
Spécifications du produit :
Source : poumon de rat ; le produit est fabriqué sous forme recombinante dans E. coli
Point isoélectrique : pH 4,5
Plage d'activité de l'Inhibiteur de RNases Protector : de 25 °C à +55°C ; une activité partielle peut encore être mesurée à +60 °C
Inactivation : L'inhibiteur est inactivé dans des conditions de dénaturation extrêmes (températures supérieures à + 65°C)
Biocharge : <50 UFC/ml
Teneur en ADN : <100 pg/mg
Source : poumon de rat ; le produit est fabriqué sous forme recombinante dans E. coli
Point isoélectrique : pH 4,5
Plage d'activité de l'Inhibiteur de RNases Protector : de 25 °C à +55°C ; une activité partielle peut encore être mesurée à +60 °C
Inactivation : L'inhibiteur est inactivé dans des conditions de dénaturation extrêmes (températures supérieures à + 65°C)
Biocharge : <50 UFC/ml
Teneur en ADN : <100 pg/mg
Produit destiné uniquement à la recherche en sciences de la vie. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.
Informations légales
AVIS À L'ACHETEUR : EXCLUSION DE LICENCE
Ce produit a été optimisé pour une utilisation en PCR (amplification en chaîne par polymérase) selon les brevets détenus par F. Hoffmann-La Roche Ltd ("Roche"). L'achat de ce produit ne transfère expressément ou implicitement à l'acheteur aucune licence en vertu de ces brevets pour l'utilisation du procédé de PCR. Une licence d'utilisation du procédé de PCR pour certaines activités de recherche et développement est associée à l'achat de certains réactifs fournis par Roche, Applied Biosystems ou d'autres fournisseurs sous licence lorsque ces réactifs sont utilisés conjointement avec un thermocycleur agréé. La licence peut également être obtenue auprès d'Applied Biosystems. Les utilisations diagnostiques nécessitent l'octroi d'une licence par Roche. Pour de plus amples informations sur les licences d'achat, contactez le Director of Licensing d'Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, États-Unis.
Ce produit a été optimisé pour une utilisation en PCR (amplification en chaîne par polymérase) selon les brevets détenus par F. Hoffmann-La Roche Ltd ("Roche"). L'achat de ce produit ne transfère expressément ou implicitement à l'acheteur aucune licence en vertu de ces brevets pour l'utilisation du procédé de PCR. Une licence d'utilisation du procédé de PCR pour certaines activités de recherche et développement est associée à l'achat de certains réactifs fournis par Roche, Applied Biosystems ou d'autres fournisseurs sous licence lorsque ces réactifs sont utilisés conjointement avec un thermocycleur agréé. La licence peut également être obtenue auprès d'Applied Biosystems. Les utilisations diagnostiques nécessitent l'octroi d'une licence par Roche. Pour de plus amples informations sur les licences d'achat, contactez le Director of Licensing d'Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, États-Unis.
LightCycler is a registered trademark of Roche
Code de la classe de stockage
12 - Non Combustible Liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
Point d'éclair (°F)
does not flash
Point d'éclair (°C)
does not flash
Certificats d'analyse (COA)
Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".
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