PRON-RO
Roche
Pronase
from Streptomyces griseus
Synonyme(s) :
Protéase non spécifique
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About This Item
Produits recommandés
Source biologique
Streptomyces griseus
Niveau de qualité
Stérilité
non-sterile
Forme
lyophilized powder
Conditionnement
pkg of 1 g (10165921001)
pkg of 5 g (11459643001)
Fabricant/nom de marque
Roche
Concentration
0.5-2 mg/mL
Paramètres
35-40 °C optimum reaction temp.
Technique(s)
DNA extraction: suitable
Couleur
white
pH optimal
7.0-8.0
Plage de pH
6.0-9.0
Solubilité
water: soluble 10-20 g/L
Adéquation
suitable for molecular biology
Numéro d'accès NCBI
Application(s)
life science and biopharma
Activité étrangère
Deoxyribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.)
Ribonuclease <0.002 U/mg ( based on lyoph.)
Température de stockage
2-8°C
Informations sur le gène
Streptomyces griseus ... SGR_RS27460(6214424)
Description générale
at 40°C with casein as the substrate, pH 7.5, equivalent to approximately 1270 PU/mg or approximately 25 PUK/mg.
Spécificité
La pronase présente une large gamme de spécificité et dégrade pratiquement toutes les protéines en acides aminés individuels ; elle résout les acides carboxyliques et les alcools.
Application
Utilisez la pronase pour l′hydrolyse totale des protéines dans les applications de recherche. La pronase est utilisée pour la dégradation des protéines lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN, notamment dans l′extraction d′ADN de phage ou l′isolement de plasmides. Il n′est pas nécessaire de prévoir une autodigestion préalable de la pronase avant l′utilisation. Elle a également été utilisée en association à la collagénase et la trypsine pour dissocier les tissus dans l′histochimie et la culture cellulaire et pour produire des glycopeptides à partir de glycoprotéines purifiées. Elle a été employée pour la dégradation du chorion d′embryons de poisson-zèbre.
Actions biochimiques/physiologiques
La pronase présente une large spécificité. On l'utilise donc fréquemment lorsque l'on recherche une dégradation importante voire complète des protéines. Ses applications couvrent notamment l'analyse des protéines dans les organites cellulaires, l'élimination des protéines durant l'isolement de l'ADN et de l'ARN, et la production d'hydrolysats de protéines en vue de l'analyse d'acides aminés. Par ailleurs, la pronase a une plus grande capacité de dispersion des lignées de cellules fibroblastiques que la trypsine et excelle aussi bien dans le détachement de monocouches de cellules que dans la création de suspensions unicellulaires.
Définition de l'unité
Une unité d′activité de protéase non spécifique augmente le taux de libération des acides aminés positifs au réactif de Folin et des peptides de la caséine à +40 °C et pH 7,5. Pour une unité « U », 1 μmol/min de tyrosine est libérée, et pour l′unité « PU », cela correspond à 1 μg/minute (1 U = 181 PU) ; pour l′unité « PUK », cela correspond à 0,1/minute (mesuré comme changement d′absorbance du bleu de molybdène, formé par la réaction avec le réactif de Folin dans des conditions menant à une équivalence 1 PUK = 50 PU).
Notes préparatoires
Stabilisants : Effet protecteur des ions de calcium
La préparation contient 20 % d′acétate de calcium comme stabilisant. Cette préparation ne contient pas d′amidon, conformément aux procédures de contrôle qualité actuellement en vigueur. L′activité d′une solution diluée contenant 0,01-0,1 M de calcium s′est avérée stable pendant 24 heures à un pH neutre et entre 4 et 8 °C. La pronase est également protégée de l′inactivation à la chaleur par de faibles niveaux de calcium.
Concentration de travail : 0,5 à 2 mg/ml
Solution de travail : Le solvant recommandé est l′eau distillée.
La solution mère est préparée en ajoutant la poudre de pronase à de l′eau distillée (10 à 20 mg/ml).
Conditions de stockage (solution de travail) : -15 à -25 °C
La préparation contient 20 % d′acétate de calcium comme stabilisant. Cette préparation ne contient pas d′amidon, conformément aux procédures de contrôle qualité actuellement en vigueur. L′activité d′une solution diluée contenant 0,01-0,1 M de calcium s′est avérée stable pendant 24 heures à un pH neutre et entre 4 et 8 °C. La pronase est également protégée de l′inactivation à la chaleur par de faibles niveaux de calcium.
Concentration de travail : 0,5 à 2 mg/ml
Solution de travail : Le solvant recommandé est l′eau distillée.
La solution mère est préparée en ajoutant la poudre de pronase à de l′eau distillée (10 à 20 mg/ml).
Conditions de stockage (solution de travail) : -15 à -25 °C
Reconstitution
Le lyophilisat est soluble dans l′eau désionisée (10 à 20 mg/ml).
Stockage et stabilité
À conserver au sec.
Autres remarques
Pour la recherche en sciences de la vie uniquement. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.
Mention d'avertissement
Danger
Mentions de danger
Conseils de prudence
Classification des risques
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organes cibles
Respiratory system
Code de la classe de stockage
11 - Combustible Solids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
Point d'éclair (°F)
does not flash
Point d'éclair (°C)
does not flash
Certificats d'analyse (COA)
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