SCM146
Milieu photostable BrightCell NEUMO
Live cell imaging neuronal cell culture media, 500ml
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About This Item
Code UNSPSC :
12352207
eCl@ss :
32160801
Produits recommandés
Forme
liquid
Technique(s)
cell culture | stem cell: suitable
Conditions d'expédition
ambient
Description générale
BrightCell NEUMO est un milieu photostable spécifiquement développé pour la culture des cellules neuronales et pouvant remplacer le milieu Neurobasal pour l'imagerie de cellules vivantes. L'utilisation de NEUMO additionné de SOS pour les longues périodes d'exposition à la lumière bleue accroît significativement la viabilité des cellules et l'intensité du signal fluorescent.
Protocole
Certains des composés phototoxiques présents dans les milieux standard (mais retirés des milieux MEMO/NEUMO) contribuent à la prolifération cellulaire. De ce fait, les milieux MEMO/NEUMO ne doivent être utilisés que durant la phase de l'expérience où les cellules sont exposées à de longues périodes de lumière. Le supplément SOS, en revanche, supporte autant la viabilité et la prolifération cellulaire que les autres suppléments (phototoxiques), il est donc conseillé de l'utiliser en continu durant la maintenance des cellules.
Le SOS doit être employé pour remplacer les suppléments neuronaux, tels que le B-27, si vous en mettez actuellement dans vos milieux. Si vous employez à l'heure actuelle du FBS, ceci peut être nocif pour les cellules soumises à une lumière intense. Remplacer le FBS par du SOS peut contribuer à favoriser la croissance des cellules, tout particulièrement s'il est associé à des facteurs de croissance spécifiques de la lignée cellulaire employée.
Préparation du milieu
1. Décongeler le SOS à 37 °C. Le SOS est fourni sous forme d'un concentré 25X ; il doit être ajouté au MEMO/NEUMO à une concentration finale de 4 %. Le liquide restant doit être divisé en aliquotes de travail et stocké à -20 °C.
Remarque : Éviter de congeler-décongeler le SOS plus de deux fois.
2. Ajouter les autres composants en conditions aseptiques conformément au Tableau 1 du mode d'emploi.
3. Une fois supplémenté, le milieu complet est stable pendant 2 semaines à 4 °C.
Culture cellulaire
1. Commencer par multiplier/maintenir les cellules dans l'obscurité dans du milieu Neurobasal supplémenté en SOS.
2. Le soir précédent l'exposition à de longues périodes de lumière, remplacer le mélange Neurobasal/SOS par du MEMO/NEUMO et du SOS préchauffés. Les cellules conserveront leur viabilité jusqu'à 3 jours si nécessaire.
a.Diviser en aliquotes le milieu à préchauffer, car le chauffage et refroidissement répétés des flacons de milieu peut provoquer une précipitation.
3. Réaliser l'expérience nécessitant une exposition à la lumière.
4. Une fois l'exposition à la lumière terminée, retirer le MEMO/NEUMO et le SOS et les remplacer par un mélange Neurobasal/SOS.
BrightCell est une marque de Merck KGaA, Darmstadt, Allemagne.
MEMO, NEUMO et SOS sont des marques déposées de Cell Guidance Systems LLC.
Neurobasal et B-27 sont des marques déposées de Life Technologies.
Protocole
Certains des composés phototoxiques présents dans les milieux standard (mais retirés des milieux MEMO/NEUMO) contribuent à la prolifération cellulaire. De ce fait, les milieux MEMO/NEUMO ne doivent être utilisés que durant la phase de l'expérience où les cellules sont exposées à de longues périodes de lumière. Le supplément SOS, en revanche, supporte autant la viabilité et la prolifération cellulaire que les autres suppléments (phototoxiques), il est donc conseillé de l'utiliser en continu durant la maintenance des cellules.
Le SOS doit être employé pour remplacer les suppléments neuronaux, tels que le B-27, si vous en mettez actuellement dans vos milieux. Si vous employez à l'heure actuelle du FBS, ceci peut être nocif pour les cellules soumises à une lumière intense. Remplacer le FBS par du SOS peut contribuer à favoriser la croissance des cellules, tout particulièrement s'il est associé à des facteurs de croissance spécifiques de la lignée cellulaire employée.
Préparation du milieu
1. Décongeler le SOS à 37 °C. Le SOS est fourni sous forme d'un concentré 25X ; il doit être ajouté au MEMO/NEUMO à une concentration finale de 4 %. Le liquide restant doit être divisé en aliquotes de travail et stocké à -20 °C.
Remarque : Éviter de congeler-décongeler le SOS plus de deux fois.
2. Ajouter les autres composants en conditions aseptiques conformément au Tableau 1 du mode d'emploi.
3. Une fois supplémenté, le milieu complet est stable pendant 2 semaines à 4 °C.
Culture cellulaire
1. Commencer par multiplier/maintenir les cellules dans l'obscurité dans du milieu Neurobasal supplémenté en SOS.
2. Le soir précédent l'exposition à de longues périodes de lumière, remplacer le mélange Neurobasal/SOS par du MEMO/NEUMO et du SOS préchauffés. Les cellules conserveront leur viabilité jusqu'à 3 jours si nécessaire.
a.Diviser en aliquotes le milieu à préchauffer, car le chauffage et refroidissement répétés des flacons de milieu peut provoquer une précipitation.
3. Réaliser l'expérience nécessitant une exposition à la lumière.
4. Une fois l'exposition à la lumière terminée, retirer le MEMO/NEUMO et le SOS et les remplacer par un mélange Neurobasal/SOS.
BrightCell est une marque de Merck KGaA, Darmstadt, Allemagne.
MEMO, NEUMO et SOS sont des marques déposées de Cell Guidance Systems LLC.
Neurobasal et B-27 sont des marques déposées de Life Technologies.
Les expériences sur les cellules vivantes en culture, notamment celles impliquant de la microscopie en fluorescence, de l'optogénétique ou du tri de cellules par fluorescence (FACS) nécessitent souvent des expositions prolongées ou de forts niveaux de lumière bleue. Cependant, les milieux et les suppléments de culture cellulaire contiennent des éléments qui se transforment en radicaux libres toxiques sous l'effet de la lumière. Ainsi, le DMEM (milieu d'Eagle modifié par Dulbecco) et le milieu Neurobasal, de même que certains suppléments pour culture cellulaire tels que le B-27, le SATO et le NS21, peuvent perturber de manière significative le comportement des cellules et augmenter nettement la mort cellulaire. Ce phénomène a récemment été mis en lumière dans la publication suivante de Nature :
Surpassing light-induced cell damage in vitro with novel cell culture media. Nature Scientific Reports (En savoir plus !)
Le système photostable BrightCell contient des milieux de culture cellulaire et des suppléments qui ont été reformulés en retirant ou en remplaçant spécifiquement les constituants phototoxiques. Ces produits permettent d'exposer de façon prolongée les cellules à de la lumière bleue tout en maintenant de hauts niveaux de viabilité et de fonctionnalité cellulaires. De surcroît, les produits BrightCell présentent un très faible niveau d'auto-fluorescence et de photo-instabilité, ce qui améliore considérablement la qualité des données obtenues lors de l'imagerie de cellules vivantes en fluorescence.
Surpassing light-induced cell damage in vitro with novel cell culture media. Nature Scientific Reports (En savoir plus !)
Le système photostable BrightCell contient des milieux de culture cellulaire et des suppléments qui ont été reformulés en retirant ou en remplaçant spécifiquement les constituants phototoxiques. Ces produits permettent d'exposer de façon prolongée les cellules à de la lumière bleue tout en maintenant de hauts niveaux de viabilité et de fonctionnalité cellulaires. De surcroît, les produits BrightCell présentent un très faible niveau d'auto-fluorescence et de photo-instabilité, ce qui améliore considérablement la qualité des données obtenues lors de l'imagerie de cellules vivantes en fluorescence.
Application
Domaine de recherche
Culture cellulaire
Culture cellulaire
Milieu de culture pour cellules neuronales destiné à l'imagerie de cellules vivantes, 500 ml
Composants
1) Un flacon contenant 500 ml de milieu photostable NEUMO (SCM146-1). Stocker entre 2 et 8 °C.
2) Un flacon contenant 5 ml de supplément A (SCM149). Stocker à -20 °C.
2) Un flacon contenant 5 ml de supplément A (SCM149). Stocker à -20 °C.
Qualité
pH : 7,0-7,6
Osmolalité : 190-230 mOsm/kg de H2O
Stérilité : Négatif
Test fonctionnel : Conforme
Osmolalité : 190-230 mOsm/kg de H2O
Stérilité : Négatif
Test fonctionnel : Conforme
Stockage et stabilité
Les milieux MEMO/NEUMO doivent être conservés entre 2 et 8 °C pendant 1 an maximum. Le supplément SOS et le supplément A doivent être conservés à -20 °C pendant 1 an maximum à partir de la date de fabrication. Éviter les congélations/décongélations répétées.
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Mention d'avertissement
Warning
Mentions de danger
Conseils de prudence
Classification des risques
Skin Sens. 1
Code de la classe de stockage
12 - Non Combustible Liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
Point d'éclair (°F)
Not applicable
Point d'éclair (°C)
Not applicable
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Articles
Live cell imaging media and neuronal supplements for fluorescence microscopy using GFP, optogenetics and FACS analysis.
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