MABT366
Anticorps anti-claudine-1/CLDN1, clone 7A5
clone 7A5, from mouse
Synonyme(s) :
Claudin-1, Senescence-associated epithelial membrane protein
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About This Item
Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41
Produits recommandés
Source biologique
mouse
Niveau de qualité
Forme d'anticorps
purified immunoglobulin
Type de produit anticorps
primary antibodies
Clone
7A5, monoclonal
Espèces réactives
human
Ne doit pas réagir avec
mouse
Technique(s)
flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
western blot: suitable
Isotype
IgG1κ
Numéro d'accès NCBI
Numéro d'accès UniProt
Conditions d'expédition
dry ice
Modification post-traductionnelle de la cible
unmodified
Informations sur le gène
human ... CLDN1(9076) , NISCH(11188)
Description générale
La claudine-1 (UniProt O95832 ; également appelée protéine de membrane épithéliale associée à la sénescence) est codée par le gène CLDN1 (également appelé CLD1, ILVASC, NISCH, SEMP1) (ORF UNQ481/PRO944 ; ID du gène : 9076) chez l'être humain. Les jonctions serrées sont des barrières membranaires très spécialisées qui bloquent le passage des petites molécules, des micro-organismes et des cellules à travers l'espace paracellulaire, et forment également une barrière physique entre le domaine membranaire apical et le domaine membranaire basolatéral d'une cellule épithéliale polarisée. Les claudines sont des protéines de jonctions serrées dont la fonction principale est de réguler le passage des ions à travers l'espace paracellulaire. Il existe au moins 27 claudines humaines avec des profils d'expression épithéliale différentielle, permettant le transport paracellulaire d'ions spécifiques au tissu. La claudine-1 est exprimée sur les surfaces apicale et basolatérale des hépatocytes dans des tissus hépatiques normaux. La claudine-1 est un facteur endogène connu de l'entrée du virus de l'hépatite C (VHC) par l'interaction avec CD81 et de la transmission cellule-cellule du VHC. La claudine-1 est une protéine à quatre domaines transmembranaires (a.a. 8-28, 82-102, 116-136, 164-184), dont les extrémités N-terminale et C-terminale sont exposées du côté cytoplasmique (a.a. 1-7 et 185-211).
Spécificité
Le clone 7A5 reconnaît spécifiquement la claudine-1/CLDN1 en ciblant un épitope dans la deuxième boucle extracellulaire et a empêché l'entrée du virus de l'hépatite C (VHC) dépendant de claudine-1 dans les cellules hôtes. Le clone 7A5 ne réagit pas avec les claudines-2, -4, -5, -6, -7, ou -9 humaines, ni avec la claudine-1 de souris (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Immunogène
Claudine-1/CLDN1 humaine recombinante.
Épitope : Deuxième boucle extracellulaire.
Application
Analyse par cytométrie en flux : 5,0 µg/ml d'un lot représentatif a permis d'immunomarquer des cellules HT1080 exprimant la claudine-1/CLDN1 humaine transfectée de manière exogène et des cellules d'hépatome humain Huh-7.5.1, mais pas des cellules HT1080 ayant subi une transfection simulée ni des cellules S7-d6 n'exprimant pas la claudine-1 (avec la permission du Professeur Masuo Kondoh, PhD, Université d'Osaka, Japon).
Analyse par western blotting : 0,5 µg/ml d'un lot représentatif a permis de détecter la claudine-1 exprimée de manière exogène dans des cellules HT1080 transfectées par CLDN1, mais pas dans des cellules HT1080 ayant subi une transfection simulée (avec la permission du Professeur Masuo Kondoh, PhD, Université d'Osaka, Japon).
Analyse par Immunocytochimie : un lot représentatif a permis d'immunomarquer la surface de cellules d'hépatome humain Huh-7.5.1, mais pas les cellules S7-A n'exprimant pas claudine-1/CLDN1 (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Analyse par cytométrie en flux : un lot représentatif a permis d'immunomarquer spécifiquement des cellules HT1080 exprimant la claudine-1 (CLDN1) humaine transfectée de manière exogène, mais pas les cellules HT1080 exprimant les claudines-2, -4, -5, -6, -7, ou -9, ni les cellules L exprimant la claudine-1 de souris (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Analyse par cytométrie en flux : un lot représentatif a permis d'immunomarquer des transfectants HEK293T exprimant la claudine-1/CLDN1 humaine avec une étiquette FLAG et des chimères de la claudine-1 humaine et de souris avec la deuxième boucle extracellulaire humaine (EL2), mais pas les chimères avec l'EL2 de souris. La mutation M152L, mais pas V155I, dans l'EL2 humaine a supprimé l'immunoréactivité (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Analyse par western blotting : un lot représentatif a détecté la claudine-1/CLDN1 humaine avec une étiquette FLAG et des chimères de la claudine-1 humaine et de souris avec la deuxième boucle extracellulaire humaine (EL2), mais pas les chimères avec l'EL2 de souris. La mutation M152L, mais pas V155I, dans la deuxième boucle extracellulaire humaine a supprimé l'immunoréactivité (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Analyse par ELISA : un lot représentatif a détecté l'immunoréactivité à la claudine-1/CLDN1 des cellules d'hépatome humain Huh-7.5.1 fixées au formaldéhyde à 3,7 % par "ELISA cellulaire" (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Analyse de neutralisation : un lot représentatif a inhibé l'infection par le VHC de cellules d'hépatome humain Huh-7.5.1 en culture in vitro et de souris chimériques dont le foie est composé d'hépatocytes humains in vivo (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Analyse par western blotting : 0,5 µg/ml d'un lot représentatif a permis de détecter la claudine-1 exprimée de manière exogène dans des cellules HT1080 transfectées par CLDN1, mais pas dans des cellules HT1080 ayant subi une transfection simulée (avec la permission du Professeur Masuo Kondoh, PhD, Université d'Osaka, Japon).
Analyse par Immunocytochimie : un lot représentatif a permis d'immunomarquer la surface de cellules d'hépatome humain Huh-7.5.1, mais pas les cellules S7-A n'exprimant pas claudine-1/CLDN1 (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Analyse par cytométrie en flux : un lot représentatif a permis d'immunomarquer spécifiquement des cellules HT1080 exprimant la claudine-1 (CLDN1) humaine transfectée de manière exogène, mais pas les cellules HT1080 exprimant les claudines-2, -4, -5, -6, -7, ou -9, ni les cellules L exprimant la claudine-1 de souris (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Analyse par cytométrie en flux : un lot représentatif a permis d'immunomarquer des transfectants HEK293T exprimant la claudine-1/CLDN1 humaine avec une étiquette FLAG et des chimères de la claudine-1 humaine et de souris avec la deuxième boucle extracellulaire humaine (EL2), mais pas les chimères avec l'EL2 de souris. La mutation M152L, mais pas V155I, dans l'EL2 humaine a supprimé l'immunoréactivité (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Analyse par western blotting : un lot représentatif a détecté la claudine-1/CLDN1 humaine avec une étiquette FLAG et des chimères de la claudine-1 humaine et de souris avec la deuxième boucle extracellulaire humaine (EL2), mais pas les chimères avec l'EL2 de souris. La mutation M152L, mais pas V155I, dans la deuxième boucle extracellulaire humaine a supprimé l'immunoréactivité (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Analyse par ELISA : un lot représentatif a détecté l'immunoréactivité à la claudine-1/CLDN1 des cellules d'hépatome humain Huh-7.5.1 fixées au formaldéhyde à 3,7 % par "ELISA cellulaire" (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Analyse de neutralisation : un lot représentatif a inhibé l'infection par le VHC de cellules d'hépatome humain Huh-7.5.1 en culture in vitro et de souris chimériques dont le foie est composé d'hépatocytes humains in vivo (Fukasawa, M., et al. (2015). J. Virol. 89(9):4866-4879).
Domaine de recherche
Structure cellulaire
Structure cellulaire
L'utilisation de cet anticorps anti-claudine-1, clone 7A5, a été validée en immunocytochimie, en western blotting et en cytométrie en flux pour la détection de CLDN1.
Sous-domaine de recherche
Maladies infectieuses (virales)
Maladies infectieuses (virales)
Qualité
Produit évalué par immunocytochimie sur des cellules HepG2
Analyse par immunocytochimie : une concentration de 10 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter la claudine-1/CLDN1 dans des cellules HepG2.
Analyse par immunocytochimie : une concentration de 10 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter la claudine-1/CLDN1 dans des cellules HepG2.
Description de la cible
Poids réel (observé) : env. 20 kDa. Poids théorique (calculé) : 22,74 kDa.
Forme physique
Anticorps monoclonal IgG1κ de souris purifié, dans du PBS sans conservateurs.
Format : purifié
Produit purifié sur protéine G.
Stockage et stabilité
Stable à -20 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.
Recommandations relatives à la manipulation du produit : dès réception, et avant le retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Répartir en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et conserver ces derniers à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit.
Recommandations relatives à la manipulation du produit : dès réception, et avant le retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Répartir en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et conserver ces derniers à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit.
Autres remarques
Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.
Clause de non-responsabilité
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En option
Réf. du produit
Description
Tarif
Code de la classe de stockage
12 - Non Combustible Liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 2
Point d'éclair (°F)
Not applicable
Point d'éclair (°C)
Not applicable
Certificats d'analyse (COA)
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