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MABE1109

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-HHV-8 LNA-1, clone LN53

clone LN53, from rat

Synonyme(s) :

HHV-8/KSHV Orf73 LANA, HHV-8/KSHV Orf73 LNA, HHV-8/KSHV Orf73 LNA-1, HHV-8/KSHV Orf73 latency-associated nuclear antigen, HHV-8/KSHV Orf73 latent nuclear antigen, HHV-8/KSHV Orf73 latent nuclear antigen-1

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

rat

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

purified immunoglobulin

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

LN53, monoclonal

Espèces réactives

human, rhesus macaque

Technique(s)

ELISA: suitable
flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable

Isotype

IgG2cκ

Numéro d'accès GenBank

Numéro d'accès NCBI

Numéro d'accès UniProt

Conditions d'expédition

ambient

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Description générale

L'herpèsvirus humain 8/herpèsvirus associé au sarcome de Kaposi (HHV-8/KSHV) et l'herpèsvirus de la fibromatose rétropéritonéale du macaque (RFHV) ont été identifiés pour la première fois respectivement chez les patients atteints du SIDA en association avec le sarcome de Kaposi (SK) et dans des lésions tumorales de fibromatose rétropéritonéale chez les macaques atteints du SIDA simien. La principale protéine exprimée dans les cellules infectées de façon latente par le KSHV et le RFHV est le produit du gène orf73 connu sous le nom d'antigène nucléaire associé à la latence (LANA ou LNA). La LANA est une protéine nucléaire qui fonctionne pour assurer la maintenance du génome viral en intégrant l'ADN épisomal viral aux chromosomes de la cellule hôte. La LANA régule également le programme de transcription cellulaire dans les cellules hôtes en interagissant avec plusieurs protéines cellulaires, notamment avec les régulateurs de la transcription et avec les suppresseurs tumoraux identifiés, p53 et pRB. De plus, la LANA influence directement le programme de transcription virale et aide à maintenir l'état de latence du virus en inhibant la réplication virale. La KSHV LANA consiste en une extrémité N-terminale riche en sérine et en proline avec un signal de localisation nucléaire (NLS), un motif de liaison à la chromatine (CBM) et des domaines responsables de l'interaction avec les régulateurs de la transcription, le complexe mSin3 et le Sp1. Le domaine central contient plusieurs régions acides hautement répétitives qui varient en longueur et qui sont responsables de la différence de taille entre les protéines LANA provenant de différents isolats du KSHV et dont la longueur peut aller de 1003 à 1162 acides aminés. Le troisième domaine de l'extrémité C-terminale riche en proline contient un autre NLS et est responsable de la dimérisation de LANA et de sa liaison aux répétitions terminales (TR) de l'ADN génomique viral. L'extrémité C-terminale est responsable de l'interaction avec les suppresseurs tumoraux pRB et p53.

Spécificité

KSHV (HHV8) humaine et RFHV simienne.
Le clone LN53 reconnaît les motifs structurels répétitifs d'acide glutamique EQEQE et EPEPE qui se trouvent dans la région répétitive riche en glu de l'herpèsvirus associé au sarcome de Kaposi (KSHV ou HHV-8) humain et de l'antigène nucléaire associé à la latence (LANA ou LNA) Orf73 de l'herpèsvirus de la fibromatose rétropéritonéale (RFHV) simien, respectivement.

Immunogène

Fusions à base de GST purifiée par affinité de fragments C-terminaux du HHV-8 LNA-1 (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).

Application

Analyse ELISA : un lot représentatif a permis de détecter les constructions recombinantes HHV-8 LNA-1 contenant la région répétitive a.a. 803-929 (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).

Analyse par cytométrie en flux : un lot représentatif a permis de détecter une immunoréactivité au HHV-8 LNA-1 dans des cellules BCP-1, BC-3, et HBL-6, mais pas dans les cellules Daudi ou Ramos (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).

Analyse par immunocytochimie : un lot représentatif a permis de détecter le KHSV ORF73 (HHV-8 LANA ou LNA-1) exprimé de manière transitoire ainsi que l'herpèsvirus de la fibromatose rétropéritonéale du macaque rhésus ORF73 (RFHV LANA) dans le noyau de cellules COS transfectées par immunocytochimie fluorescente. Aucune réactivité n'a été détectée avec les protéines MneRV2 du macaque à queue de cochon ou RRV LANA du macaque rhésus (Burnside, K.L., et al. (2006). Virology. 354(1):103-115).

Analyse par immunocytochimie : un lot représentatif a permis de détecter des corps nucléaires positifs pour HHV-8 LNA-1 dans la lignée cellulaire BCP-1 de lymphome primitif des séreuses (PEL) par immunocytochimie fluorescente, mais pas dans les cellules Daudi ni dans les cellules Ramos (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).

Analyse par immunohistochimie : un lot représentatif a permis de détecter une immunoréactivité au RFHVMn LANA dans le noyau de cellules tumorales de fibromatose rétropéritonéale par marquage immunohistochimique d'échantillons de biopsie de RF, fixés au formol et inclus en paraffine, chez le macaque à queue de cochon infecté par le VIS. Aucune immunoréactivité n'a été détectée avec les coupes de tissus de jéjunum normal de macaque (Burnside, K.L., et al. (2006). Virology. 354(1):103-115).

Analyse par immunohistochimie : des lots représentatifs ont permis d'immunomarquer des cellules infectées de façon latente par le HHV-8 par marquage immunohistochimique de coupes de tissus inclus de sarcomes de Kaposi (SK) (taches, plaques et nodules), de maladie de Castleman multicentrique (MCD) et de lymphome primitif des séreuses (LPS) (Codish, S., et al. (2000). Am. J. Hematol. 65(4):310-314 ; Dupin, N., et al. (2000). Blood. 95(4):1406-1412 ; Dupin, N., et al. (1999). Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 96(8):4546-4551).

Analyse par immunohistochimie : un lot représentatif a permis de détecter une immunoréactivité nucléaire au HHV-8 LNA-1 dans les cellules au sein des nodules de sarcome de Kaposi (SK), mais pas autour du derme, par marquage immunohistochimique de coupes tumorales de SK classique incluses en paraffine (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).

Analyse par immunoprécipitation : un lot représentatif a permis d'immunoprécipiter le HHV-8 LNA-1A de poids moléculaire 220/230 kDa dans la lignée cellulaire BC-3 de lymphome primitif des séreuses, mais pas dans les cellules Ramos (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).

Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter le KHSV ORF73 (HHV-8 LANA ou LNA-1) exprimé de façon transitoire ainsi que l'herpèsvirus de la fibromatose rétropéritonéale du macaque rhésus ORF73 (RFHV LANA) dans un lysat de cellules COS transfectées. Aucune réactivité n'a été détectée avec les protéines MneRV2 du macaque à queue de cochon ou RRV LANA du macaque rhésus (Burnside, K.L., et al. (2006). Virology. 354(1):103-115).

Analyse par western blotting : un lot représentatif a permis de détecter le doublet HHV-8 LNA-1A de poids moléculaire 220/230 kDa dans un lysat de lignée cellulaire BC-3 de lymphome primitif des séreuses (LPS) mais pas dans les cellules Ramos (Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155).
L'anticorps anti-HHV-8 LNA-1, clone LN53, (réf. MABE1109) est un anticorps monoclonal de rat hautement spécifique qui cible le KSHV/HHV8 humain et l'antigène nucléaire associé à la latence (LANA ou LNA) RFHV Orf73 simien. Son utilisation a été testée en ELISA, cytométrie en flux, immunocytochimie, immunohistochimie et immunoprécipitation

Qualité

Produit évalué par immunocytochimie sur des cellules BCBL-1

Analyse par immunocytochimie (ICC) : une concentration de 1 µg/ml de cet anticorps a permis d'immunomarquer des corps nucléaires positifs pour HHV-8 LNA-1 dans des cellules de lymphome BCBL-1 infectées par l'herpèsvirus associé au sarcome de Kaposi/herpèsvirus humain 8 (KSHV/HHV-8).

Description de la cible

Poids théorique (calculé) : 116/135 kDa (KSHV LNA) et 118 kDa (RFHV LNA). Poids réel (observé) : env. 220/230 kDa doublet (KSHV) et env. 240 kDa doublet (RFHV) (Burnside, K.L., et al. (2006). Virology. 354(1):103-115 ; Kellam, P., et al. (1999). J. Virol. 73(6): 5149 5155). Le poids moléculaire effectif supérieur au poids théorique est probablement causé par la répétition de la séquence de la région acide interne (Rainbow, L., et al. (1997). J. Virol. 71(8):5915-5921).

Forme physique

Format : Produit purifié
IgG2c monoclonale de rat purifiée, dans un tampon à base de Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4) et de NaCl 150 mM contenant 0,05 % d'azoture de sodium

Autres remarques

Concentration : Voir la fiche technique du lot concerné.

Informations légales

GenBank is a registered trademark of United States Department of Health and Human Services

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


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