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MAB353

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-nestine, clone rat-401

clone rat-401, Chemicon®, from mouse

Synonyme(s) :

rat401

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

mouse

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

purified antibody

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

rat-401, monoclonal

Espèces réactives

mouse, rat

Ne doit pas réagir avec

human

Fabricant/nom de marque

Chemicon®

Technique(s)

immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable
western blot: suitable

Entrée

sample type neural stem cell(s)
sample type epithelial cells

Isotype

IgG1

Numéro d'accès NCBI

Numéro d'accès UniProt

Conditions d'expédition

wet ice

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Informations sur le gène

human ... NES(10763)
mouse ... Nes(18008)
rat ... Nes(25491)

Description générale

La nestine est une grande protéine de filament intermédiaire (classe de type VI) exprimée durant le développement et dans les jonctions neuromusculaires et myotendineuses. L'expression de la nestine est limitée, et disparaît typiquement au plus tard au stade E18. La nestine est considérée comme un marqueur neuronal raisonnable ; toutefois, de récentes études ont mis en évidence une expression de la nestine dans d'autres types de cellules comme les cellules endothéliales (Mokry et Nemecek, 1998). La nestine permet d'identifier le neuroépithélium le plus primitif mais aussi de nombreux autres tissus embryonnaires, elle n'est donc pas spécifique du SNC. Une expression de la nestine est observée dans presque tous les glioblastomes multiformes (GBM) et dans de nombreux mélanomes (aussi bien primaires que métastatiques), mais pas dans les carcinomes métastatiques.

Spécificité

Nestine de rongeur confirmée chez le rat et la souris. Rat-401 ne réagit pas avec la nestine humaine.

Immunogène

Nestine purifiée à partir de moelle épinière embryonnaire de rat.

Application

Domaine de recherche
Recherche sur les cellules souches
Détectez la nestine à l'aide de cet anticorps anti-nestine, clone rat-401, dont l'utilisation a été validée en IC, IH, IH(P) et WB.
Sous-domaine de recherche
Cellules souches nerveuses
Western blotting :
200-220 kDa sur gels réducteurs d'extraits de cellules de rat et de souris nouveau-nés. Il a été signalé à l'origine (à tort) que la nestine migrait à environ 440 kDa sur SDS-PAGE (Kachinsky, 1995).
Pour les westerns, préparez des échantillons en les faisant bouillir dans 4 volumes de Tris 125 mM, pH 6,8, 10 % de 2-mercaptoéthanol, 10 % de glycérol et 4,6 % de SDS. Des gels PAGE à 5 % sont recommandés. Bloquer les membranes avec du lait ou de la BSA. Ne pas diluer l'anticorps primaire dans un tampon contenant du lait. La congélation et la décongélation des échantillons ou le fait de ne pas conserver les échantillons à -85 °C entraîneront une dégradation de la nestine parfois en plusieurs fragments.

Immunohistochimie :
une dilution au 1/20e-1/200e d'un lot précédent a été utilisée. Perfuser le tissu au paraformaldéhyde à 4 % à pH 7,4 pour la microscopie optique, ou au paraformaldéhyde à 4 % pH 10,0 ou au paraformaldéhyde à 4 % avec 0,1 % de glutaraldéhyde à pH 7,4 pour la microscopie électronique. Convient aux coupes incluses en paraffine ou congelées.

Immunocytochimie :
une dilution au 1/20e-1/200e d'un lot précédent a été utilisée. Les fixer au paraformaldéhyde à 4 % tamponné avec 50 mM de borate de sodium à pH 9,5.

Il revient à l'utilisateur final de déterminer les dilutions de travail optimales.

Qualité

Immunohistochimie (paraffine) :
Marquage à la nestine (réf. MAB353, Clone 401) de tissus de pancréas de souris. Le tissu a été prétraité avec un tampon citrate à pH 6,0. Un lot précédent de cet anticorps a été dilué à 1,25 µg/ml, avec détection par HRP-DAB IHC-Select. L'immunoréactivité est détectée au niveau des îlots de Langerhans.
Marquage optimal avec l'anticorps monoclonal anti-nestine : pancréas de souris

Description de la cible

200-220 kDa

Forme physique

Format : purifié
IgG1 monoclonale de souris purifiée dans un tampon avec 0,09 % d'azoture de sodium.
Produit purifié sur protéine A

Stockage et stabilité

Stable entre 2 et 8 ºC pendant 1 an à compter de la date de réception.

Remarque sur l'analyse

Témoin
Tissu cérébral embryonnaire de souris

Autres remarques

Concentration : pour connaître la concentration spécifique du lot, voir le certificat d'analyse.

Informations légales

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Clause de non-responsabilité

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

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Designer self-assembling Peptide nanofiber scaffolds for adult mouse neural stem cell 3-dimensional cultures
Gelain, Fabrizio, et al.
Testing, 1, e119-e119 (2006)
Role of cyclin D1 cytoplasmic sequestration in the survival of postmitotic neurons.
Sumrejkanchanakij, P; Tamamori-Adachi, M; Matsunaga, Y; Eto, K; Ikeda, MA
Oncogene null
J Mokrý et al.
Folia biologica, 44(5), 155-161 (2000-03-25)
For a long time, intermediate filament protein nestin was recognized as a specific constituent of the cytoskeleton of developing neural cells and skeletal muscle. Recent reports by other investigators demonstrated that nestin may also be expressed in other cell types.
Markers of adult neural stem cells.
Eric Wexler
Methods in Molecular Biology null
Human embryonic stem cells express an immunogenic nonhuman sialic acid.
Martin, Maria J, et al.
Nature Medicine, 11, 228-232 (2005)

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Human iPSC neural differentiation media and protocols used to generate neural stem cells, neurons and glial cell types.

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Step-by-step culture protocols for neural stem cell culture including NSC isolation, expansion, differentiation and characterization.

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