Essai de stérilité

Les méthodes d'essai de stérilité pharmaceutique

Les méthodes des pharmacopées pour l'essai de stérilité des produits pharmaceutiques requièrent que les échantillons soient cultivés sur deux milieux distincts. Deux types de milieux de culture différents sont utilisés en essai de stérilité pour promouvoir la croissance des micro-organismes anaérobies résiduels, ainsi que des micro-organismes aérobies et des champignons. Le milieu au thioglycolate (FTM) est typiquement utilisé pour cultiver les micro-organismes anaérobies et certaines bactéries aérobies, tandis que le milieu à l'hydrolysat de caséine et de soja (SCDM) est généralement utilisé pour cultiver les champignons et les bactéries aérobies. Les échantillons sont incubés pendant 14 jours respectivement à 32,5 °C et 22,5 °C, avant examen. Toute turbidité dans les milieux de culture peut indiquer une croissance et doit être examinée. Deux méthodes sont recommandées pour l'essai de stérilité des produits pharmaceutiques : la filtration sur membrane et l'inoculation directe.

Essai de stérilité par filtration sur membrane

L'essai de stérilité par filtration sur membrane est la méthode réglementaire de choix pour les produits pharmaceutiques filtrables, tel que cité dans l'USP <71>, la pharmacopée européenne < 2.6.1> et la pharmacopée japonaise <4.06>. Les échantillons sont passés à travers un filtre membrane de 0,45 µm dans une chambre de filtration (canister), puis le milieu de culture est ajouté avant incubation. Cette méthode d'essai de stérilité peut offrir une sensibilité accrue comparée à d'autres méthodes, car l'échantillon tout entier ou un échantillon composite est passé à travers un seul filtre. La filtration offre également l'occasion d'éliminer par rinçage des composants de l'échantillon qui pourraient causer une turbidité ou inhiber la croissance, tels que les antibiotiques ou les conservateurs.

Essai de stérilité par inoculation directe

En inoculation directe, un faible volume d'échantillon est prélevé aseptiquement de l'unité échantillon et inoculé directement dans un volume adéquat de milieu de culture avant incubation. Tout en étant simple, cette méthode de test peut avoir des limites importantes. Seuls de faibles volume de produit peuvent être inoculés dans le milieu de culture, ce qui limite la sensibilité de l'essai. Si l'échantillon apparaît trouble ou turbide après inoculation, il peut être difficile de détecter une turbidité issue d'une croissance microbienne à la fin de la période d'incubation. De plus, si le produit a des propriétés antimicrobiennes, l'échantillon doit être neutralisé de façon à ce que la croissance microbienne ne soit pas inhibée.

Méthodes d'essai de stérilité pour les dispositifs médicaux

L'essai de stérilité par transfert direct est recommandé pour tester la stérilité des dispositifs médicaux. Le dispositif à tester est mis directement en contact avec les milieux de test pendant toute la période d'incubation, durant laquelle tout micro-organisme présent dans ou sur le dispositif se développera et prolifèrera. En outre, l'essai de stérilité par rinçage du produit est préférable pour les produits comportant des tubes creux, tels que les sets de perfusion ou de transfusion, dont le circuit du fluide est étiqueté comme stérile. L'intérieur du produit est rincé à l'aide d'un fluide de rinçage ; l'éluat est filtré sur membrane, puis placé sur un milieu adéquat pour incubation.

Déroulement de l'essai de stérilité