ELISA-Kits (Enzymgekoppelter Immunabsorptionsassay)
Ein ELISA (Enzymgekoppelter Immunabsorptionsassay) ist ein Immunassay auf Basis von Multiwell-Platten, bei dem eine der Assay-Komponenten, üblicherweise ein Antikörper oder eine Probe, auf einer festen Oberfläche adsorbiert wird, in diesem Fall eine Platte. ELISA bieten einen schnellen, quantitativen und empfindlichen Analytnachweis bei relativ geringen Kosten und stellen eines der am einfachsten durchzuführenden Assay-Formate dar. Darüber hinaus ermöglicht die einfache Anpassung eines ELISA an eine Screening-Methode mit höherem Durchsatz Wissenschaftlern, große Probenmengen in einem einzelnen Durchgang zu testen.
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Sandwich-, direkte und kompetitive ELISA
Unsere ELISA sind eine komfortable und benutzerfreundliche Methode zur Untersuchung von löslichen Proteinbiomarkern in einer Vielzahl von Matrizes wie Serum, Plasma, Zellkulturüberstand oder Lysat. Unser ELISA-Angebot besteht aus mehr als 1000 reinen Forschungsassays für eine Vielzahl von Spezies, darunter Mensch, Maus, Ratte und verschiedene weitere Tiermodelle (Landwirtschaft und Haustiere). Jeder Assay wird mit einem spezifischen Protokoll und den erforderlichen Reagenzien für eine 96-Well-Platte geliefert. ELISA gibt es in erster Linie im 96-Well-Format, wobei der Anbieter die zum Nachweis und zur Quantifizierung des Ziels erforderlichen Reagenzien bereitstellt. Es gibt eine Vielzahl von ELISA-Methoden, darunter Sandwich-ELISA, direkter und kompetitiver ELISA.
Beim Sandwich-Assay wird ein Paar monoklonaler Antikörper (mAk) gegen verschiedene Epitope desselben Ziels verwendet. Der primäre mAk, der an die Platte gebunden ist, zieht das Protein aus der Lösung, während der zweite mAk verwendet wird, um das "Sandwich" zu vervollständigen und das Signal zu liefern, welches das Vorhandensein des Targets anzeigt. Eine bekannte Menge der rekombinanten Version des Proteins wird mit dem Kit geliefert, sodass der Benutzer eine Standardkurve erstellen kann, im Vergleich zu der das Signal einer der Proben interpretiert wird. Der größte Teil unseres Portfolios liegt in diesem Sandwich-ELISA-Format vor.
Der direkte ELISA und die kompetitiven Assays sind seltener. Beim Direktassay wird ein einzelner mAk zum Nachweis der an die Platte gebundenen Probe verwendet. Der mAk wird dann von einem sekundären Reporter-Antikörper gebunden, um das Signal zu liefern.
Beim kompetitiven Assay ist eine bekannte Menge des Biomarkers bereits an die Platte gebunden. Ein markierter Antikörper wird mit der Probe co-inkubiert, die den Antikörper in Abhängigkeit von der Konzentration des Zielmoleküls in der Probe "aufnimmt". Der freie Antikörper ist dann in der Lage, an das Antigen auf der Platte zu binden und ein Signal zu liefern, nachdem die Probe weggewaschen wurde. In diesem Fall ist das Signal umgekehrt proportional zur Konzentration des Ziel-Biomarkers.
Conferma™ ELISA und Belysa® Software für Kurvenanpassungen in Immunassays
Die ELISA-Marke Conferma™ besteht aus Sandwich-Assays, die darauf ausgelegt sind, die Variabilität zwischen Chargen auf der kritischen Reagenzebene zu minimieren, was ein Hauptanliegen der Assay-Anwender ist. Die Auswertung der einzelnen Chargen kritischer Reagenzien mit einer Reihe von Analysetechniken, die mit einem detaillierten Qualitätskontrollprotokoll (QC) abgestimmt sind, ermöglicht es uns, die Variabilität im Laufe der Zeit zu kontrollieren und zu begrenzen.
Um Wissenschaftlern die Möglichkeit zu geben, die Reproduzierbarkeit ihrer Methode zu bewerten, haben wir die Software für Kurvenanpassungen in Immunassays Belysa® entwickelt. Mit diesem Tool kann ein Benutzer seinen Sandwich-Immunassay untersuchen, um sicherzustellen, dass Parameter wie %CV (Variationskoeffizient) und %Wiederfindung wie erwartet ausfallen. Anschließend können die Standardkurven mehrerer Platten verglichen werden, um zu bestätigen, dass die Methode konsistent war.
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