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MIRRT

Sigma-Aldrich

MystiCq® microRNA-cDNA-Synthese-Mischung

Synonym(e):

microRNA cDNA Synthesis Mix

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
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About This Item

UNSPSC-Code:
12352200
NACRES:
NA.55

Methode(n)

cDNA synthesis: suitable

Versandbedingung

wet ice

Lagertemp.

−20°C

Allgemeine Beschreibung

Bei Verwendung von Gesamt-RNA, vorangereicherten Proben oder microRNAs als Ausgangsbasis enthält das MystiCq®-microRNA-cDNA-Synthesemischungs-Kit alle notwendigen Komponenten zur Umwandlung von reifen microRNA in cDNA-Matrizen für qPCR. Da microRNA nicht von Natur aus polyadenyliert sind, besteht der erste Schritt im cDNA-Syntheseprozess darin, die microRNA durch eine Poly(A)-Polymerase-Reaktion zu polyadenylieren. Anschließend werden ReadyScript für die reverse Transkriptase, ein Oligo-dT-Adapter-Primer und andere erforderliche Reagenzien zugegeben, um die polyadenylierten microRNA in cDNA umzuwandeln. Der Adapter-Primer enthält am 5‘-Ende eine einzigartige Sequenz, die komplementär für die Sequenz des MysticCq Universal PCR-Primers ist, eine weitere Komponente des MystiCq-microRNA-qPCR-Assay-Systems. Das Kit enthält außerdem einen Positivkontrolle-Primer, der für SNORD44 spezifisch ist, eine kleine nukleäre RNA, die verbreitet in den meisten menschlichen Geweben exprimiert wird. Das Kit enthält ausreichende Mengen des Poly(A)-Tailing-Puffers und des MicroRNA-cDNA-Reaktionsgemisches, um die Verwendung von Kontrollreaktionen ohne Poly(a)-Polymerase und reverse Transkriptase (NRT) zu ermöglichen. Zur Analyse einzelner microRNA den MystiCq-Universal-PCR-Primer (der sich gegen die Adapterprimer-Sequenz richtet) zusammen mit dem MystiCq-microRNA-qPCR-Assay-Primer und dem MystiCq®-microRNA-SYBR®-Green-qPCR ReadyMix™ verwenden.

Anwendung

MystiCq® microRNA cDNA-Synthesemischung wird für die Erststrang-cDNA-Synthese durch die reverse Transkription von miRNA für die quantitative Polymerase-Kettenreaktion (qPCR) ausgehend von Gesamt-RNA eingesetzt

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Da die Polyadenylierung und die reverse Transkription in getrennten Schritten erfolgen, kann das Protokoll bei Bedarf optimiert werden
  • Die hergestellte cDNA kann zur künftigen Verwendung archiviert werden
  • Eine einzelne RT-Reaktion kann bis zu 1000 qPCR-Reaktionen liefern
  • Enthält einen Positivkontrollprimer zur Verwendung mit den meisten Humangeweben

Verpackung

Das Standardreaktionsvolumen ist 20 μL

Rechtliche Hinweise

MystiCq is a registered trademark of QIAGEN Beverly Inc.
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
SYBR is a registered trademark of Life Technologies

Nur Kit-Komponenten

Produkt-Nr.
Beschreibung
  • Poly (A) Tailing Buffer (5X)
  • Human Positive Control Primer
  • Nuclease-free Water
  • MystiCq® Universal PCR Primer
  • Poly (A) Polymerase
  • microRNA cDNA Reaction Mix
  • ReadyScript® Reverse Transcriptase

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Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben

Lagerklassenschlüssel

10 - Combustible liquids

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Protokolle

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Method for purification, reverse transcription and quantitative PCR for MicroRNAs using Mysticq reagents

MystiCq® MicroRNA® Quantifikationssystem

Verfahren für Aufreinigung, reverse Transkription und quantitative PCR für MicroRNA mit MystiCq-Reagenzien

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