MAK083
Kolorimetrisches Glucoseaufnahme-Assay-Kit
sufficient for 100 colorimetric tests
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UNSPSC-Code:
12161503
NACRES:
NA.84
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![2-Desoxy-2-[(7-nitro-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl)amino]-D-glucose ≥97% (HPLC)](/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/structures/104/527/40bd5a41-ebc4-484e-a10e-891fecfaea79/640/40bd5a41-ebc4-484e-a10e-891fecfaea79.png)
Verwendung
sufficient for 100 colorimetric tests
Nachweisverfahren
colorimetric
Relevante Krankheit(en)
endocrinological disorders, diabetes; cancer
Lagertemp.
−20°C
Allgemeine Beschreibung
Für die meisten Zellen ist Glucose die Hauptenergiequelle. Die zelluläre Glucoseaufnahme ist umfassend geregelt und der erste limitierende Schritt im Glucosestoffwechsel. Die Glucoseaufnahme wird durch die GLUT-Familie der Transporterproteine unterstützt, deren Expression und Aktivität von unterschiedlichen Mechanismen reguliert wird. Die Glucoseaufnahme wird in vielen Krebszellen, die hohe Raten aerober Glycolysen aufweisen, hochreguliert. Insulinresistente Zellen weisen bei Insulinstimulation eine verminderte Glucoseaufnahme auf.
Der Einsatz einer rezyklierenden Amplifikationsreaktion im kolorimetrischen Assay führt zur einer Nachweisgrenze, die im Vergleich zum Fluoreszenzassay (200–1000 pmol, MAK084) um das 10-fache niedriger ist (20–100 pmol).
Der Einsatz einer rezyklierenden Amplifikationsreaktion im kolorimetrischen Assay führt zur einer Nachweisgrenze, die im Vergleich zum Fluoreszenzassay (200–1000 pmol, MAK084) um das 10-fache niedriger ist (20–100 pmol).
Anwendung
Das kolorimetrische Glucoseaufnahme-Assay-Kit wird zur Messung der Glucoseaufnahme in verschiedensten Zellen verwendet.
Eignung
Eignet sich zur Bestimmung der Glucoseaufnahme in adhärenten oder suspendierten Zellen, die in einer 96-Well-Mikrotiterplatte kultiviert wurden.
Prinzip
Das kolorimetrische Glucoseaufnahme-Assay-Kit ermöglicht ein einfaches und direktes Verfahren zur Messung der Glucoseaufnahme in verschiedensten Zellen. Die Glucoseaufnahme wird mithilfe des Glucose-Analogons 2-Desoxyglucose (2-DG) gemessen, das von Zellen aufgenommen und von Hexokinase zu 2-DG6P phosphoryliert wird. 2-DG6P kann nicht weiter metabolisiert werden und sammelt sich direkt proportional zur zellulären Glucoseaufnahme in Zellen an. In diesem Test wird die 2-DG-Aufnahme mithilfe eines gekoppelten Enzym-Assays bestimmt, bei dem 2-DG6P oxidiert und dadurch NADPH gebildet wird. Dieses wird dann durch eine rezyklierende Amplifikationsreaktion bestimmt, bei der NADPH in einer gekoppelten Enzymreaktion von Glutathionreduktase verwendet wird, um Glutathion zu bilden. Glutathion reagiert mit DTNB, um TNB zu erzeugen, welches bei 412 nm quantifiziert werden kann.
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