G8795

Anti-GAPDH-Antikörper, Maus monoklonal in Maus hergestellte Antikörper

clone GAPDH-71.1, purified from hybridoma cell culture

• Synonym(e): Anti-G3PD, Anti-G3PDH, Anti-Glycerinaldehyd-3-phosphat-Dehydrogenase, Beladungskontrolle
• MDL-Nummer: MFCD01322099
• UNSPSC-Code: 12352203
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 200
• Konjugat: unconjugated
• Antikörperform: purified from hybridoma cell culture; purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: GAPDH-71.1, monoclonal
• Form: buffered aqueous solution
• Mol-Gew.: antigen ~37 kDa
• Speziesreaktivität: bovine, turkey, canine, chicken, monkey, mink, mouse, human, rabbit, rat, hamster
• Darf nicht reagieren mit: prokaryotes
• Verpackung: antibody small pack of 25 μL
• Konzentration: ~1 mg/mL
• Methode(n): immunocytochemistry: suitable; indirect ELISA: suitable; microarray: suitable; western blot: 0.025-0.05 μg/mL using A431 total cell extract
• Isotyp: IgM
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P04406
• Anwendung(en): research pathology
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... GAPDH(2597) ; mouse ... Gapdh(14433) ; rat ... Gapdh(24383)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Monoklonale Anti-GAPDH (Maus IgM Isotyp) wird aus dem Hybridom GAPDH-71.1 abgeleitet, das durch Fusion von Maus-Myelomzellen (NS1-Zellen) und Splenozyten von mit Kaninchen-GAPDH (Glycerinaldehyd-3-phosphat-Dehydrogenase) immunisierten BALB/c-Mäusen hergestellt wird. Das Gen Glycerinaldehyd-3-phosphat-Dehydrogenase (GAPDH) ist auf dem humanen Chromosom 12p13 lokalisiert. Das Protein lokalisiert sich im Zytoplasma, kann aber je nach Zellbedingungen zum Zellkern transloziert werden.

Spezifität

Monoklonale Anti-GAPDH erkennt GAPDH vom Menschen, Affen, Rind, Hund, Hamster, Nerz, Kaninchen, Huhn und Truthahn sowie von der Ratte und Maus. Sie weist keine Kreuzreaktion mit Nichtwirbeltieren und prokaryotischen Arten auf.

Immunogen

GAPDH von Kaninchen.

Anwendung

Der monoklonale Anti-GAPDH-Antikörper der Maus ist für Western Blots geeignet unter Verwendung von:

• Protein, das bei einer Arbeitsverdünnung von 1:25.000 aus Herzgewebe von Mäusen extrahiert wurde
• Myelinfraktionen und axogliasomalen Fraktionen aus dem menschlichen ZNS
• Zellkern- und Zytoplasmafraktionen aus TBP-13Q- und TBP-105Q-PC12-Zellen nach Erholung von einem Hitzeschock
• Protein aus immortalisierten Luteal-Endothelzellen vom Rind
• renalem tubulärem Epithelzellextrakt
• Proteinen von Maus-Embryofibroblasten
• Proteinextrakt aus Geweben des ventrikulären Myokards
• A431-Gesamtzellextrakt in einer Arbeitskonzentration von 0,025–0,05 μg/mL

Er eignet sich auch zur Immunfärbung unter Verwendung von Leiomyomen und Leiomyosarkomen. Der Antikörper kann auch für die Immunzytochemie, den indirekten ELISA und für Mikroarrays genutzt werden.

Biochem./physiol. Wirkung

Glycerinaldehyd-3-phosphat-Dehydrogenase (GAPDH) ist ein Tetramer mit identischen Ketten. Sie katalysiert die reversible oxidative Phosphorylierung von Glycerinaldehyd-Phosphat, was ein wichtiger Energiegewinnungsschritt im Kohlenhydratstoffwechsel ist. Sie bindet an mehrere Proteine, unter anderem an Aktin, Tubulin, Amyloid-Vorläufer, Polyglutaminpeptide, DRPLA (dentatorubrale pallidoluysische Atrophie) und Huntingtin. Proteinkinase Cι/λbindet und phosphoryliert GAPDH. Phosphorylierte GAPDH assoziiert mit Zytoskelett-Elementen und kontrolliert die Dynamik der Mikrotubuli im frühen sekretorischen Weg. Poly(ADP-Ribose)-Polymerase-1 (PARP1) interagiert mit GAPDH und führt dadurch bei oxidativem/nitrosativem Stress zur Hirnschädigung. GAPDH bildet einen Bestandteil von OCA-S, dem Mehrkomponenten-OCT1-Koaktivator-Komplex (OCT1: Octamer-Motiv-Bindungsfaktor), der an der S-phasenabhängigen Histon-H2B-Transkription beteiligt ist. Diese Assoziation ist für die Verbindung der H2B-Transkriptionsmaschinerie mit der Zellzyklusregulation und dem zellulären Stoffwechselzustand verantwortlich. GAPDH ist ebenfalls eine Komponente des funktionalen GAIT (interferon-γ-aktivierten Inhibitor der Translation) mRNP (Boten-Ribonukleoprotein). Die GAPDH-Expression wird während der Melanomprogression dysreguliert.

Physikalische Form

Lösung in 0,01 M phosphatgepufferter Kochsalzlösung, pH 7,4, mit 15 mM Natriumazid.

Lagerung und Haltbarkeit

Zur regelmäßigen Verwendung bei 2–8 °C bis zu 1 Monat aufbewahren.
Zur Langzeitlagerung in Arbeitsaliquoten einfrieren. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen bzw. die Aufbewahrung in „frostfreien“ Gefrierschränken wird nicht empfohlen. Falls nach längerer Lagerung eine leichte Trübung eingetreten ist, die Lösung vor der Verwendung durch Zentrifugieren klären. Nicht verwendete Arbeitsverdünnungen sollten nach 12 Stunden verworfen werden.

Sonstige Hinweise

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Haftungsausschluss

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• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
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• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US)