DUO92009
Duolink® In Situ Probemaker PLUS
Synonym(e):
in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352200
NACRES:
NA.32
Empfohlene Produkte
Produktlinie
Duolink®
Methode(n)
immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable
Eignung
suitable for brightfield
suitable for fluorescence
Versandbedingung
wet ice
Lagertemp.
−20°C
Verwandte Kategorien
Anwendung
Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz-(IF-), immunhistochemischen (IHC-) oder immunzytochemischen (ICC-)Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink®-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung auf fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, Formalin-fixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine Mindestanzahl von Zellen erforderlich.
Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! lnformieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung der Duolink®-Projekte
Sehen Sie sich die vollständige Duolink®-Produktliste an
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To perform a complete Duolink® PLA in situ experiment you will need two primary antibodies (PLA, IHC, ICC or IF validated) that recognize two target epitopes. Other necessary reagents include a pair of PLA probes from different species (one PLUS and one MINUS), detection reagents, wash buffers, and mounting medium. Note that the primary antibodies must come from the same species as the Duolink® PLA probes. Analysis is carried out using standard immunofluorescence assay equipment.HRP is also available for brightfield detection.
Specificity
Duolink® In Situ Probemaker extends your possibilities even further by allowing you to create your own PLA probes to meet specific assay requirements.
Using Duolink® In Situ Probemaker PLUS and MINUS, you simply conjugate the PLUS and MINUS oligo arms directly to your antibodies in a quick and convenient procedure. As well as providing unique capabilities, this also means there is no longer any limitation as to which species your primary antibodies have to be derived from in order perform a Duolink® In Situ assay.
Application Note
The antibody to be conjugated must have a concentration of 1 mg/ml. Do not use volumes larger than 20 ml for conjugation. The antibody must be in an amine free buffer, ideally PBS. The buffer should be carrier free but may contain up to 0.1% BSA, 5% trehalose, and 0.02% sodium azide.
Test your primary antibodies (IgG-class, mono- or polyclonal) in a standard immunofluorescence (IF), immunohistochemistry (IHC) or immunocytochemistry (ICC) assay to determine the optimal fixation, blocking, and titer conditions. Duolink® in situ reagents are suitable for use on fixed cells, cytospin cells, cells grown on slide, formalin-fixed, paraffin embedded (FFPE), or tissue (fresh or frozen). No minimum number of cells is required.
Let us do the work for you, learn more about our Custom Service Program to accelerate your Duolink® projects
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Specificity
Duolink® In Situ Probemaker extends your possibilities even further by allowing you to create your own PLA probes to meet specific assay requirements.
- Study homodimers
- Study protein-protein interactions with two primary antibodies derived from the same species
- Study protein-protein interactions with primary antibodies from any species
Using Duolink® In Situ Probemaker PLUS and MINUS, you simply conjugate the PLUS and MINUS oligo arms directly to your antibodies in a quick and convenient procedure. As well as providing unique capabilities, this also means there is no longer any limitation as to which species your primary antibodies have to be derived from in order perform a Duolink® In Situ assay.
Application Note
The antibody to be conjugated must have a concentration of 1 mg/ml. Do not use volumes larger than 20 ml for conjugation. The antibody must be in an amine free buffer, ideally PBS. The buffer should be carrier free but may contain up to 0.1% BSA, 5% trehalose, and 0.02% sodium azide.
- Study homodimers by using one monoclonal antibody split into two halves. Label one with the PLUS oligo and the other with the MINUS oligo.
- Use antibodies from same species: study protein-protein interactions, protein modifications, or single proteins, using two primary antibodies derived from the same species. Label one of the antibodies with the PLUS oligo and the other with the MINUS oligo
- Use antibodies from any species: study protein-protein interactions, protein modifications, or single proteins, using one or both primary antibodies derived from species other than mouse, rabbit or goat. Label one of your secondary antibodies with the PLUS oligo and the other with the MINUS oligo. Or, combine one labeled secondary antibody with a standard secondary Duolink®In Situ PLA probe.
Test your primary antibodies (IgG-class, mono- or polyclonal) in a standard immunofluorescence (IF), immunohistochemistry (IHC) or immunocytochemistry (ICC) assay to determine the optimal fixation, blocking, and titer conditions. Duolink® in situ reagents are suitable for use on fixed cells, cytospin cells, cells grown on slide, formalin-fixed, paraffin embedded (FFPE), or tissue (fresh or frozen). No minimum number of cells is required.
Let us do the work for you, learn more about our Custom Service Program to accelerate your Duolink® projects
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Leistungsmerkmale und Vorteile
- Keine Überexpression oder genetische Manipulation erforderlich
- Hohe Spezifität (weniger falsch-positive Ergebnisse)
- Einzelmolekül-Sensitivität durch RCA (Rolling Circle Amplification)
- Relative Quantifizierung möglich
- Keine Spezialgeräte erforderlich
- Schneller und einfacher als FRET
- Höhere Präzision als co-IP
- Publikationsreife Ergebnisse
Komponenten
Dieses Produkt besteht aus folgenden Komponenten:
- Duolink® In Situ Oligonukleotid PLUS – eine Flasche mit lyophilisiertem aktiviertem PLUS Oligonukleotid für eine Konjugation von 20 μg Antikörper
- Konjugationspuffer – Puffer für die Konjugationsreaktion
- Stoppreagenz – stoppt die Konjugationsreaktion
- Aufbewahrungslösung – Puffer zum Aufbewahren der vorbereiteten PLA-Sonde (Antikörperkonjugat)
- 20x Assayreagenz – Das Reagenz wird der vom Experimentator optimierten Antikörper-Verdünnung hinzugefügt
- Blockierungslösung – blockiert die Probe vor der Färbung mit Duolink® In Situ
- PLA-Sonden-Verdünnung – Puffer zum Verdünnen der PLA-Sonde (Antikörperkonjugat) auf die endgültige Assay-Konzentration
Sonstige Hinweise
Der Duolink®Proximity Ligation Assay (PLA®) ermöglicht die endogene Detektion von Protein-Interaktionen, posttranslationalen Modifikationen und Proteinexpressionswerten auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.
Befolgen Sie für die Verwendung von Duolink®In Situ Probemaker PLUS und MINUS das Duolink®In Situ Probemaker-Protokoll. Dieses Produkt kann je nach verwendeten Detektionsreagenzien sowohl für das Duolink® In-Situ-Fluoreszenzprotokoll als auch für das Duolink® In-Situ-Hellfeldprotokoll angewendet werden. Weitere Informationen finden Sie unter Herstellung individueller PLA®-Sonden.
Besuchen Sie unser Duolink® PLA-Informationszentrum, wo Sie Anleitungen zur Durchführung von Duolink® Versuchen, Anwendungen, Fehlerbehebung und mehr finden.
Befolgen Sie für die Verwendung von Duolink®In Situ Probemaker PLUS und MINUS das Duolink®In Situ Probemaker-Protokoll. Dieses Produkt kann je nach verwendeten Detektionsreagenzien sowohl für das Duolink® In-Situ-Fluoreszenzprotokoll als auch für das Duolink® In-Situ-Hellfeldprotokoll angewendet werden. Weitere Informationen finden Sie unter Herstellung individueller PLA®-Sonden.
Besuchen Sie unser Duolink® PLA-Informationszentrum, wo Sie Anleitungen zur Durchführung von Duolink® Versuchen, Anwendungen, Fehlerbehebung und mehr finden.
Rechtliche Hinweise
Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Signalwort
Warning
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Aquatic Chronic 2 - Skin Sens. 1
Lagerklassenschlüssel
10 - Combustible liquids
WGK
WGK 3
Analysenzertifikate (COA)
Suchen Sie nach Analysenzertifikate (COA), indem Sie die Lot-/Chargennummer des Produkts eingeben. Lot- und Chargennummern sind auf dem Produktetikett hinter den Wörtern ‘Lot’ oder ‘Batch’ (Lot oder Charge) zu finden.
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Camille Hallez et al.
Nature microbiology, 4(7), 1196-1207 (2019-04-03)
Numerous human APOBEC3 cytidine deaminases have proven to be, inter alia, host cell restriction factors for retroviruses and hepadnaviruses. Although they can bind to genomic RNA and become encapsidated, they are only catalytically active on single-stranded DNA. As there are
Roberto Di Maio et al.
Science translational medicine, 10(451) (2018-07-27)
Missense mutations in leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) cause familial Parkinson's disease (PD). However, a potential role of wild-type LRRK2 in idiopathic PD (iPD) remains unclear. Here, we developed proximity ligation assays to assess Ser1292 phosphorylation of LRRK2 and, separately
Agata Zieba et al.
Clinical chemistry, 56(1), 99-110 (2009-11-21)
The in situ proximity ligation assay (PLA) allows a protein or protein complex to be represented as an amplifiable DNA molecule. Recognition is mediated by proximity probes consisting of antibodies coupled with oligonucleotides. Upon dual binding of the proximity probes
Annabel Christ et al.
Developmental cell, 22(2), 268-278 (2012-02-22)
Sonic hedgehog (SHH) is a regulator of forebrain development that acts through its receptor, patched 1. However, little is known about cellular mechanisms at neurulation, whereby SHH from the prechordal plate governs specification of the rostral diencephalon ventral midline (RDVM)
Lei Zhu et al.
The Prostate, 73(2), 219-226 (2012-07-19)
PSA is the most useful prostate cancer marker. However, its levels are increased also in some non-malignant conditions. In circulation, the majority of PSA is complexed with protease inhibitors, including α(1) -antichymotrypsin (ACT). The proportion of the PSA-ACT complex is
Artikel
Find Duolink references based on the type of method used, post translational modification detected, and research focus.
Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol
Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.
Protokolle
Duolink® kits use in situ PLA®, a proximity ligation assay technology, to accurately and objectively quantify individual proteins, and their interactions and modifications in unmodified cells and tissue.
Unser Team von Wissenschaftlern verfügt über Erfahrung in allen Forschungsbereichen einschließlich Life Science, Materialwissenschaften, chemischer Synthese, Chromatographie, Analytik und vielen mehr..
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