A4700

Monoklonales Anti-Aktin in Maus hergestellte Antikörper

clone AC-40, ascites fluid

• Synonym(e): Monoklonales Anti-Aktin
• UNSPSC-Code: 12352203
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 200
• Konjugat: unconjugated
• Antikörperform: ascites fluid
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: AC-40, monoclonal
• Mol-Gew.: antigen 42 kDa
• Enthält: 15 mM sodium azide
• Speziesreaktivität: human, Xenopus, hamster, mouse, guinea pig, rat, rabbit, snail, sheep, canine, carp, chicken, pig, bovine, viper, goat
• Methode(n): immunohistochemistry (frozen sections): suitable using methanol-fixed, frozen sections; indirect ELISA: suitable; indirect immunofluorescence: 1:200 using cultured human or chicken fibroblasts; western blot: 1:500 using cultured human or chicken fibroblast extract
• Isotyp: IgG2a
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... ACTA1(58) , ACTA1(58) , ACTA1(58) , ACTA2(59) , ACTA2(59) , ACTA2(59) , ACTB(60) , ACTB(60) , ACTB(60) , ACTC1(70) , ACTC1(70) , ACTC1(70) , ACTG1(71) , ACTG1(71) , ACTG1(71) , ACTG2(72) , ACTG2(72) , ACTG2(72) ; mouse ... Acta1(11459) , Acta1(11459) , Acta1(11459) , Acta2(11475) , Acta2(11475) , Acta2(11475) , Actb(11461) , Actb(11461) , Actb(11461) , Actc1(11464) , Actc1(11464) , Actc1(11464) , Actg1(11465) , Actg1(11465) , Actg1(11465) , Actg2(11468) , Actg2(11468) , Actg2(11468) ; rat ... Acta1(29437) , Acta1(29437) , Acta1(29437) , Acta2(81633) , Acta2(81633) , Acta2(81633) , Actb(81822) , Actb(81822) , Actb(81822) , Actc1(29275) , Actc1(29275) , Actc1(29275) , Actg1(287876) , Actg1(287876) , Actg1(287876) , Actg2(25365) , Actg2(25365) , Actg2(25365)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Aktin und Myosin sind wichtige zytoskelettale Proteine. Aktin wird vor allem in sechs Isoformen exprimiert. Das humane γ-Aktin-Gen ist auf dem menschlichen Chromosom 17 lokalisiert.
Der Antikörper erkennt ein Epitop, das sich am C-terminalen Ende des Aktins befindet, das in allen Aktinisoformen erhalten ist. Markiert spezifisch Aktin in einer Vielzahl von Geweben und Spezies. Das von dem Antikörper erkannte Epitop ist resistent gegenüber Formalinfixierung und Paraffineinbettung. Zink-Formalin, B5, Ethanol, Methacarn, Brunnel′sche oder Bouin′sche Lösungen können auch als Fixiermittel verwendet werden.

Monoklonales Anti-Aktin (Maus-IgG2a-Isotyp) stammt aus dem AC-40-Hybridom, das durch die Fusion von Maus-Myelomzellen und Splenozyten einer immunisierten Maus hergestellt wurde. Ein synthetisches C-terminales Aktin-Peptid, das sich am Rückgrat von multiplen Antigenpeptiden (MAP) befindet, wurde als Immunogen verwendet. Der Isotyp wird unter Anwendung von monoklonalen Mausantikörper-Isotypisierungsreagenzien (Produktnr. ISO-2) bestimmt.

Der Antikörper erkennt ein Epitop am C-Terminus von Aktin, der in allen Aktin-Isoformen konserviert ist. Er markiert gezielt Aktin in einer Vielzahl von Geweben und Spezies. Das vom Antikörper erkannte Epitop ist resistent gegenüber Formalinfixierung und Paraffineinbettung. Zink-Formalin, B5, Ethanol, Methacarn und Brunnel- oder Bouin-Lösung können ebenfalls als Fixiermittel verwendet werden.

Die beiden an der Zellmotilität beteiligten Hauptproteine des Zytoskeletts sind Aktin und Myosin. Aktin und Myosin sind Bestandteile vieler Zelltypen und sind an Zellvorgängen wie Fortbewegung, Sekretion, Zytoplasmaströmung, Phagozytose und Zytokinese beteiligt. Auch wenn Aktin eines der am stärksten konservierten eukaryotischen Proteine ist, wird es in Säugetieren und Vögeln in mindestens sechs Isoformen exprimiert, die durch Elektrophorese und Aminosäuresequenzanalyse charakterisiert werden.

Spezifität

Monoklonales Anti-Aktin erkennt ein Epitop am C-Terminus von Aktin, jedoch nicht am N-Terminus. Dieses Epitop ist in allen Aktin-Isoformen konserviert. Bei Immunblots (Markerbande bei 42 kDa), der Immunfluoreszenzfärbung kultivierter Zelllinien und bei der Immunhistologie markiert der Antikörper gezielt Aktin in einer Vielzahl von Geweben und Spezies. Eine Kreuzreaktion wurde sowohl beim Menschen als auch bei Rindern, Schafen, Ziegen, Schweinen, Kaninchen, Hunden, Mäusen, Ratten, Meerschweinchen, Hamstern, Hühnern, Karpfen, Giftschlangen, Fröschen und Schnecken beobachtet. Der Antikörper kann zur Färbung von methanolfixierten, gefrorenen Schnitten verwendet werden. Das vom Antikörper erkannte Epitop ist resistent gegenüber Formalinfixierung und Paraffineinbettung. Zink-Formalin, B5, Ethanol, Methacarn und Brunnel- oder Bouin-Lösung können ebenfalls als Fixiermittel verwendet werden.

Immunogen

Synthetisches C-terminales Aktin-Peptid, das sich am Rückgrat von multiplen Antigenpeptiden (MAP) befindet

Anwendung

Als primärer Antikörper für die Western-Blot-Analyse von MDCK-Zelllysaten wurde ein monoklonaler Anti-Aktin-Antikörper verwendet.

Monoklonaler Anti-Aktin-Antikörper wurde für die Western-Blot-Analyse von Cos-7-Zelllysaten verwendet, um eine gleichmäßige Beladung von Proteinen zu garantieren.

Monoklonales Kaninchen-Anti-Aktin wird verwendet:

• für den Nachweis von Aktin in HeLa-Zellen, Brustkrebs-Zelllinien und Leukämie-Zelllinien mittels Western-Blot-Analysen
• für den Nachweis in humanen Fibroblasten mittels Immunfluoreszenzverfahren

Biochem./physiol. Wirkung

Aktin und Myosin sind Bestandteile vieler Zelltypen und sind an Zellvorgängen wie Fortbewegung, Sekretion, Zytoplasmaströmung, Phagozytose und Zytokinese beteiligt. Die N-terminale Aktinregion scheint eine Haupt-Antigenregion zu sein und ist möglicherweise an der Interaktion von Aktin mit anderen Proteinen wie Myosin beteiligt. Von den sechs Aktin-Isoformen repräsentieren vier die Differenzierungsmarker von Muskelgewebe und zwei sind in fast allen Zellen zu finden. Es gibt drei α-Aktine (Skelett-, Herz- und Glattmuskeln), ein β−-Aktin (β-Nichtmuskel) und zwei γ-Aktine (γ-Glattmuskel und γ-Nichtmuskel). Die Aktin-Isoformen weisen insgesamt >90 % Sequenzhomologie auf, zeigen aber nur 50–60 % Homologie in ihren NH2-terminalen Resten.
Das Aktin in Zellen verschiedener Gewebe und Spezies weist starke Ähnlichkeiten in den durch Elektrophorese und Aminosäuresequenzanalyse charakterisierten immunologischen und physikalischen Eigenschaften auf (laut Bulletin). Es bewirkt den Umbau des Zytoskeletts während der Aktivierung von T-Zellen. Die Mutation des γ-Aktin- und β-Aktin-Gens wird mit einer Entwicklungsstörung, die unter dem Namen Baraitser-Winter-Syndrom bekannt ist, in Verbindung gebracht. Eine Mutation des γ-Aktins führt zu Gehörverlust.

Physikalische Form

Wird als Aszitesflüssigkeit mit 15 mM Natriumazid als Konservierungsmittel geliefert.

Lagerung und Haltbarkeit

Für regelmäßige Verwendung maximal einen Monat bei 2–8 °C aufbewahren. Zur langfristigen Aufbewahrung kann die Lösung in Arbeitsaliquoten eingefroren werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen oder die Aufbewahrung in „frostfreien“ Gefrierschränken wird nicht empfohlen. Falls nach längerer Lagerung eine leichte Trübung eingetreten ist, die Lösung vor der Verwendung durch Zentrifugieren klären.

Sonstige Hinweise

Unterstützung bei der Auswahl von Aktin-Antikörpern erhalten Sie auf www.sigmaaldrich.com/actin.

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
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