Allgemeine Beschreibung
Die hybride immortalisierte dopaminerge neuronale Zelllinie MN9D wurde durch Fusion von rostralen mesenzephalischen Neuronen eines 14 Tage alten C57BL/6J-Mausembryos und N18TG2-Neuroblastomzellen, einem sympathischen Nervensystemkarzinom mit A/Jax-Hintergrund, erzeugt.1 MN9D-Zellen produzieren Dopamin (DA) und exprimieren Tyrosinhydroxylase (TH) sowie aromatische Aminosäure-Decarboxylase (AADC).2 MN9D-Zellen aggregieren schnell miteinander oder mit anderen embryonalen Gehirnzellen2 und können mittels Calciumphosphatausfällung3 oder mit Lipofectamin4 transfiziert werden.Undifferenzierte oder differenzierte MN9D-Zellen werden häufig zur Modellierung dopaminerger Neuronen und zur Prüfung von Mechanismen und potenziellen Therapeutika verwendet, die für den Verlust von DA-Neuronen bei der Parkinson-Krankheit relevant sind. Bei der Differenzierung mit Buttersäure oder dem von der Gliazelllinie abgeleiteten neurotrophen Faktor (GDNF), gefolgt von Buttersäure, rekapitulieren MN9D-Zellen nur teilweise die elektrophysiologischen Eigenschaften der DA-Neuronen des Mittelhirns. Die weitere Optimierung der MN9D-Differenzierung unter Verwendung eines oder einer Kombination von Wachstums- oder anderen Faktoren kann zu einem verbesserten Modellsystem für In-vitro-Studien zu Parkinson führen.5
Anwendung
Die Mechanismen, mit denen zentrale Neuronen Axone entwickeln und funktionelle Verbindungen mit ihren Zielzellen herstellen, sowie die Rolle solcher Verbindungen beim Zellüberleben sind wichtige Fragen der Entwicklungsneurobiologie, die unter Verwendung von In-vitro-Zellreaggregationssystemen sowohl für zentrale dopaminerge als auch cholinerge Neuronen untersucht werden. Hybride klonale Zellen ermöglichen die Untersuchung trophischer Interaktionen zwischen mesenzephalischen dopaminergen Neuronen und ihren Zielzellen. Literatur1.Choi HK, Won LA, Kontur PJ, Hammond DN, Fox AP, Wainer BH, Hoffmann PC, Heller A. (1991) Immortalization of embryonic mesencephalic dopaminergic neurons by somatic cell fusion. Brain Res 552(1):67-76.2.Choi HK, Won L, Roback JD, Wainer BH, Heller A. (1992) Specific modulation of dopamine expression in neuronal hybrid cells by primary cells from different brain regions. Proc Natl Acad Sci USA 89(19):8943-8947.3.Perez RG, Waymire JC, Lin E, Liu JJ, Guo F, Zigmond MJ. (2002) A role for alpha-synuclein in the regulation of dopamine biosynthesis. J Neurosci 22(8):3090-30994.Cavanaugh JE, Jaumotte JD, Lakoski JM, Zigmond MJ. (2006) Neuroprotective role of ERK1/2 and ERK5 in a dopaminergic cell line under basal conditions and in response to oxidative stress. J Neurosci Res 84(6):1367-13755.Rick CE, Ebert A , Virag T, Bohn MC, Surmeier DJ. (2006) Differentiated dopaminergic MN9D cells only partially recapitulate the electrophysiological properties of midbrain dopaminergic neurons. Dev Neurosci 28(6):528-537.
• Jedes Fläschchen enthält ≥ 1 x 10⁶ lebensfähige Zellen.• MN9D-Zellen sind nachweislich murinen Ursprungs und negativ für eine speziesübergreifende Kontamination von Ratte, chinesischem Hamster, Goldhamster, Mensch oder nicht-humanen Primaten (NHP), geprüft durch einen Contamination-Clear-Panel von Charles River Animal Diagnostic Services.• Die Zellen wurden mit einem Maus-Essential-CLEAR-Panel von Charles River Animal Diagnostic Services negativ auf Infektionskrankheiten getestet.• Die Zellen wurden negativ auf Mykoplasmen getestet.
Leistungsmerkmale und Vorteile
Undifferenzierte oder differenzierte MN9D-Zellen werden häufig zur Modellierung dopaminerger Neuronen und zur Prüfung von Mechanismen und potenziellen Therapeutika verwendet, die für den Verlust von DA-Neuronen bei der Parkinson-Krankheit relevant sind.
Lagerung und Haltbarkeit
In Flüssigstickstoff aufbewahren. Die Zellen können nach dem ersten Auftauen für mindestens 10 Passagen kultiviert werden, ohne dass die Expression und Funktionalität der Zellmarker wesentlich beeinträchtigt wird.
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