MABS1271

Anti-EPCR-Antikörper, Klon JRK1535

clone JRK1535, from mouse

• Synonym(e): Endothelial protein C receptor, Activated protein C receptor, APC receptor, CD201, Endothelial cell protein C receptor
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: JRK1535, monoclonal
• Speziesreaktivität: human
• Darf nicht reagieren mit: mouse
• Methode(n): flow cytometry: suitable; neutralization: suitable
• Isotyp: IgG1κ
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NP_006395.2
• UniProt-Hinterlegungsnummer: Q9UNN8
• Versandbedingung: dry ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... PROCR(10544)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Endothelialer Protein-C-Rezeptor (UniProt Q9UNN8; auch bekannt als aktivierter Protein-C-Rezeptor, APC-Rezeptor, CD201, Endothel-Protein-C-Rezeptor) wird vom Gen PROCR (auch EPCR genannt) (Gen-ID 10544) in Menschen kodiert. Die Koagulationskaskade ist ein evolutionär konservierter Signalweg in Wirbeltieren, der für die Aufrechterhaltung der Gefäßintegrität sorgt. Die gerinnungsfördernde Aktivität des Gewebefaktorsignalwegs (TF) wird durch den gerinnungshemmenden Protein-C-Signalweg (PC) ausgeglichen, um eine intravaskuläre Thrombose zu vermeiden. EPCR ist ein CD1d–ähnlicher Immunrezeptor, der an die γ-Carboxyglutaminsäurereiche (Gla) Domäne des PC bindet und eine deutliche Verbesserung der PC-Aktivierung als Antwort auf die Thrombinbindung an das von den Endothelzellen exprimierte Thrombin bewirkt. EPCR dient auch als Co-Rezeptor für aktiviertes PC (aPC) in den durch die Aktivierung von PAR1 vermittelten gefäßschützenden Signalwegen. Des Weiteren ist EPCR auch in hämatopoetischen, neuronalen und epithelialen Progenitor-Populationen vorhanden, sowie in stark aggressiven basal-ähnlichen Subtypen des Mammakarzinoms. Eine endotheliale Überexpression des EPCR dämpft Metastasen, was vermutlich durch die Verminderung der das Überleben der metastatischen Tumorzellen unterstützenden Thrombingenerierung bewirkt wird. EPCR-abhängige PAR1-Aktivierung durch aPC stimuliert auch die Migration der Brustkrebszellen und verhindert die Apoptose von Lungenkrebszellen. EPCR-selektierte Populationen von Brustkrebszellen wachsen als nicht-adhärente Spheroide und haben schon bei Injektionen mit geringer Zellzahl eine hohe Tumorigenität. EPCR wird anfangs mit einem Signalpeptid (AS 1-17) produziert, dessen Entfernung ein reifes Protein mit einer großen extrazellulären Region (AS 18-210) ergibt, gefolgt von einer Transmembran-Domäne (AS 211-231) und einem kurzen zytoplasmatischen Schwanz (AS 232-238).

Spezifität

Klon JRK1535 blockiert die Bindung von aktiviertem Protein C (APC) an die Zelloberfläche des EPCR, indem er auf ein Konformationsepitop an der extrazellulären Domäne abzielt (Liaw, P.C., et al. (2001). J. Biol. Chem. 276(11): 8364-8370).

Immunogen

Epitop: Extrazelluläre Domäne.

Rekombinante extrazelluläre Domäne von humanem EPCR.

Anwendung

Der Anti-EPCR-Antikörper, Klon JRK1535, ist ein Antikörper gegen EPCR zur Verwendung in der Durchflusszytometrie für die Neutralisationsanalyse.

Durchflusszytometrie-Analyse: Mit 0,1 µg dieses Antikörpers aus einer repräsentativen Charge wurde EPCR in einer Million HeLa-Zellen nachgewiesen.
Durchflusszytometrie-Analyse: Eine mit Fluorescein konjugierte repräsentative Charge wies die durch die Behandlung mit Doxorubicin (Best.-Nr. 324380) induzierte Herunterregulierung der EPCR-Expression auf der Oberfläche von HUVEC-Zellen nach. Die Vorbehandlung mit Glutathion verhindert eine Doxorubicin-induzierte Herunterregulierung des EPCR (Woodley-Cook, J., et al. (2006). Mol. Cancer Ther. 5(12):3303-3311).
Durchflusszytometrie-Analyse: Eine repräsentative Charge blockierte das mit Fluorescein markierte APC von der Bindung exogen exprimierter EPCR an die Oberfläche von HEK293-Transfektanten. Der mit Fluorescein markierte Klon JRK1535 färbte HEK293-Transfektanten, die humanes EPCR exprimieren, aber keine Transfektanten, die murines EPCR exprimierten (Liaw, P.C., et al. (2001). J. Biol. Chem. 276(11):8364-8370).
Neutralisationsanalyse: Eine repräsentative Charge hemmte die APC-Generierung aus mit Acrolein behandelten HUVEC-Zellen, die an defibriniertes, rekalzifiziertes Plasma ausgesetzt waren (Swystun, L.L., et al. (2011). J Thromb Haemost. 9(4):767-775).
Neutralisationsanalyse: Eine repräsentative Charge bewirkte selektiv das Überleben von sortierten EPCR-positiven, jedoch keinen EPCR-negativen MDA-MB-231-Zellen des Brustfettpolsters in Zellkulturen. Eine Vorbehandlung der EPCR-positiven Zellen mit Klon JRK1535 vor der Xenotransplantation bewirkte die Unterdrückung der tumorinitiierenden Kapazität der EPCR-positiven Zellen in Mäusen in-vivo (Schaffner, F., et al. (2013). PLoS One. 8(4):e61071).

Forschungskategorie
Signalisierung

Forschungsunterkategorie
Immunologische Signalisierung

Qualität

Beurteilt mittels Durchflusszytometrie in A549-Zellen.

Durchflusszytometrie-Analyse: Mit 0,1 µg dieses Antikörpers wurde EPCR in einer Million A549-Zellen nachgewiesen.

Zielbeschreibung

24,80 kDa berechnet. Nach der Glykosylierung wurde ein größerer Wert als 40 kDa beobachtet (Woodley-Cook, J., et al. (2006). Mol. Cancer Ther. 5(12):3303-3311).

Physikalische Form

Aufgereinigter monoklonaler Maus-IgG1κ-Antikörper in PBS ohne Konservierungsmittel.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.
Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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