MABN750

Anti-VANGL2-Antikörper, Klon 2G4

clone 2G4, from rat

• Synonym(e): Vang-like protein 2, Loop-tail-associated protein, Loop-tail protein 1, Strabismus 1, Van Gogh-like protein 2
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: rat
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: 2G4, monoclonal
• Speziesreaktivität: human, mouse
• Speziesreaktivität (Voraussage durch Homologie): rat (based on 100% sequence homology), bovine (based on 100% sequence homology)
• Methode(n): ELISA: suitable; immunofluorescence: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG2aκ
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NP_277044
• UniProt-Hinterlegungsnummer: Q91ZD4
• Versandbedingung: ambient
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... VANGL2(57216) ; mouse ... Vangl2(93840)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Das Vang-ähnliche-Protein-2 (UniProt Q91ZD4; auch bekannt als Loop-Tail-assoziiertes-Protein, Loop-Tail-Protein-1, Van-Gogh-ähnliches-Protein-2) wird in murinen Spezies durch das Vangl2-Gen (auch bekannt als Lpp1, Ltap, Stb1, Stbm) (Gen-ID 93840) kodiert. Die Van-Gogh-ähnlichen Proteine in Säugetieren (VANGL1 und VANGL2) sind Orthologe von Vangl/Strabismus, das ursprünglich als zentrales PCP-Gen (Planar Cell Polarity) in Drosophila identifiziert wurden. VANGL1 und VANGL2 sind Proteine des WNT/PCP-Signalwegs, der als zentraler Regulator für Zellpolarität und direktionale Bewegungen fungiert und eine wichtige Rolle bei der Morphogenese von Geweben und der Embryonalentwicklung spielt. PCP ist am Neuralrohrverschluss, an der Ausrichtung des Haarbündels in sensorischen Zellen des Innenohrs und der motilen Zilie im Primitivknoten des Embryos sowie an der asymmetrischen Zellteilung beteiligt. Missense-Mutationen in VANGL1 und VANGL2 wurden bei humanen Embryonen festgestellt, die von schweren Neuralrohrdefekten (NTD) betroffen sind. Ebenso verursacht die homozygote Vangl2-Looptail-Mutation (Lp) bei Mäusen Defekte bei der Morphogenese und Musterbildung in zahlreichen Geweben, einschließlich besonders schwerwiegender Defekte beim Neuralrohrverschluss (Kraniorhachischisis). Sowohl VANGL1 als auch VANGL2 sind Proteine mit 4 Transmembrandomänen (AS 109–129, 148–168, 179–199 und 218–238 bei Maus-VANGL2) in der Plasmamembran mit zytoplasmatischen N- und C-terminalen Enden (AS 1–108 und 239–521 bei Maus-VANGL2); sie zeigen überlappende, jedoch nicht identische Expressionsmuster im Mäusehirn. Beide Proteine können Homo- oder Heterodimere bilden, wodurch während der Embryonalentwicklung unterschiedliche Komplexe entstehen.

Spezifität

Der Klon 2G4 reagierte spezifisch mit VANGL2, aber nicht mit VANGL1. Klon 2G4 erkannte die shRNA-vermittelte VANGL2-Herunterreguation in humanen SK-BR-7 Brustkarzinomzellen (Belotti, E. et al (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Immunogen

Das GST-markierte rekombinante N-terminale Fragment von VANGL2 ist bei Mensch, Maus und Ratte zu 100 % konserviert.

Anwendung

Der Anti-VANGL-Antikörper, Klon 2G4, Art.-Nr. MABN750, ist ein hochspezifischer monoklonaler Ratten-Antikörper, der gegen VANGL2 gerichtet ist und in ELISA, Immunfluoreszenz, Immunpräzipitation und Western Blot getestet wurde.

ELISA-Analyse: Der Überstand von Klon-2G4-Hybridomkulturen wies spezifisch das N-terminale-Fragment-GST-Fusionsprotein von VANGL2, nicht jedoch von VANGL1, nach (Belotti, E. et al (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Immunfluoreszenz-Analyse: Eine repräsentative Charge wies mittels Fluoreszenz-Immunhistochemie von mit 4 % Paraformaldehyd fixierten Schnitten von Komplettpräparaten der Cochlea eine VANGL2-Immunreaktivität nach, die mit der von VANGL1 an der Zellmembran der stereoziliären Haarbündeln kolokalisierte. In Gewebeschnitten von homozygoten Mäusen mit Vangl2-Looptail-Mutation (Lp/Lp) wurde ein drastisch reduzierter VANGL2-Gehalt beobachtet (Belotti, E. et al. (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Analyse mittels Immunpräzipitation: Eine repräsentative Charge immunpräzipitierte das N-terminale-Fragment-GST-Fusionsprotein von VANGL2, aber nicht von VANGL1, sowie endogenes VANGL2 aus unbehandelten, aber nicht aus mit VANGL2-shRNA behandelten humanen SK-BR-7-Brustkarzinomzellen (Belotti, E., et al (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies das endogene VANGL2 sowie das exogen exprimierte mit dem gelben fluoreszierenden Protein Venus markierte VANGL2 in transfizierten Zellen der humanen CLL-Zelllinie (chronische lymphatische Leukämie) MEC1 nach (Kaucká, M., et al (2015). Cell Commun Signal. 13:2).

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies das N-terminale-Fragment-GST-Fusionsprotein von VANGL2, aber nicht von VANGL1, sowie endogenes VANGL2 im Lysat von unbehandelten, aber nicht aus mit VANGL2-shRNA behandelten humanen SK-BR-7-Brustkarzinomzellen nach (Belotti, E., et al (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies im Gehirn und in der Lunge von Mäusen eine höhere VANGL2-Expression nach als in der Niere. Bei Mäusen mit heterozygoter Vangl2-Looptail-Mutation (Lp) wurde eine verringerte VANGL2-Expression in der Cochlea festgestellt. Die Abnahme war bei homozygoten Vangl2-Mäusen (Lp/Lp) sogar noch stärker ausgeprägt (Belotti, E., et al (2012). PLoS One. 7(9):e46213).

Forschungskategorie
Neurowissenschaft

Qualität

Beurteilt mittels Western Blot in Lysat von Mäusegehirngewebe.

Western-Blot-Analyse: Eine 1:500-Verdünnung dieses Antikörpers wies VANGL2 in 10 µg Hirngewebelysat von Mäusen nach.

Zielbeschreibung

~ 60 kDa beobachtet. 59,71 kDa (Mensch) und 59,77 kDa (Maus und Ratte) berechnet. In manchen Lysaten können nichtcharakterisierte Banden auftreten.

Physikalische Form

Aufgereinigtes Ratten-IgG2a in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH 7,4); 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 2–8 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Haftungsausschluss

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