MABC530

Anti-CEP-Antikörper, Klon Das-1 (7E12H12)

clone 7E12H12, from mouse

• Synonym(e): Colon epithelial protein, CEP, Das-1 protein
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: affinity purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: 7E12H12, monoclonal
• Speziesreaktivität: human
• Methode(n): ELISA: suitable; dot blot: suitable; immunohistochemistry: suitable (paraffin); immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgMκ
• Versandbedingung: wet ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Der monoklonale Antikörper (mAb) Das-1 wurde ursprünglich als Klon 7E12H12 bezeichnet und es wurde angenommen, dass er gegen eine Kolon-spezifische Tropomyosin(TM)-Isoform von 40 kDa oder ein TM-verwandtes Protein gerichtet ist. Später wurde festgestellt, dass dieser Klon spezifisch ein hochmolekulares Chaperon-Protein immunpräzipitierte, das auf Tropomyosin 5 (TM5) in humanen Kolonepithelzellen abzielt und anschließend als Kolonepithel-Protein (CEP) bezeichnet wurde. Das Das-1-Ziel ist ein Glykoprotein mit je nach Glykosylierungsgrad variierendem scheinbarem Molekulargewicht. Das aus der Plasmamembran von DLD-1 Darmkrebszellen immunpräzipitierte Ziel-Glykoprotein weist ein scheinbares Molekulargewicht von 185 kDa auf, während das aus LS-180-Darmkrebszellen isolierte Zielmolekül mit einem Größenbereich von über 200 kDa migriert. Berichten zufolge ist die Das-1/CEP-Immunreaktivität mit Barrett-Metaplasie, Barrett-Adenokarzinom sowie mit Adenokarzinomen des Magens und Karzinom-assoziierter intestinaler Metaplasie assoziiert, während keine Reaktivität in der normalen Schleimhaut von Ösophagus, Magen und Dünndarm festgestellt wurde. In ELISA und Immunblots gegen die rekombinanten humanen Tropomyosin-Isoformen 1–5 reagierte keine der fünf hTM-Isoformen mit mAb Das-1. Wie durch Immunfluoreszenz- und FACS-Analysen bestimmt, wird die CEP/Das-1-Immunreaktivität in mehreren Darmkrebszelllinien (DLD-1, LS180, T84), nicht jedoch in der kolorektalen Adenokarzinom-Zelllinie HT-29 nachgewiesen. Bei nicht aus dem Kolon stammenden Epithelzelllinien (293-T, HeLa, Pankreaskarzinom) oder hämatopoetischen Linien (K562, KGI, Daudi) wird keine CEP/Das-1-Immunreaktivität nachgewiesen.

Spezifität

Der Klon 7E12H12 (mAb Das-1) reagiert spezifisch mit dem Kolonepithel-Protein (CEP), nicht jedoch mit menschlichen Tropomyosin-Isoformen (hTM1–5). Die CEP/Das-1-Immunreaktivität wird in mehreren Darmkrebslinien (DLD-1, LS180, T84) nachgewiesen, nicht jedoch in der kolorektalen Adenokarzinom-Zelllinie HT-29. Bei nicht aus dem Kolonepithel stammenden Epithelzelllinien (293-T, HeLa, HUVEC, Pankreaskarzinom), oder hämatopoetischen Zelllinien (K562, KGI, Daudi) wird keine CEP/Das-1-Immunreaktivität nachgewiesen.

Immunogen

Menschlicher Kolonproteinextrakt.

Anwendung

Anti-CEP-Antikörper, Klon Das-1 (7E12H12), ist ein Antikörper gegen CEP zur Verwendung in Immunhistochemie (Paraffin), Western Blot, Immunpräzipitation, ELISA, Dot Blot.

Western-Blot-Analyse: Vor der Herstellung von Art.-Nr. MABC530 durch Ionenaustauschchromatographie wurde die CEP-Immunreaktivität des Aszites durch Western Blot gegen Colitis ulcerosa(CU)-Gewebehomogenate, LS180 Kolonadenokarzinom-Zelllysate, LS180-Kulturüberstand und gereinigtes CEP bestimmt (mit freundlicher Genehmigung von Dr. Kiron M. Das, UMDNJ-Robert Wood Johnson Medical School, New Jersey) .

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies erhöhte Konzentrationen von CEP (Kolonepithel-spezifisches Protein) bei Proben von Patienten mit intraduktaler papillär-muzinöser Neoplasie (IPMN) mit Hochrisiko-/malignen Läsionen nach (Das, K.K., et al (2014). Gut. 63(10): 1626-1634).

Western-Blot-Analyse: Eine repräsentative Charge wies CEP in der Kolonadenokarzinom-Zelllinie LS180 und in isolierten Kolonepithelzellen sowie in LS180-Kulturüberstand, nicht jedoch in normalen jejunalen Epithelzellen nach (Kesari, K.V., et al (1999). Clin. Exp. Immunol. 118(2):219-227).

Analyse mittels Immunpräzipitation: Eine repräsentative Charge koimmunpräzipitierte Tropomyosin 5 mit CEP aus dem Kulturüberstand der humanen Adenokarzinom-Zelllinie LS180 (Kesari, K.V., et al (1999). Clin. Exp. Immunol. 118(2):219-227).

ELISA-Analyse: Eine repräsentative Charge wurde als Fänger-Antikörper in Kombination mit dem Isotyp-gewechselten mAb Das-1-IgG als Nachweis-Antikörper verwendet, wobei gereinigtes CEP und Proben der Zystenflüssigkeit von Patienten mit intraduktaler papillär-muzinöser Neoplasie (IPMN) verwendet wurden (Das, K.K., et al (2014). Gut. 63(10): 1626-1634).

Immunhistochemische Analyse: Eine repräsentative Charge wies eine signifikant höhere Immunreaktivität von CEP (Kolonepithel-spezifisches Protein) bei Proben von Patienten mit intraduktaler papillär-muzinöser Neoplasie (IPMN) mit Hochrisiko-/malignen Läsionen nach (Das, K.K., et al (2014). Gut. 63(10): 1626-1634).

Immunhistochemische Analyse: Repräsentative Chargen wiesen Immunreaktivität von CEP (Kolonepithel-spezifisches Protein) sowohl durch fluoreszierende als auch nicht fluoreszierende Immunhistochemie in Enterozyten des Kolons, aber nicht des Dünndarms, an gefrorenen und formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten Gewebeschnitten nach (Moriichi, K. et al (2009). Int. J. Cancer. 124(6):1263-1269; Piazuelo, M.B., et al. (2004). Mod. Pathol. 17(1):62-74; MIrza, Z.K., et al. (2003). Gut. 52(6):807-812; Glickman, (2001). J.N., et al. Am J Surg Pathol. 25(1):87-94; Griffel, L.H., et al. (2000). Dig. Dis. Sci. 45(1):40-48; Hamilton, M.I., et al. (1995). Clin. Exp. Immunol. 99(3):404-411; Halstensen, T. S., et al. (1993). Gut. 34(5):650-657; Das, K.M., et al. (1987). J. Immunol. Vol. 139(1):77-84).

Dot-Blot Analyse: Eine repräsentative Charge wies CEP-Immunreaktivität in Kolon-Proteinextrakten nach (Hamilton, M.I., et al (1995). Clin. Exp. Immunol. 99(3):404-411).

Qualität

Mittels Immunhistochemie in humanem Kolongewebe beurteilt.

Immunhistochemische Analyse: Eine 1:1.000-Verdünnung dieses Antikörpers wies CEP in humanem Kolongewebe nach.

Zielbeschreibung

> 200 kDa beobachtet. Variiert je nach Glykosylierungsgrad.

Physikalische Form

Format: Aufgereinigt

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 2
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable